АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология

Ход исследования.

Унифицированный метод подсчета эритроцитов в счетной камере (1972).

Принцип.

Подсчет эритроцитов под микроскопом в определенном количестве квадратов счетной сетки и пересчет на 1 мкл крови, исходя из объема квадратов и разведения крови.

Реактивы.

0,9 % раствор хлорида натрия или раствор Гайема: ртуть хлористая 0,5 г, натрия сульфат 5 г, натрия хлорид 1 г, вода дистиллированная до 200 мл.

Специальное оборудование.

Счетная камера Горяева.

Микроскоп.

Ход исследования.

Разводят исследуемую кровь в 200 раз.

Для этого в сухую пробирку отмеривают 4 мл реактива 1 или 2. Пипеткой набирают 0,02 мл крови. Кончик пипетки вытирают фильтровальной бумагой или марлей и кровь выдувают на дно пробирки; пипетку тщательно промывают в верхнем слое жидкости, повторно набирая ее и выдувая в пробирку, содержимое пробирки перемешивают и оставляют стоять до момента счета (рекомендуется считать эритроциты в ближайшие 2—3 ч после взятия крови, а при гемолитических и В₁₂-дефицитных анемиях — сразу после взятия, так как эритроциты могут разрушиться). Недопустимо оставлять взятую кровь с несосчитанными эритроцитами на следующий день, так как эритроциты частично разрушаются.

Подготавливают счетную камеру:

протирают насухо камеру с сеткой и покровное стекло, затем покровное стекло притирают к камере, слегка надавливая на стекло таким образом, чтобы по краям его появились радужные полосы (это свидетельствует о требуемой высоте камеры — 0,1 мм).

Заполняют счетную камеру разведенной кровью:

предварительно несколько раз тщательно встряхивают содержимое пробирки, затем пастеровской пипеткой или стеклянной палочкой отбирают каплю разведенной крови и подносят ее к краю покровного стекла,следя за тем,чтобы она равномерно без пузырьков воздуха заполнила всю поверхность камеры с сеткой, не затекая в бороздки. Заполненную камеру оставляют в горизонтальном положении 1 мин (для оседания эритроцитов).

Для подсчета эритроцитов, не меняя горизонтального положения камеры, помещают ее на столик микроскопа и с помощью малого увеличения микроскопа (объектив 8Х, окуляр 10Х) находят верхний левый край сетки (для лучшего контрастирования следует опустить конденсор и прикрыть диафрагму). Счет производят в 5 больших квадратах, разделенных на 16 малых, т. е. в 80 малых квадратах. Рекомендуется считать клетки в квадратах сетки, расположенных по диагонали. Для того чтобы одни и те же эритроциты, лежащие на линиях, не попали дважды в счет, принято для каждого квадрата, кроме элементов, лежащих внутри квадрата, считать расположенные на определенных двух линиях (например, на левой и верхней).

Расчет количества эритроцитов в 1 мкл крови производят, исходя из разведения крови (200), числа сосчитанных квадратов (80) и объема 1 малого квадрата (1/4000мкл), по следующей формуле: X=(a*4000*200)/80. Где Х — число эритроцитов в 1 мкл крови: а — число сосчитанных эритроцитов. В результате сокращения Х=а*10000.

Подсчет эритроцитов в счетной камере является трудоемким и недостаточно точным методом. На результатах подсчета сказываются малейшая неточность при взятии крови в пипетку, неудовлетворительная градуировка пипеток, неравномерное заполнение камеры, любое отклонение от правил подготовки счетной камеры, ее заполнения и подсчета клеток.

4. Сосудисто-тромбоцитарный гемостаз, его основные этапы, механизмы.
Сосудисто-тромбоцитарный гемостаз. Повреждение сосуда (этап – механизм):

1. Рефлекторный спазм поврежденных сосудов. - Увеличение симпатической нервной системы, освобождение адреналина, норадреналина, серотонина, тромбоксана.

2. Адгезия тромбоцитов. – Выделение АДФ из эритроцитов и травмированных сосудов => активация тромбоцитов => тромбоциты^а + фактор Виллебранта => прилипание к стенке сосуда.

3.Обратимая агрегация тромбоцитов. – Освобождение АТФ, тромбоксана, образование белковых мостиков между тромбоцитами и стенкой сосуда.

4. Необратимая агрегация тромбоцитов. – Дополнительное освобождение АДФ, адреналина, норадреналина, тромбина => образование сети фибрина.

5. Ретракция сгустка. – Освобождение тромбоцитарного фактора 6 (тромбостенина)

Билет 3
1. Понятие об антигенах системы резус, их отличия от антигенов системы АВО.
Антигены системы резус ( Rh) – это группа из нескольких антигенов, тоже расположенных в мембране эритроцитов.
Одно из различий между системами АВО и резус заключается в том, что в крови человека уже после первых месяцев жизни всегда содержатся агглютинины системы АВО, тогда как резус-агглютинины появляются после иммунизации.
2. Количество крови в организме, соотношение плазмы и эритроцитов (гематокрит).
Общее количество крови в организме взрослого человека составляет в среднем 6 – 8% от массы тела, что соответствует от 5 до 6 литров крови. Кровь представляет собой непрозрачную красную жидкость, которая постоянно движется по кровеносным сосудам. Она состоит из жидкой части – плазмы и форменных элементов (эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов). У взрослого человека форменные элементы крови составляют 40-48%, а плазма – 52-60%.
Гематокрит - доля (выраженная в про центах) общего объёма крови, которую составляют эритроциты. Гематокрит отражает соотношение эритроцитов и плазмы крови, а не общее количество эритроцитов. Повышение гематокрита: Эритремия; Симптоматические эритроцитозы (врожденные пороки сердца, дыхательная недостаточность, гемоглобинопатии, новообразования почек, сопровождающиеся усиленным образованием эритропоэтина, поликистоз почек); Гемоконцентрация при ожоговой болезни, перитоните, дегидратации организма (при выраженной диарее, неукротимой рвоте, повышенной потливости, диабете). Понижение гематокрита: Анемия; Гипергидратация; Вторая половина беременности.
3. Гемоглобин, его строение и функции, содержание в одном литре крови, соединения гемоглобина. Виды гемоглобина и количество его у детей различного возраста.

Молекула гемоглобина – тетрамер, состоящий из четырех субъединиц – полипептидных цепей глобина, каждая из которых ковалентно связана с одной молекулой гемма. Гем построен из четырех молекул пиррола, образующих порфириновое кольцо, в центре которого находятся атом железа. Основная функция гемоглобина –перенос кислорода. Существует несколько типов гемоглобина, образующихся на разных сроках развития организма, различающихся строением глобиновых цепей и сродством к кислороду. Виды гемоглобина: Примитивный HbP (у эмбриона); Фетальный HbF (у плода); Взрослый HbA, HbA2 (после рождения); Миоглобин Mb. В крови взрослого человека содержатся главным образом HbA (95-98%), незначительное количество HbA2 (1-2%) и иногда HbF (до 1%). Особой формой является миоглобин, содержащийся в мышечной ткани. Соединение гемоглобина: Нормальные: Оксигемоглобин HbО2, Дезоксигемоглобин Hb, Карбогемоглобин HbСО2. Патологические: Карбоксигемоглобин HbСО, Метгемоглобин MetHb.
4. Плазменные факторы свертывания крови, роль печени и витамина К в их образовании. Особенности свертывания крови у детей.
Биологическая система, обеспечивающая, с одной стороны, сохранение жидкого состояния циркулирующей крови, а с другой – предупреждение и купирование кровотечений, обозначается как система гемостаза.
Гемостаз поддерживается тремя взаимодействующими функционально-структурными компонентами:

1. Плазменными ферментными системами: свертывающей, плазминовой (фибринолитической), калликреин-кининовой, комплемента

2. Клетками крови, в первую очередь тромбоцитами

3. Стенками кровеносных сосудов.
Плазменные факторы свертывания крови:
I фибриноген
II протромбин
III тканевой тромбопластин Са2+
IV Ас-глобулин проакцелерин

V-VI проконвертин

VII антигемофильный глобулин А
VIII фактор Виллебранта (FW)

IX фактор Кристмаса антигемофильный глобулин В
X фактор Стюарта – Прауэра
XI плазменный предшественник тромбопластина

XIIфактор Хагемана

XIII фибринстабилизирующий фактор (фибриназа, плазменная трансглутаминаза, фибринолигаза)
фактор Флетчера (прекалликреин – компоненты калликреин – кининовой системы)
фактор Фитцджеральда (высокомолекулярный кининоген – ВМК)
Плазменные факторы II, VII, IX, X – витамин-Кзависимые, образуются преимущественно в печени под влиянием витамина К. Витамин К синтезируется в толстом кишечнике. Важным источником образования и поступления в организм витамина К является миклофлорой кишечника. При дисбактериозе могут наблюдаться замедление свертывания крови, спонтанные кровотечения.
Плазменные факторы I, III, IV, V, VI, VIII, XI, XII, XIII – витамин-К-независимые, для их синтеза витамин К не требуется.
Особенности свертывания крови у детей: У новорожденных время свертывания крови по сравнению с взрослыми замедленно и составляет 2-3мин (начало свертывания) и 3-5мин (конец свертывания). Однако к седьмому дню оно уменьшается и становится равным уровню взрослых: 1-2 и 2-4мин (соответственно начало и конец свертывания).
Несмотря на то что время свертывания у детей и взрослых практически одинаково, в период от одного года до 12-14лет жизни количество тромбоцитов, соотношение прокоагулянтов и антикоагулянтов по своим значениям не достигают еще норм, установленных для взрослых. Особенно мало фибриногена, протромбина, а также факторов VII, IX, X, XII.
Низкая концентрация в крови новорожденных детей прокоагулянтов объясняется функциональной незрелостью печени, отсутствием кишечной флоры, необходимой для синтеза витамина К, и более низким содержанием Са²⁺.

Билет 4
1. Понятие об агглютиногенах и агглютининах крови человека. Особенности антигенной структуры крови у детей.
Агглютинация – процесс склеивания эритроцитов.

Специфические белки в мембране эритроцитов – агглютиногены А и В,а в плазме крови – специфические белки - агглютинины α и β. Для каждой из групп по системе АВ0 имеется определенное сочетание этих белков по два из четырех:

Особенности антигенной структуры крови у детей…
2. Ионный состав плазмы крови. Соотношение плазмы и эритроцитов у детей в разные возрастные периоды.

Плазма – жидкость бледно-янтарного цвета, содержащая белки, углеводы, липиды, липопротеины, электролиты, гормоны и другие химические соединения. Объем плазмы – около 5% массы тела и 7,5 % всей воды организма. Плазма крови состоит из воды (90%) и растворенных в ней веществ (10%) Химический состав плазмы: преобладающий катион Na⁺, преобладающие анионы – Cl^-, HCO^3-, концентрация белка выше 70 г/л.
3. Методика определения концентрации гемоглобина в крови. Цветовой показатель крови, его изменения при анемиях.

Цветовой показатель (ЦП), или фарб-индекс (Fi), - относителная величина, которая дает представление о содержании гемоглобина (Hb) в отдельном эритроците (Э) по сравнению со стандартом.

Стандарт вычисляется следующим образом. Содержание гемоглобина в одном эритроците равно частному от деления количества Hb на количество эритроцитов.
ЦП = Hb г/л*3 / 2 первые цифры числа эритроцитов*10.
В норме цветовой показатель колеблется в пределах 0,75-1,0 и очень редко может достигать 1,1. В этом случае эритроциты называются нормохромными.

Цветовой показатель используется в клинической практике для дифференциального диагноза анемий. Большинство анемий сопровождаются гипохромией (уменьшением количества Hb в эритроците), цветовой показатель при этом будет меньше 0,75.Гипохромия наступает в результате уменьшения либо размеров эритроцитов, либо количества гемоглобина (при анемиях, вызванных кровопотерей, инфекцией и др.) Гиперхромия наблюдается при злокачественных анемиях, тяжелых анемиях у детей, ЦП в этих случаях будет больше 1,1. Гиперхромия зависит исключительно от увеличения размеров эритроцитов.
4. Первая фаза свертывания крови, внешний и внутренний циклы (основные факторы, участвующие в образовании протромбиназы).
Процесс свертывания крови представляет собой преимущественно проферментно-ферментный каскад, в котором проферменты, пере­ходя в активное состояние, приобретают способность активировать другие факторы свертывания крови. Подобная активация может носить последовательный и ретроградный характер.

Процесс свертывания крови может быть разделен на три фазы: первая включает комплекс последовательных реакций, приводящих к образованию протромбиназы, во вторую фазу осуществляется переход протромбина (фактор II) в тромбин (фактор IIа) и в третью фазу из фибриногена образуется фибрин.

Первая фаза — образование протромбиназы может происходить по внешнему и внутреннему механизму. Внешний ме­ханизм предполагает обязательное присутствие тромбопластина (фактор III), внутренний же связан с участием тромбоцитов (фактор Р3) или разрушенных эритроцитов. Вместе с тем внутренний и внешний пути образования протромбиназы имеют много общего, так как активируются одними и теми же факторами (фактор ХIIа, калликреин, ВМК и др.), а также приводят в конечном итоге к появлению одного и того же активного фермента — фактора Ха, выполняющего функции протромбиназы. При этом и полный, и частичный тромбопластин служат матрицами, на которых в при­сутствии ионов Са2+ развертываются ферментативные реакции.

Формирование протромбиназы по внешнему пути начинается с активации фактора VII при его взаимодействии с тромбопластином и фактором ХIIа. Кроме того, фактор VII может переходить в деятельное состояние под влиянием факторов XIa, IXa, Ха, IIа и калликреина. В свою очередь фактор VIIa не только переводит фактор X в Ха (ведет к появлению протромбиназы), но и активирует фактор IX, участвующий в образовании протромбиназы по внут­реннему механизму.

Образование протромбиназы по внешнему пути происходит чрезвычайно быстро (за 20—30 с), ведет к появлению небольших порций тромбина (IIа), который способствует необратимой агре­гации тромбоцитов, активации факторов VIII и V и значительно ускоряет формирование протромбиназы по внутреннему механизму. Инициатором внутреннего механизма образования протромбиназы является фактор XII, который активируется травмированной по­верхностью стенки сосуда, кожей, коллагеном, адреналином, в лабораторных условиях — при контакте со стеклом, после чего переводит фактор XI в XIa. В этой реакции может принимать участие калликреин (активируется фактором ХIIа) и ВМК (ак­тивируется калликреином). Фактор XIa оказывает непосредствен­ное влияние на фактор IX, переводя его в фактор IXa. Специ­фическая деятельность последнего направлена на протеолиз фак­тора X и протекает при обязательном участии фактора VIII (или VIIIa).

Следует заметить, что активация фактора X под влиянием комплекса факторов VIII и IXa получила название теназной реакции.

Билет 5
1. Реакция агглютигации, условия ее развития. Группы крови системы АВО.
Агглютинация – процесс склеивания эритроцитов, причем происходит он лишь при определенных сочетаниях сыворотки и эритроцитов.

Специфические белки в мембране эритроцитов – агглютиногены А и В,а в плазме крови – специфические белки - агглютинины α и β. Для каждой из групп по системе АВ0 имеется определенное сочетание этих белков по два из четырех:

Эритроцитарная антигенная система АВО. Известно, что существуют четыре группы крови. На каком же основании кровь всех людей планеты можно разделить всего на четыре группы крови? Оказывается, по наличию или отсутствию в мембране эритроцитов всего двух антигенов, А и В, выделяют четыре варианта присутствия этих антигенов на мембране эритроцитов: вариант 1 – мембрана эритроцитов не содержит ни антигена А, ни антигена В, такая кровь отнесена к группе I и обозначается О(I). Вариант 2 – эритроциты содержат только антиген А – вторая группа А(II). Вариант 3 - эритроциты содержат только антиген В – третья группа В(III). Вариант 4 – эритроциты содержат оба антигена – А и В – группа крови АВ(IV).
2. Осмотическая концентрация и осмотическое давление плазмы крови. Роль в обмене жидкости между кровью и тканями. Осмотическая резистентность эритроцитов, нормальные значения, метод определения.

Осмотическим давлением называется сила, которая заставляет растворитель (для крови это вода) через полупроницаемую мембрану переходить из раствора с меньшей концентрацией в более концентрированный раствор. Осмотическое давление определяет транспорт воды из внеклеточной среды организма в клетки и наоборот. Оно обусловлено растворимыми в жидкой части крови осмотически активными веществами, к которым относятся ионы, белки, глюкоза, мочевина и др.

Осмотическое давление определяется криоскопическим методом – с помощью определения точки замерзания крови. Выражается оно в атмосферах (атм.) и миллиметрах ртутного столба (мм РТ.ст.). Рассчитано, что осмотическое давление равно 7,6 атм. Или 7,6*760=мм РТ.ст.

Для характеристики плазмы как внутренней среды организма особое значение имеет суммарная концентрация всех ионов и молекул, содержащихся в ней, или ее осмотическая концентрация. Физиологическое значение постоянства осмотической концентрации внутренней среды заключается в поддержании целостности мембраны клеток и обеспечении транспорта воды и растворенных веществ. Осмотическая концентрация в современной биологии измеряется в осмолях (осм) или милиосмолях (мосм) – тысячных долях осмоля.
Осмоль – концентрация одного моля неэлектролита, растворенного в литре воды.
Осмотическая концентрация неэлектролита меньше осмотической концентрации электролита, так как молекулы электролита диссоциируют на ионы, вследствие чего возрастает концентрация кинетически активных частиц, которыми и определяется величина осмотической концентрации.

Осмотическое давление, которое может развить раствор, содержащий 1 осмоль, равно 22,4 атм. Поэтому осмотическое давление может быть выражено в атмосферах или мм РТ.ст.

Осмотическая концентрация плазмы равна 285-310 мосм/л (в среднем 300 мосм/л или 0,3 осм/л). Это один из самых жестких параметров внутренней среды, его постоянство поддерживается системой осморегуляции с участием гормонов и изменением поведения – возникновения чувства жажды и поиск воды.

Увеличение осмотической концентрации внутренней среды приводит к переходу воды из клеток в межклеточную жидкость и кровь, клетки сморщиваются, и их функции нарушаются. При уменьшении осмотической концентрации вода переходит в клетки, клетки набухают, их мембрана разрушается, происходит плазмолиз. Разрушение вследствие набухания клеток крови называется гемолизом.
3. Количество (в % отношении) лимфоцитов. Их виды, функциональная роль. Динамика изменения количества лимфоцитов у детей различного возраста.

Лимфоциты – это один из видов лейкоцитов, белых клеток крови, обеспечивающих иммунитет человека. Лимфоциты образуются в костном мозге, откуда поступают в кровь. Из крови одна часть лимфоцитов (70-80%) направляется в вилочковую железу (тимус), где превращается в так называемые Т-лимфоциты. Т-лимфоциты участвуют в распознании микробов и в регуляции иммунного ответа организма.
Другая часть лимфоцитов (10-15%) превращается в В-лимфоциты, окончательное формирование которых у человека происходит в лимфоидной ткани тонкой кишки, миндалин, селезенке и лимфатических узлах. При контакте с инфекцией В-лимфоциты выделяют антитела – специальные белки уничтожающие микробы.
Есть третий вид– НК-лимфоциты, или натуральные киллеры, они составляют 5-10% от всех лимфоцитов. НК-лимфоциты обеспечивают защиту от опухолевых клеток, а также от вирусных инфекций.
Норма содержания лимфоцитов в крови:
В организме взрослого человека 19-37% всех лейкоцитов крови составляют лимфоциты (1,2-3,0 х 109/л).
Количество лимфоцитов в крови у ребенка зависит от возраста:

В 1-й день от 12 до 36%

В 1 месяц от 40 до 76%

В 6 месяцев от 42 до 74%

В 1 год от 38 до 72%

До 6 лет от 26 до 60%

До 12 лет от 24 до 54%

У детей 13-15 лет количество лимфоцитов составляет от 22 до 50%.
4. Вторая и третья стадии свертывания крови, основные факторы, участвующие в этих стадиях. Особенности свертывающей системы крови у детей.
Вторая фаза процесса свертывания крови — переход фак­тора II в фактор IIа осуществляется под влиянием протром­биназы (фактор Ха) в присутствии фактора V (Va) и сводится к протеолитическому расщеплению протромбина, благодаря чему по­является фермент тромбин, обладающий свертывающей активно­стью.
Третья стадия процесса свертывания крови — переход фибриногена в фибрин — носит этапный характер. Под влиянием фактора IIа от фибриногена отщепляются фибринопептиды и образуется фибрин-мономер (фактор Im). Из него бла­годаря процессу полимеризации формируются олигомеры и димеры фибрина (фактор Iо и Id), из которых за счет продольного и поперечного связывания образуются протофибриллы — легкораст­воримый фибрин, или фибрин S, быстро лизирующийся под влиянием протеаз (плазмина, трипсина). В дальнейшем в процесс образования фибрина вмешивается фактор XIII (фибриназа, фибринстабилизирующий фактор), который после активации тромбином в присутст­вии ионов Са2+ «прошивает» фибринполимеры дополнительными перекрестными связями, в результате чего появляется труднораст­воримый фибрин, или фибрин i (insoluble). В результате этой ре­акции сгусток становится резистентным к фибринолитическим (протеолитическим) агентам и плохо поддается разрушению

Особенности свертывающей системы крови у детей: После рождения в связи с установлением внешнего дыхания гипоксия сменяется гипероксией. Это вызывает снижение выработки эритропоэтинов, в значительной степени подавляется эритропоэз и начинается падение количества эритроцитов и гемоглобина. По литературным данным, эритроциты, продуцированные внутриутробно, обладают укороченной длительностью жизни по сравнению со взрослыми и детьми более старшего возраста и более склонны к гемолизу. Длительность жизни эритроцитов у новорожденных в первые дни жизни составляет 12 дней, что в 5—6 раз меньше средненормальной длительности жизни эритроцитов детей старше года и взрослых. Имеются и отличия в количестве лейкоцитов. В периферической крови в первые дни жизни после рождения число лейкоцитов до 5-го дня жизни превышает 18-20·109/л, причем нейтрофилы составляют 60-70 % всех клеток белой крови. Лейкоцитарная формула сдвинута влево за счет большого содержания палочкоядерных и в меньшей степени метамиелоцитов (юных). Могут обнаруживаться и единичные миелоциты. Значительные изменения претерпевает лейкоцитарная формула, что выражается в падении числа нейтрофилов и увеличении количества лимфоцитов. На 5-й день жизни их число сравнивается (так называемый первый перекрест), составляя около 40-44% в формуле белой крови. Затем происходит дальнейшее возрастание числа лимфоцитов (к 10-му дню до 55—60 %) на фоне снижения количества нейтрофилов (приблизительно 30 %). Постепенно исчезает сдвиг формулы крови влево. При этом из крови полностью исчезают миелоциты, снижается число метамиелоцитов до 1 % и палочкоядерных — до 3°/о. Последующие недели, месяцы и годы жизни у детей сохраняется ряд особенностей кроветворения, а баланс образования, созревания кровяных клеток и их потребление и разрушение определяют состав периферической крови детей различного возраста. В процессе роста ребенка наибольшие изменения претерпевает лейкоцитарная формула, причем среди форменных элементов особенно значительны изменения числа нейтрофилов и лимфоцитов. После года вновь увеличивается число нейтрофилов, а количество лимфоцитов постепенно снижается. В возрасте 4—5 лет вновь происходит перекрест в лейкоцитарной формуле, когда число нейтрофилов и лимфоцитов вновь сравнивается. В дальнейшем наблюдается нарастание числа нейтрофилов при снижении числа лимфоцитов. С 12 лет лейкоцитарная формула уже мало чем отличается от таковой взрослого человека. Наряду с относительным содержанием клеток, входящих в понятие «лейкоцитарная формула», интерес представляет абсолютное их содержание в крови. Абсолютное число нейтрофилов наибольшее у новорожденных, на первом году жизни их число становится наименьшим, а затем вновь возрастает, превышая 4·109/л в периферической крови. Абсолютное же число лимфоцитов на протяжении первых 5 лет жизни высокое (5·109/л и более), после 5 лет их число постепенно снижается и к 12 годам не превышает 3·109/л. Аналогично лимфоцитам происходят изменения моноцитов. Вероятно, такой параллелизм изменений лимфоцитов и моноцитов объясняется общностью их функциональных свойств, играющих роль в иммунитете. Абсолютное число эозинофилов и базофилов практически не претерпевает существенных изменений в процессе развития ребенка.

Билет 6
1. Методика определения групповой принадлежности крови по системе АВО.
Группы крови системы АВО можно определить с помощью цоликлонов. Цоликлон – реагент, действующим началом которого является моноклональные человеческие антитела. Для определения групп крови системы АВО используются циклоны анти-А, анти-В и циклон анти-АВ, содержащие смесь анти А и анти В антител. Анти-А и анти-В антитела цоликлона при смешивании с нативной кровью вызывают прямую агглютинацию эритроцитов, содержащих соотвествующие А и В антигены. Заключение о присутствующие антигена в исследуемых эритроцитах делают по наличаю положительной реакции агглютинации.
2. Белки плазмы крови, их виды, функциональная роль. Онкотическое давление плазмы крови, его величина, значение. Особенности белкового состава плазмы крови у детей.

Белковую фракцию плазмы составляет несколько десятков различных белков. Большая величина этих молекул дает основание относить их к коллоидам. Присутствие коллоидов в плазме обусловливает ее вязкость.

Белки плазмы различают по строению и функциональным свойствам. Белки плазмы делят на две основные группы: альбумины и глобулины.

Альбумины. Альбумины составляют около 60 % белков плазмы. Их высокая концентрация, примерно 80 %, большая подвижность при относительно небольших размерах молекулы, определяют онкотическое давление плазмы. Большая общая поверхность мелких молекул альбумина играет существенную роль в транспорте кровью различных веществ, таких, как билирубин, соли тяжелых металлов, жирные кислоты, фармакологические препараты (сульфаниламиды, антибиотики и др.). Известно, что, например, одна молекула альбумина может одновременно связать 25−50 молекул билирубина.

Глобулины. Эту группу белков электрофоретически, по показателям подвижности, разделяют на несколько функций: альфа_1-, альфа_2-, бета_2- и гамма-глобулины. С помощью иммуноэлектрофореза эти фракции подразделяют на мелкие субфракции более однородных белков. Так, во фракции альфа_-1 глобулинов имеются белки, простетической группой которых являются углеводы. Эти белки называются гликопротеинами. В составе гликопротеинов циркулирует около 60 % всей глюкозы плазмы. Еще одна группа - мукопротеины — содержит мукополисахариды, фракцию альфа₂ составляет медьсодержащий белок церулоплазмин, в котором на каждую белковую молекулу приходится восемь атомов меди. Таким образом связывается около 90 % всей содержащейся в плазме меди. В плазме имеются еще тироксинсвязывающий и другие белки.

Бета-глобулины участвуют в транспорте фосфолипидов, холестерина, стероидных гормонов, металлических катионов. Они удерживают в растворе около 75 % всех жиров и липидов плазмы. Металлсодержащий белок трансферрин осуществляет перенос железа кровью. Каждая молекула трансферрина несет два атома железа.

Гамма-глобулины характеризуются самой низкой электрической подвижностью. В эту фракцию белков входят различные антитела, защищающие организм от вторжения вирусов и бактерий. Количество этой фракции возрастает при иммунизации животных. К гамма-глобулинам относятся также агглютинины крови.

Фибриноген занимает промежуточное положение между фракциями бета- и гамма-глобулинов. Этот белок обладает свойством становиться нерастворимым в определенных условиях, принимать при этом волокнистую структуру, переходя в фибрин. Содержание фибриногена в плазме крови составляет всего 0,3 %, но именно его переходом в фибрин обусловливается свертывание крови и превращение ее в течение нескольких минут в плотный сгусток. Сыворотка крови по своему составу отличается от плазмы только отсутствием фибриногена.

Онкотическое давление плазмы крови зависит в основном от концентрации белков, их размеров и гидрофильности (способности удерживать воду). Осмотическое давление водных растворов обусловлено солями. Онкотическое давление имеет большое значение в распределении воды и растворенных в ней веществ между кровью и тканями. Онкотическое давление крови составляет в среднем 7,5-8,0 атмосфер.
3. Количество (в % отношении) базофилов и эозинофилов, их функциональная роль.
Базофилы. В крови базофилов очень мало (40—60 в 1 мкл) однако в различных тканях, в том числе сосудистой стенке, содер­жатся тучные клетки, иначе называемые «тканевые базофилы». Функция базофилов обусловлена наличием в них ряда биологически активных веществ. К ним в первую очередь принадлежит гистамин, расширяющий кровеносные сосуды. В базофилах содержатся противосвертывающее вещество гепарин, а также гиалуроновая кислота, влияющая на проницаемость сосудистой стенки. Кроме того, базо­филы содержат фактор активации тромбоцитов — ФАТ (соединение, обладающее чрезвычайно широким спектром действия), тромбоксаны (соединения, способствующие агрегации тромбоцитов), лейкотриены и простагландины — производные арахидоновой кислоты и др. Особо важную роль играют эти клетки при аллергических реакциях (брон­хиальная астма, крапивница, глистные инвазии, лекарственная бо­лезнь и др.), когда под влиянием комплекса антиген — антитело происходит дегрануляция базофилов и биологически активные со­единения поступают в кровь, обусловливая клиническую картину перечисленных заболеваний.

Количество базофилов резко возрастает при лейкозах, стрессовых ситуациях и слегка увеличивается при воспалении.

Эозинофилы. Длительность пребывания эозинофилов в кровотоке не превышает нескольких часов, после чего они проникают в ткани, где и разрушаются. Эозинофилы обладают фагоцитарной активно- стью. Особенно интенсивно они фагоцитируют кокки. В тканях эозинофилы скапливаются преимущественно в тех органах, где со­держится гистамин — в слизистой оболочке и полслизистой основе желудка и тонкой кишки, в легких. Эозинофилы захватывают ги­стамин и разрушают его с помощью фермента гистаминазы. В со­ставе эозинофилов находится фактор, тормозящий выделение гистамина тучными клетками и базофилами. Эозинофилы играют важ­ную роль в разрушении токсинов белкового происхождения, чужеродных белков и иммунных комплексов.

Чрезвычайно велика роль эозинофилов, осуществляющих цитотоксический эффект, в борьбе с гельминтами, их яйцами и личин­ками. В частности, при контакте активированного эозинофила с личинками происходит его дегрануляция с последующим выделением большого количества белка и ферментов, например пероксидаз, на поверхность личинки, что приводит к разрушению последней. Уве­личение числа эозинофилов, наблюдаемое при миграции личинок, является одним из важнейших механизмов в ликвидации гельминтозов.

Содержание эозинофилов резко возрастает при аллергических заболеваниях, когда происходит дегрануляция базофилов и выделе­ние анафилактического хемотаксического фактора, который привле­кает эозинофилы. При этом эозинофилы выполняют роль «чистиль­щиков», фагоцитируя и инактивируя продукты, выделяемые базо­филами.

В эозинофилах содержатся катионные белки, которые активируют компоненты калликреин-кининовой системы и влияют на сверты­вание крови. Предполагают, что катионные белки, повреждая эн­дотелий, играют важную роль при развитии некоторых видов па­тологии сердца и сосудов.

При тяжело протекающих инфекционных заболеваниях число эозинофилов резко снижается, а иногда при подсчете лейкоци­тарной формулы они вообще не выявляются (развивается анэозинопения).
4. Противосвертывающая система крови, виды антикоагулянтов, механизм их действия. Особенности противосвертывающей системы крови у детей.

Противосвертывающая система крови: Не только при заболеваниях, но и в здоровом организме существует угроза внутрисосудистого тромбообразования. Однако кровь остается жидкой, так как существует сложный физиологический механизм, обуславливающий резистивность организма против внутрисосудистого свертывания и тромбообразования. Это противосвертывающая система, основу действия которой составляют химические ферментативные реакции между факторами свертывающей и пртивосвертывающей систем. Вещества, препятствующие свертыванию крови, называются антикоагулянтами. Естественные антикоагулянты вырабатываются и содержатся в организме. Они бывают прямого и непрямого действия. К антикоагулянтам прямого действия относится, например, гепарин (образуется в печени). Гепарин препятствует действию тромбина на фибриноген и угнетает активность — инактивирует целый ряд других факторов свертывающей системы. Антикоагулянты непрямого действия угнетают образование активных факторов свертывания. Работа свертывающей и противосвертывающей систем, их взаимодействие в организме находятся под контролем центральной нервной системы.

Билет 7
1. Правила переливания крови. Объясните необходимость проведения пробы на индивидуальную совместимость.

Правила переливания крови:

1. Определить группу крови по системе АВО и резус у реципиента и донора вне зависимости от того, определялись ли она раньше или нет.

2. Определение группы крови проводится только врачом, переливающим кровь. На это отводится 30мин.

3.Для определения группы крови используют сыворотку двух серий (или цоликлон), содержащую моноклональные антитела эритроцитов.
4.Обязательно проводится прямая проба на индивидуальную совместимость для исключения сенсибилизации к антигенам других групп. Она выполняется in vitro, берутся плазма реципиента и кровь донора, смешиваются, и определяется наличие или отсутствие агглютинации.

5.Обязательно проводится проба на биологическую совместимость: реципиенту переливают 10-15мл крови в течении трех минут, затем еще два раза вливают по 10-15мл крови с интервалом в 3мин. Если реакция отсутствует, переливают оставшуюся кровь.
2. Кислотно-щелочное равновесие (рН крови), основные механизмы его регуляции. Особенности рН плазмы крови у детей.

Кислотно-щелочное равновесие, кислотно-щелочной баланс, кислотно-щелочное состояние, совокупность физико-химических и физиологических процессов, обусловливающих относительное постоянство водородного показателя (pH) внутренней среды организма. В норме pH крови человека поддерживается в пределах 7,35—7,47, несмотря на поступление в кровь кислых и основных продуктов обмена веществ. Постоянство pH внутренней среды организма — необходимое условие нормального течения жизненных процессов. Значения pH крови, выходящие за указанные пределы, свидетельствуют о существенных нарушениях в организме, а значения ниже 6,8 и выше 7,8 несовместимы с жизнью. В регуляции постоянства pH крови принимают участие буферные системы крови и многие физиологические системы организма. Механизм сохранения кислотно – щелочного равновесия буферными системами можно пояснить на примере действия бикарбонатного буфера. Если в кровь поступает сильная кислота, например соляная, то она реагирует с бикарбонатом; при этом образуется слабая угольная кислота, почти не меняющая pH среды (NaHCO₃ + HCl = NaCI + H₂CO₃). При поступлении в кровь сильного основания оно, реагируя с угольной кислотой, образует бикарбонат, не изменяющий заметно рН крови. По мере накопления угольной кислоты или бикарбонатов емкость бикарбонатного буфера должна была бы быстро истощиться, но этого не происходит вследствие действия физиологических систем (например, дыхательной системы, выделительной и др.), восстанавливающих ёмкость бикарбонатного буфера. Так, при накоплении угольной кислоты последняя удаляется через лёгкие, избыток же бикарбоната выводится через почки. Сдвиг pH крови в кислую сторону называется ацидозом, в щелочную — алкалозом. pH большинства тканевых жидкостей организма поддерживается на уровне 7,1—7,4.
3. Нейтрофильные лейкоциты, их количество (в % соотношении), функциональная роль. Динамика содержания нейтрофильных лейкоцитов у детей различного возраста.
Нейтрофилы. Количество нейтрофилов в норме в крови у взрослых относительно постоянно и колеблется в пределах от 45% до 70% от общего количества лейкоцитов в крови, или 1,8–6,5·10⁹/л. У детей, по мере их роста, процентное содержание нейтрофилов в крови в норме имеет тенденцию к увеличению, хотя абсолютное количество нейтрофилов в крови при этом практически не изменяется.

Роль нейтрофилов: Нейтрофилы играют очень важную роль в защите организма от бактериальных и грибковых инфекций, и сравнительно меньшую — в защите от вирусных инфекций. В противоопухолевой или антигельминтной защите нейтрофилы практически не играют роли.
Нейтрофилы способны к фагоцитозу, причём являются микрофагами (способны поглощать лишь относительно небольшие чужеродные частицы или клетки). После фагоцитирования чужеродных частиц нейтрофилы обычно погибают, высвобождая большое количество биологически активных веществ, повреждающих бактерии и грибы, усиливающих воспаление и хемотаксис иммунных клеток в очаг. Продолжительность жизни нейтрофилов в тканях зависит от наличия воспалительного процесса, и составляет от нескольких часов до нескольких суток. Погибшие нейтрофилы вместе с клеточным детритом из разрушенных воспалением тканей и гноеродными микроорганизмами, послужившими причиной воспаления, формируют массу, известную как гной.
Нейтрофилы содержат большое количество миелопероксидазы, фермента, который способен окислять анион хлора до гипохлорита — сильного антибактериального агента. Миелопероксидаза как гем-содержащий белок имеет зеленоватый цвет, что определяет зеленоватый оттенок самих нейтрофилов, цвет гноя и некоторых других выделений, богатых нейтрофилами.
Нейтрофильный ответ (инфильтрация очага воспаления нейтрофилами, повышение числа нейтрофилов в крови, сдвиг лейкоцитарной формулы влево с увеличением процента «юных» форм, указывающий на усиление продукции нейтрофилов костным мозгом) — самый первый ответ на бактериальные и многие другие инфекции. Нейтрофильный ответ при острых воспалениях и инфекциях всегда предшествует более специфическому лимфоцитарному. При хронических воспалениях и инфекциях роль нейтрофилов незначительна и преобладает лимфоцитарный ответ (инфильтрация очага воспаления лимфоцитами, абсолютный или относительный лимфоцитоз в крови).
4. Фибринолиз, его механизмы, фазы, значение.
Система фибринолиза - антипод системы свертывания крови. Она обеспечивает растворение фибриновых нитей, в результате чего в сосудах восстанавливается нормальный кровоток.

Она имеет строение, аналогичное системе свертывания крови: компоненты системы фибринолиза., находящиеся в периферической крови; органы, продуцирующие и утилизирующие компоненты системы фибринолиза; органы, разрушающие компоненты системы фибринолиза; механизмы регуляции.