АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология

Работа 4. Приготовление мазка. Простая окраска

Цель работы: овладеть методикой приготовления мазка; изучить морфологические формы бактерий

Ход работы:

1. На обезжиренное стерильное предметное стекло по центру нанести каплю воды и перенести в нее стерильной микробиологической петлей небольшое количество исследуемого материала с плотной питательной среды (например, пленку Bac. mesentericus с ломтика картофеля).

2. Получившуюся суспензию равномерно размазать петлей на площади 2-3 см² возможно более тонким слоем. Простерилизовать петлю обжиганием в пламени спиртовки.

3. Препарат высушить на воздухе при комнатной температуре.

4. Зафиксировать мазок. Цель фиксации: Микроорганизмы погибают, лучше прокрашиваются красителем, прикрепляются к стеклу. Физическая фиксация. Для этого препарат 2-3 раза медленно провести через пламя спиртовки, держа предметное стекло мазком вверх. Химическая фиксация. На мазок нанести смесь Никифорова на 5-7 мин.

5. Охладить предметное стекло до комнатной температуры.

6. Предметное стекло положить на мостик над ванночкой и залить красителем – фуксином или метиленовым синим на 1-3 минуты.

7. По окончании окраски препарат промыть водой, держа стекло в чуть наклонном положении над ванночкой.

8. Снять избыток воды с предметного стекла (не касаясь мазка) фильтровальной бумагой и досушить на воздухе.

9. Для микроскопирования нанести на мазок каплю иммерсионного масла и рассмотреть под микроскопом с объективом МИ-90^х. В правильно окрашенном и хорошо промытом препарате поле зрения светлое и чистое, окрашен только клетки микроорганизмов.

10. Просмотреть приготовленные препараты, сделать зарисовки микроорганизмов, обращая внимание на форму, взаимное расположение клеток и на соотношение размеров различных бактерий.

Рис. 1. Микрофлора зубного налета (по Борисову и др., 1993): 1 – Leptotrichia buccalis; 2 – Lactobacillus sp.; 3,4 – Treponema denticola; Treponema sp.; 5,6 – стрептококки и диплококки (Streptococcus salivarius, S.mitis, S. sanguis, Veilonella sp.); 7 – Fusobacterium nucleatum

Задание: Приготовить фиксированные и окрашенные микропрепараты микроорганизмов:

1. культуры картофельной палочки;
2. Микрофлора молока;
3. Микрофлора зубного налета.

Рассмотреть микропрепараты при увеличении микроскопа МИ-90^х, сделать рисунки с обозначениями.

Занятие3-4

Дата добавления: 2015-09-03 | Просмотры: 817 | Нарушение авторских прав