АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология

Приготовление спиртов различной концентрации для спиртовой батареи

Приготовление абсолютного спирта из 96%

Абсолютный спирт можно приготовить из 96 %. Для этого применяют сульфат меди, который помещают в ступку и прокаливают на спиртовке или в термостате, периодически растирая и размешивая до консистенции пыли и бледно-голубого цвета. Затем сульфат меди (1 часть) засыпают в банку с 96 % спиртом (4 или 6 частей), плотно закрывают ее крышкой, взбалтывают и оставля­ют на несколько дней, периодически встряхивая. Сульфат меди адсорбирует воду из спирта и вновь приобретает синюю окраску. Перед использованием абсолютного спирта проводят его контроль спиртометром или в пробирку с небольшим количеством ксилола (4—5 мл) добавляют каплю приготовленного спирта (раствор мутнеет, если спирт недостаточно обезвожен). Хорошим адсор­бентом воды из спирта является также силикагель после предва­рительного просушивания его в термостате.

Обезвоживание данного материала условия и время содержания в спиртах

Обезвоживается материал в многофункциональном гистологическом процессоре под давлением и периодическим добавлением порций изопропилового 96 спирта. Приблизительное время – 30 минут

Пропитывание

Приготовление высококачественных гистологических препаратов требует наличия равномерно тонких срезов с исследуемого объекта. Для того чтобы их получить, кусочки тканей надо пропитать и залить такой средой, которая превратила бы их в хорошо режущуюся массу.

Методика пропитывания.

Обезвоженные и уплотненные кусочки перекладывают из абсолютного спирта в смесь абсолютного спирта(этанол или изопропанол) и О-ксилола (1:1) на 2-3 ч, а затем в чистый ксилол, где они вначале плавают (выступая над его поверхностью), а затем по мере пропитывания постепенно погружаются.

В процессе удаления спирта ксилол меняют 2-3 раза на протяжении 1-3 ч (в зависимости от свойств объекта и толщины кусочков). При величине кусочка 1 х 1 см его держат в ксилоле 30 мин. Затем, соблюдая принцип постепенного замещения ксилола парафином, помещают объект в смесь из равных частей парафина (желательно мягкого) и ксилола. Эта смесь, застывающая при комнатной температуре, при нагревании до 37°С расплавляется и приобретает жидкую консистенцию. Кусочки находятся в ксилоле - парафине при 37°С в течение 3-6 ч (при 56°С время сокращают до 30 мин -1 ч). При необходимости отсрочить дальнейшую обработку материала, можно после погружения объекта в смесь ксилола с парафином извлечь сосуд из термостата и оставить при комнатной температуре на ночь (или даже на несколько дней) в закрытом состоянии, а затем, вновь расплавив в термостате при 56°С, перенести в рядом стоящий горячий парафин для пропитывания. Излишнее пребывание объекта в растопленном ксилол -парафине ухудшает качество резания.

Для полного освобождения объекта от ксилола кусочки проводят последовательно через две-три порции расплавленного парафина. Время пребывания в парафине зависит от величины кусочков и свойств ткани. Кусочки толщиной 2-5 мм должны в общей сложности находиться в парафине 2-5 ч.

Если объект хорошо обезвожен и не содержит спирта, задержка в парафине не ухудшает качество объекта даже при пропитывании в течение нескольких дней. При наличии же в кусочках остатков воды и спирта результаты обработки ухудшаются прямо пропорционально длительности излишнего пребывания объекта в расплавленном парафине. Парафин для пропитывания можно применять многократно, но при этом нужно строго следить за тем, чтобы не перепутать порции парафина. Для этого бюксы (или стаканчики) необходимо обозначить соответствующими цифрами (1, 2, 3)

.

Заливка

Цель

Для уплотнения кусочков ткани.

Техника заливки

Готовый материал вынимают из кассеты и кладут в специальную ячейку. Дальше материал заливают разогретым до 54 градусов гомогенезированным парафином с помощью модульной системы заливки парафином tissue TEK TEC 5. Дальше ячейку накрывают донышком кассеты и кладут в холодильник до затвердевания парафина.

Маркировка

Маркируется кассета во время взятия материала и предметное стекло, на которое будет положен материал. Номер присваивается гистологический.

Дата добавления: 2015-11-26 | Просмотры: 2727 | Нарушение авторских прав