Практическая часть
2.1 Решение задач.
2.2 Лабораторная работа.
2.3 Проведение контроля конечного уровня знаний.
Задачи
1 Выберите признаки, характерные для соединительной ткани:
а) преобладание глобулярных белков;
б) преобладание фибриллярных белков;
в) наличие большого количества липопротеидов;
г) преобладание межклеточного вещества над клеточными элементами;
д) наличие большого количества протеогликанов;
е) преобладание клеточных элементов над межклеточным веществом?
2 Выберите аминокислоты, преобладающие в коллагене:
а) пролин; б) метионин; в) оксипролин; г) аспартат; д) глицин; е) лизин; ж) глутамин; з) оксилизин; и) десмозин; к) валин?
3 Какие из перечисленных ниже особенностей правильно характеризуют коллаген:
а) полноценный пищевой белок;
б) частично гидролизуется протеазами желудочно-кишечного тракта;
в) составляет до 50 % общего количества белка в организме;
г) является основным структурным белком организма;
д) при старении уменьшается его количество;
е) в коже и костях, стенках сосудов, базальных мембранах содержатся различные типы коллагеновых молекул;
ж) в составе коллагена отсутствует лиз, оксилиз, гли;
з) в составе коллагена преобладают ала, сер, три, цис;
и) при старении увеличивается его количество?
4 Укажите правильный порядок этапов биосинтеза и процессинга коллагена (например, а ® б ® … и т. д.):
а) фибриллогенез (формирование фибрилл);
б) гидроксилирование про и лиз;
в) образование альдегидов и поперечных связей;
г) образование проколлагена (образование спирали, прекращение гидроксилирования);
д) гликозилирование;
е) образование коллагеновых волокон;
ж) отщепление N- и C-концевых фрагментов;
з) трансляция?
5 Чем обусловлена высокая прочность коллагеновых волокон:
а) множеством ковалентных связей внутри молекулы тропоколлагена;
б) формированием третичной структуры коллагена;
в) взаимодействием протеогликанов с коллагеновыми фибриллами;
г) гидрофобными связями между молекулами тропоколлагена;
д) особым расположением пептидных цепей в тропоколлагене;
е) наличием гидратной оболочки;
д) гликозилированием коллагена?
6 Напишите реакции гидроксилирования цепи препроколлагена. Укажите фермент и кофакторы.
7 Как и почему изменится с возрастом суточная экскреция с мочой о-про?
8 Какие последствия может иметь недостаток витамина С в организме:
а) снижение активности пролилгидроксилазы фибробластов;
б) уменьшение прочности структуры коллагена;
в) повышение количества оксипролина в коллагене;
г) снижение количества оксипролина в коллагене;
д) уменьшение скорости гликозилирования коллагена;
е) увеличение количества водородных связей между полипептидными цепями коллагена;
ж) уменьшение количества водородных связей между полипептидными цепями коллагена;
з) увеличение количества ковалентных связей внутри молекулы тропоколлагена;
и) уменьшение количества ковалентных связей внутри молекулы тропоколлагена?
9 При синдроме Элера-Данлоса (тип VII) отмечается деформация суставов и искривление позвоночника, что обусловлено недостаточностью N‑концевой проколлагенпептидазы, в связи с чем:
а) изобразите схему строения проколлагена;
б) на схеме укажите место действия проколлагенпептидаз;
в) какой из этапов процессинга коллагена нарушен при этом заболевании?
10 Возникающая при гипервитаминозе D3 деструкция костной ткани обусловлена и сопровождается:
а) усиленным образованием в печени 25-ОН D3;
б) усиленным образованием в почках 1,25-ОН D3;
в) усиленным образованием в почках 25-ОН D3;
г) усиленным образованием в печени 1,25-ОН D3;
д) гиперкальциемией;
е) гипокальциемией;
ж) гиперкальциурией и образованием почечных камней;
з) гипокальциурией и образованием почечных камней;
ж) гиперфосфатемией;
з) гипофосфатемией;
и) гиперфосфатурией и образованием почечных камней;
к) гипофосфатурией и образованием почечных камней?
11 Возникающая при гипервитаминозе D3 деструкция костной ткани обусловлена и сопровождается:
а) усилением катаболизма коллагена; б) усилением биосинтеза коллагена; в) усилением катаболизма эластина; г) гиперэкскрецией с мочой оксипролинсодержащих пептидов; д) усилением биосинтеза эластина; е) усилением катаболизма альбумина; ж) усилением биосинтеза альбумина; з) гиперэкскрецией оксипролина с мочой?
12 При гиперпаратиреозе отмечается:
а) увеличение экскреции с мочой оксипролина; б) гиперкальциемия; в) увеличение экскреция с мочой кальция; г) нарушение функции почек; д) гипертензия; е) одышка; ж) язвенная болезнь; з) гипертонус мышц; и) гиперсекреция гастрина; к) мышечная слабость?
13 При старении возрастает ригидность связок, сухожилий, уменьшается тургор тканей. Укажите возможные причины этого явления:
а) увеличение числа поперечных связей между молекулами тропоколлагена; б) уменьшение числа поперечных связей между молекулами тропоколлагена; в) уменьшение соотношения основное вещество/волокна; г) снижение способности межклеточного вещества связывать воду; д) увеличение количества протеогликанов в межклеточном матриксе; ж) увеличение соотношения основное вещество/волокна; з) увеличение количества эластина; и) уменьшение количества эластина?
14 Кортикостероиды угнетают склерозирование тканей за счет:
а) ингибирования деления фибробластов; б) активации деления фибробластов; в) торможения образования мРНК проколлагена; г) активации синтеза гликозамингликанов; д) нарушения утилизации глюкозы фибробластами; е) ингибирования синтеза ДНК; ж) активации липолиза; з) активации глюконеогенеза?
15 Системная склеродермия – заболевание, при котором увеличивается синтез коллагена, развивается фиброз кожи и внутренних органов.
А. По какому компоненту мочи можно судить об интенсивности обмена коллагена и как он изменяется при этом заболевании?
Б. Как изменится этот показатель при лечении такого больного кортикостероидами?
16 Подберите соответствующие пары для объяснения причин изменения структуры коллагена:
а) изменение первичной структуры коллагена; б) нарушение четвертичной структуры коллагена; в) снижение активности пролилгидроксилазы; г) снижение активности лизиламинооксидзы; д) гиповитаминоз С; е) мутации ДНК фибробластов; ж) дефицит Cu2+; з) гиповитаминоз А?
17 Выберите положения, правильно характеризующие эластин:
а) является фибриллярным белком; б) способен к обратимому растяжению; в) является глобулярным белком; г) располагается в стенках крупных сосудов, обеспечивая их упругие свойства; д) преобладает в структуре крупных сухожилий; е) основной белок белой соединительной ткани; ж) расщепляется протеазами желудочно-кишечного тракта; з) основной белок желтой соединительной ткани; и) участвует в образовании рубцовой ткани; к) богат оксипролином и оксилизином?
18 В составе эластина преобладают следующие аминокислоты:
а) ала; б) гли; в) вал; г) глу; д) о-про; е) норлейцин; ж) и-лей; з) про; и) цис; к) лей?
19 Покажите преимущественное распределение коллагена и эластина в следующих структурах:
а) коллаген; б) эластин; в) сухожилия; г) желтая затылочная связка; д) стенка аорты; е) кости?
20 Какие компоненты необходимы для проявления активности пролингидроксилазы:
а) кислород; б) витамин B6; в) Fe2+; г) витамин С; д) NADP+; е) a-кетоглутарат; ж) цитохром Р-450; з) Cu2+?
21 Какие из компонентов необходимы для проявления активности лизилоксидазы:
а) кислород; б) витамин B6; в) Fe2+; г) витамин С; д) NADP+; е) a-кетоглутарат; ж) цитохром Р-450; з) Cu2+?
22 Из предложенных утверждений выберите те, которые правильно характеризуют последствия недостаточности лизилоксидазы:
а) нарушается синтез десмозина; б) увеличивается количество растворимого коллагена; в) уменьшается прочность эластина; г) уменьшается прочность аорты; д) в эластине увеличивается количество лизина и снижается количество десмозина; е) увеличивается количество растворимого эластина; ж) возрастает экскреция с мочой оксипролинсодержащих пептидов?
23 Выберите положения, правильно характеризующие фибронектин:
а) является липопротеидом; б) является гликопротеидом; в) имеет доменную структуру; г) является простым белком; д) имеет несколько центров связывания; е) является металлопротеидом; ж) связывается с проколлагеновыми фибриллами и гликозаминогликанами; з) находится в митохондриальном матриксе и на рибосомах; и) регулирует сродство гемоглобина к кислороду?
24 Фибронектин является фактором, связывающим коллагеновые волокна, протеогликаны, клетки. Какими свойствами это объясняется:
а) располагается внутри клеток; б) располагается в межклеточном пространстве; в) является простым белком; г) является поливалентным белком; д) имеет центры связывания фибробластов, коллагена и протеогликанов; е) располагается на поверхности клеток; ж) находится в крови; з) депонирует часть железа?
25 Какие свойства злокачественных клеток изменятся из-за снижения на их поверхности количества фибронектина?
26 Выберите положения, правильно характеризующие структуру и биологическую роль протеогликанов:
а) основным компонентом являются гликозаминогликаны; б) белок составляет 5–10 % от массы протеогликанов; в) белок составляет 20–30 % от массы протеогликанов; г) составляют основную массу межклеточного матрикса соединительной ткани; д) регулируют сродство гемоглобина к кислороду; е) связаны со структурными белками соединительной ткани; ж) образуют гелеобразные структуры?
27 Изобразите схему строения протеогликановых агрегатов. Укажите составные компоненты.
28 Укажите, какие компоненты образуются при гидролизе:
а) хондроитин-4-сульфата; б) гиалуроновой кислоты; в) гепарина; г) глюкуроновая кислота; д) глюкуронат-2-сульфат; е) N-ацетилглюкозамин; ж) N-ацетилгалактозамин-4-сульфат; з) N-ацетилглюкозамин-6-сульфат?
29 Как повлияет длительное введение кортизона экспериментальным животным на выведение оксипролина с мочой?
30 Изменится ли скорость потребления кислорода (тканевого дыхания) кости в фазу ее активной регенерации? Аргументируйте свой ответ.
Лабораторная работа Модифицированный метод количественного определения сиаловых кислот в сыворотке крови
Принцип метода. Метод основан на том, что при добавлении ТХУ к сыворотке крови происходит мягкий гидролиз гликопротеидов, приводящий к отщеплению сиаловых кислот, которые вступают в реакцию с уксусно-сернокислым реактивом с образованием окрашенного соединения буровато-розового цвета. Интенсивность окраски раствора прямо пропорциональна концентрации сиаловых кислот.
Ход работы.
1-й этап – гидролиз гликопротеидов. В сухую центрифужную пробирку отмеривают 1 мл сыворотки крови и прибавляют 1 мл 10 %-го раствора ТХУ. Смесь перемешивают, пробирку закрывают фольгой и помещают в кипящую баню точно на 5 мин для выделения сиаловых кислот в свободном виде. Вынув из бани, пробирку охлаждают в холодной воде со льдом. Смесь центрифугируют или очень аккуратно фильтруют, сливая раствор по стеклянной палочке на маленький бумажный фильтр. Если проводили центрифугирование, то надосадочную жидкость сливают в сухую пробирку.
2-й этап – проведение цветной реакции. В одну пробирку (опытную) отмеривают 0,4 мл супернатанта или фильтрата, в другую (контрольную) – 0,4 мл дистиллированной воды. В обе пробирки добавляют по 5 мл уксусно-сернокислого реактива, закрывают фольгой и помещают на 30 мин в кипящую баню. После этого пробирки охлаждают и колориметрируют на фотоэлектроколориметре с зеленым светофильтром (длина волны – 540 нм) в кюветах толщиной слоя 10 мм против контрольной пробы. Зная оптическую плотность испытуемого раствора, по калибровочной кривой определяют концентрацию сиаловых кислот.
Калибровочную кривую строят с пробами, содержащими 0,05; 0,1; 0,2 и 0,3 мл стандартного раствора сиаловой кислоты (0,5 мг в 1 мл).
Общий объем пробы при построении калибровочного графика доводят дистиллированной водой до 0,4 мл. Затем добавляют во все пробирки по 5 мл уксусно-сернокислого реактива, перемешивают и проделывают все операции, описанные выше. При построении графика на оси ординат откладывают значения оптической плотности, а на оси абцисс – содержание сиаловых кислот в пробах.
Клинико-диагностическое значение. Сиаловые кислоты, или N-ацетилпроизводные нейраминовой кислоты, играют важную роль в организме, прежде всего, как структурные блоки гликопротеидов, являясь концевыми остатками их полисахаридных цепей. Гликопротеины выполняют в организме также опорную, защитную, рецепторную и иммунную функции.
При патологических состояниях организма содержание гликопротеинов существенно изменяется. Особенно заметны эти изменения при воспалительных процессах, сопровождающихся разрушением соединительной ткани, – ревматизме, коллагенозах, некоторых формах новообразований и др. В этих случаях уровень сиаловых кислот в тканях и сыворотке крови резко возрастает и может служить диагностическим тестом для оценки активности патологического процесса.
В норме содержание сиаловых кислот в сыворотке крови составляет в среднем 0,62–0,73 г/л (62–73 мг/дл).
Оформление работы. Дают клиническо-диагностическую оценку полученных результатов, отмечают клиническое значение определения сиаловых кислот.
Выводы. Записать полученный результат и дать его клинико-диагностическую оценку.
Рекомендуемая литература
Основная
1 Материал лекций.
2 Березов Т. Т., Коровкин Б. Ф. Биологическая химия. М.: Медицина, 1990. С. 488–503; 1998. С. 661–678.
3 Николаев А. Я. Биологическая химия. М.: Высшая школа, 1989. С. 399–411.
4 Уайт А. и др. Основы биохимии. М.: Мир, 1981. Т. 3. С. 1467–1513.
Дополнительная
5 Ашмарин И. П. и др. Элементы патологической физиологии и биохимии. М.: МГУ, 1992.
6 Албертс Б. и др. Молекулярная биология клетки. М.: Мир, 1994. Т. 3. С. 287–381.
Дата добавления: 2015-07-17 | Просмотры: 603 | Нарушение авторских прав
|