 |
|
АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология |
Метод флуоресцюючих антитіл (МФА)
Імунофлюоресценція – специфічне світіння в культурах клітин, інфікованих вірусами, що виникає під дією ультрафіолетового опромінення, у разі обробки сироватками, міченими флюорохромами. МФА застосовують для виявлення вірусних антигенів у патологічному матеріалі (мазки з носової частини глотки, з біоптатів, мазки-відбитки з трупного матеріалу, інфіковані культури клітин), а також антитіла в сироватках крові осіб, які перехворіли на вірусну інфекцію. Під час дослідження у люмінесцентному мікроскопі (у ультрафіолетовому спектрі) утворений специфічний комплекс антиген-антитіло виявляється за світінням. МФА грунтується на взаємодії антигену з відповідним антитілом, міченим флуоресцюючими барвниками. Серед багатьох запропонованих флуорохромів в практиці найширше використовують ФІТЦ (флуоресцеїнізотіоціанат), що зумовлює люмінесценцію зеленого кольору, і родамін, який дає люмінесценцію червоного кольору. МФА дає змогу проводити експрес-діагностику більшості вірусних інфекцій: натуральної віспи, сказу, простого герпесу, вітряної віспи й оперезуючого лишаю, ротавірусних гастроентеритів, грипу, парагрипу, аденовірусної, респіраторно-синцитіальної, ріно- та арбовірусної інфекції, кору, поліомієліту, інших ентеровірусних інфекцій, червоної висипки, СНІДу та ін. На препарат з фіксованими інфікованими клітинами наносять на 30 хв. специфічну люмінсціюючу сироватку (кон’югат), потім надлишок її зливають, препарат промивають і досліджують у люмінесцентному мікроскопі. Метод МФА застосовують у трьох основних модифікаціях: прямого, непрямого методів і методу антикомплементарної імунофлуоресценції. За допомогою прямого МФА виявляють вірусні антигени у інфікованих клітинах. Метод непрямого МФА складається з двох етапів. На першому відбувається взаємодія антигена з неміченим антитілом. На другому – немічене специфічне антитіло зв’язується з антивидовим міченим антитілом. Антивидові антитіла одержують шляхом імунізації одного виду тварин сироваткою іншого виду тварин або людини. Потім антивидові імуноглобуліни мітять ФІТЦ. За допомогою непрямого методу можна виявляти як вірусні антигени на інфікованих клітинах, так і антитіла (зокрема IgM) у сироватках крові хворих і осіб, які перехворіли на вірусну інфекцію.
Дата добавления: 2014-12-11 | Просмотры: 968 | Нарушение авторских прав |