АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология

Тема: Определение кельта в органах и тканях животных

Прочитайте:
  1. A- Определение индекса гигиены полости рта
  2. E Определение в крови уровней мочевины и креатинина
  3. I. Аборты. Определение понятия.
  4. I. Иммунология. Определение, задачи, методы. История развитии иммунологии.
  5. I. Определение инфекционного процесса и формы его проявления.
  6. I. Определение, классификация, этиология и
  7. I. Тема: Плевриты.
  8. II. Инструменты для операций на органах желудочно-кишечного тракта
  9. II. Тема:Легочное сердце.
  10. IV. Инструменты для операций на мочеполовых органах

Цель занятия: Изучить методы определение кельта в плазме крови, мясе, внутренних органах и кале.

 

Принцип метода. Метод, основан на извлечении кельтана из биологических объектов гексаном: очистке экстракта из кала через слой сернокислого натрия, а из мышц и внутренних органов – через слой силикагеля ЛС (для тонкослойной хроматографии) с последующей элюацией смесью бензола с гексаном; концентрации экстракта и разделении его методом хроматографии в тонком слое, проявлении раствором аммиаката серебра в ацетоне с последующим ультрафиолетовым облучением. Количественное определение проводится путем измерения площадей пятен проб и стандартных растворов.

Определение в плазме крови. В центрифужную пробиркус 1-2 каплями гепарина берут 6-8 мл крови и центрифугируют 10-15 мин при 8 тыс. об/мин 3-5 мл полученной плазмы подкисляют 0,1 N раствором соляной кислоты до рН 5-6, перемешивают с 2-3 мл гексана в течение 3-5 мин (избегать образования эмульсии). Гексановый слой отстаивают и отсасывают пипеткой со шприцем. Экстракцию повторяют второй раз, объединенный экстракт упаривают в токе воздуха до малого объема.

Определение мяса, внутренних органов. 10 мг мяса, 5 г печени, почек тщательно измельчают ножницами, растирают в ступке с кварцевым песком, заливают дистиллированной водой, подкисленной 0,1 N раствором соляной кислоты до рН 5-6 (1:10). Смесь выдерживают 8-12 часов при комнатной температуре, периодически встряхивая. В делительной воронке смесь тщательно перемешивают 3-5 минут (не встряхивая). Гексановый слой отделяют, экстракцию повторяют второй раз. После этого объединенный экстракт фильтруют через воронку, в нижней части которой уложена вата (не более 50 мг), насыпан слой 3-4 см силикагеля ЛС (для тонкослойной хроматографии).

Перед употреблением воронку промывают 20 мл гексана. Из воронки кельтан элюируют смесью бензола с гексаном (3:1) два раза порциями по 20 мл. Элюат упаривают в токе воздуха до малого объема или досуха.

Определение в кале. 0,1 г кала заливают 15-20 мл гексана, интенсивно 1-2 минуты встряхивают и оставляют на 30 минут при периодическом помешивании. Экстракт фильтруют через бумажный складчатый фильтр, смоченный гексаном. После этого пропускают через воронку, в нижней части которой вата (не более 50 мг), сверху насыпан слой 2-3 безводного сернокислого натрия. Воронку перед употреблением промывают 20 мл гексана. Экстракт упаривают в токе воздуха до малого объема.

В упаренном до малого объема экстракте из плазмы крови, мышечной ткани, внутренних органов, кала кельтан определяют методом хроматографии в тонком слое. Для этого пятна испытуемой пробы, полученной на хроматографической пластинке сравнивают со стандартным раствором препарата (10 мг кельтана хч растворяют в 100 мл гексана). В качестве подвижного растворителя используют смесь гексана с ацетоном (1:6).Реактив для проведения пятен пестицида готовят в день употребления по прописи: 0,1г азотнокислого серебра растворяют в 1 мл дистиллированной воды и доводят объем раствора до 100 мл ацетоном. К готовому реактиву прибавляют 2 мл раствора аммиака (уд вес 0,9). После проявления пластинки подвергают действию ультрафиолетовых лучей в течение 10-15 минут. Rf кельтана при гексано-ацетоновом подвижном растворителе равен 0,4.

Контрольные вопросы:

1 Определение кельта в плазме крови и в кале?

2 Определение кельта в мясе и внутренних органах?


Дата добавления: 2015-02-06 | Просмотры: 1000 | Нарушение авторских прав



1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | 13 | 14 | 15 | 16 | 17 | 18 | 19 | 20 | 21 | 22 | 23 | 24 | 25 | 26 | 27 | 28 | 29 | 30 | 31 | 32 | 33 | 34 | 35 | 36 | 37 | 38 | 39 | 40 | 41 | 42 | 43 | 44 | 45 | 46 | 47 | 48 |



При использовании материала ссылка на сайт medlec.org обязательна! (0.003 сек.)