АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология

Основы гистологической техники

Прочитайте:
  1. D. ОСНОВЫ МЕДИЦИНСКОЙ МИКОЛОГИИ
  2. I. ОСНОВЫ МЕДИЦИНСКОЙ ГЕЛЬМИНТОЛОГИИ
  3. II. Клинико-физиологические основы отклоняющегося поведения.
  4. V. Молекулярные основы патогенеза эндокринных опухолей
  5. VII. Основы ухода за больным.
  6. Административно-правовые основы деятельности центров ГСЭН
  7. Анатомические и физиологические основы гистопатологических и электрофизиологических исследований
  8. Анатомические основы и техника лечебных манипуляций при острой дыхательной недостаточности
  9. Анатомо-топографические основы сердечно-сосудистой системы
  10. Анатомо-физиологические основы дыхательной системы.

Для приготовления гистологических препаратов взятые кусочки тканей и органов должны пройти следующие этапы проводки: 1 - взятие материала, 2 - фиксация, 3 - промывание, 4 - обезвоживание материала, 5 - уплотнение, 6 - изготовление срезов, 7 - окрашивание срезов, 8 - обезвоживание, 9 - просветление, 10 - заключение.

1. Взятие материала. Для приготовления гистологических препаратов материал берут от животных, умерщвленных для этой цели, от животных и людей во время операции (биопсия) и от трупов.

2. Фиксация проводится для сохранения прижизненной структуры ткани и кусочков органов путем быстрой коагуляции ее белков. Различают простые фиксаторы (чаще всего 10% формалин) и сложные (смесь Ценкера, Буэна, Мюллера и др.). Вырезанный кусочек или орган следует тотчас же опускать в заранее приготовленную фиксирующую жидкость. Количество фиксирующей жидкости должно в 20 – 30 раз превосходить объем кусочка. Срок фиксации тканей в формалине 24 – 48 часов. В большинстве случаев фиксация производится при комнатной температуре. Размер исследуемых кусочков должен быть не более 1 Х 1 см. Фиксирующие растворы следует готовить непосредственно перед их употреблением.

3. Промывание. По окончании фиксации объектыпромывают водой для удаления фиксатора и артефактов. Промывка длится до 1 – 2 суток.

4. Обезвоживание материала. При этом взятые кусочки тканей последовательно обрабатывают спиртом возрастающей концентрации (70%, 80 %, 96%, 100%) в каждом растворе по 24 часа. Вслед за обезвоживанием в спиртах следует заливка материала в специальные плотные среды (парафин).

5. Уплотнение. Схема заливки в парафин:

1. Обезвоживание в спиртах 70 %, 80 %, 96 % и абсолютный спирт по 24 часа в каждом.

2. Погружение объекта в смесь равных частей абсолютного спирта и ксилола на 1 – 3 часа.

3. Перенос объекта в чистый ксилол на 3 часа.

4. Погружение в раствор парафина в ксилоле при температуре 37 градусов на 2 часа.

5. Перенос в 1-й чистый парафин на 2 часа при температуре термостата 56 градусов.

6. Перенос во 2-й чистый парафин на 1 – 2 часа при 56 градусов.

7. Заливка материала чистым парафином в бумажных формочках.

8. Наклеивание на деревянные кубики.

 

6. Изготовление срезов производится на санном микротоме толщиной 7 – 10 мкм. Предварительно предметные стекла очищают от грязи и обезжиривают их поверхность. Для того чтобы парафиновые срезы можно было подвергнуть дальнейшей обработке, их необходимо наклеить на предметное стекло в расправленном положении. Клеевой основой для предметных стекол служит белок куриного яйца с глицерином в равных количествах по объему. Предварительно срезы переносят в теплую воду для расправления, затем смазанное белком с глицерином предметное стекло подводят в наклонном положении под плавающий срез.

7. Окраска препаратов. Различная кислотность субстрата клетки обеспечивает избирательное отношение частей клетки к красителям. Структуры, имеющие кислую реакцию, обладают сродством к основным красителям, поэтому их называют базофильными (базофильны ядра клеток, цитоплазма белоксинтезирующих клеток). Свойство окрашиваться основными красителями – базофилия. Структуры, щелочной реакцией обладают сродством к кислым красителям (оксифилия) и называются оксифильными (цитоплазма большинства клеток, волокна межклеточного вещества). Окраска гематоксилин - эозином наиболее распространенный метод окрашивания срезов. Гематоксилин окрашивает ядро в синий цвет, тогда как эозин окрашивает цитоплазму в красный цвет. Гематоксилин представляет собой экстракт древесины кампешевого дерева. Эозин – искусственная краска.


Дата добавления: 2015-02-05 | Просмотры: 1501 | Нарушение авторских прав



1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | 13 | 14 | 15 | 16 | 17 | 18 | 19 | 20 | 21 | 22 | 23 | 24 | 25 | 26 | 27 | 28 | 29 | 30 | 31 | 32 | 33 | 34 | 35 | 36 | 37 | 38 | 39 | 40 | 41 | 42 | 43 | 44 | 45 | 46 | 47 | 48 | 49 | 50 | 51 | 52 | 53 | 54 | 55 | 56 | 57 | 58 | 59 | 60 | 61 | 62 | 63 | 64 | 65 | 66 | 67 | 68 | 69 | 70 | 71 | 72 | 73 | 74 | 75 | 76 | 77 | 78 | 79 | 80 | 81 | 82 | 83 | 84 | 85 | 86 | 87 | 88 | 89 | 90 | 91 | 92 | 93 | 94 | 95 | 96 | 97 | 98 | 99 | 100 | 101 | 102 |



При использовании материала ссылка на сайт medlec.org обязательна! (0.003 сек.)