ДИАГНОСТИЧЕСКАЯ СТРАТЕГИЯ И ТАКТИКА В ЭПИЗООТОЛОГИИ. ДИАГНОСТИКА ИНФЕКЦИОННЫХ БОЛЕЗНЕЙ. ИДЕНТИФИКАЦИЯ ВОЗБУДИТЕЛЕЙ И ИХ ИНДИКАЦИЯ В ОБЪЕКТАХ ВЕТНАДЗОРА
Значение и место диагностики в системе ППМ. Диагностика - «глаза и уши» эпизоотологии. Исторические аспекты отечественной ветеринарной диагностики.
Основные направления в диагностике инфекций:
· клинико-эпизоотологический анализ;
· макро- и микроскопическое исследование инфицированных тканей с целью выявления специфических поражений;
· микробиологические приемы выделения и идентификации возбудителей;
· серологические тесты для определения специфических антител или выявление динамики их нарастания.
Диагностические ситуации в эпизоотологии:
Определение:
| Общая стратегия:
| · благополучные
| · эпизоотологический мониторинг;
| · угрожаемые, предъэпизоотические
| · клиническое наблюдение,
· контроль факторов и групп риска,
· серологическая разведка,
· животные-сентинел
в системе эпизоотологического мониторинга и надзора;
| · неблагополучные, эпизоотические
| · клиническая и эпизоотологическая диагностика,
· патоморфологические исследования,
· изоляция и идентификация возбудителя
в системе эпизоотологического надзора и контроля;
| · постэпизоотические
| · характеристика постинфекционных изменений,
· анамнез клинический и эпизоотологический,
· патогномонические и постморбидные признаки,
· постинфекционный иммунитет (IgM, IgG)
в системе эпизоотологического мониторинга и надзора.
|
Методологические принципы диагностики инфекционных болезней:
Манифестная инфекция -
острая, подострая, хроническая, ремиссии
| · клинические и патогномонические признаки
· прямая демонстрация возбудителя или его антигенов
· изоляция возбудителя
· его идентификация (микробиологическая, серологическая, генетическая)
| Скрытая инфекция -
латентная, персистентная,
медленная
| · демонстрация иммунного ответа - антигены и антитела (серологическая эпизоотология)
· биохимические (гематологические) изменения
· идентификация генома возбудителя (молекулярная эпизоотология)
| Постинфекционные состояния
| · клиническая история (анамнез)
· патогномонические изменения
· демонстрация иммунного ответа (антитела)
|
Методология:
· патогенетические аксиомы - ворота инфекции, локализация инфекционного процесса и динамика его развития, локализация и специфика поражений, локализация возбудителя, симптомы и трансмиссия, циркулирующие системы, типичные поражения, выделения, паренхиматозные органы;
· анализ ситуации и формулировка диагностических задач - выделение и идентификация возбудителя, тестирование антител, патоморфологические тесты, виды и типы специментов;
· алгоритмы решения. Общая схема:
Стадии:
| Маркеры инфекции (выраженность):
| инкубационный период
| возбудитель (++)
| генерализация инфекции
| возбудитель (++++)
| манифестная форма
| возбудитель (+++), антигены (+++)
| конвалесценция
| антигены (++), IgM (++++)
| ремиссии
| антитела IgG, IgA (++++)
| · множественное тестирование: параллельное, серийное (последовательное), ретестирование (негативного стада).
Общие требования к средствам и методам диагностики и их качественные характеристики:
· чувствительность (пропорция истинно положительных, «правильных» результатов) и специфичность (пропорция истинно отрицательных результатов);
· аутентичность, или соответствие - правильность выбора как теста, так и объекта);
· чистота, или точность - глубина, или уровень постановки диагноза по линии: симптом Þ этиология Þ идентификация возбудителя Þ нозология Þразновидность возбудителя. Например, мастит Þ инфекционный Þ бактериальный Þ стафилококковый, или трахеобронхит собак Þ инфекционный Þ аденовирус собак Þ 2 типа;
· разрешающая способность, или обоснованность (достаточность) - необходимая полнота методического спектра диагностики по линии: клиника и симптоматика Þ биохимия, гематология, патоморфология Þ микробиология Þ серология Þ геномный или полипептидный анализ. Например, репродуктивные расстройства у свиноматок Þ гибель и рассасывание эмбрионов, мумификация плодов и мертворождаемость Þ выявление антигенов парвовируса свиней с помощью МФА в тканях пораженных плодов Þ определение сероконверсии в парных сыворотках свиноматок в отношении ПВС, сравнение титров IgM и IgG, или массовый острый лихорадочный синдром и угнетение у свиней всех возрастов Þ экстенсивный геморрагический диатез на вскрытии Þ выделение вируса КЧС в культуре клеток с помощью МФА Þ окончательное подтверждение биопробой на животных, или прогрессирующее исхудание взрослого КРС Þ персистентный лимфоцитоз Þ РИД-позитивность на лейкоз;
· прецизионость (статистическая достоверность);
· воспроизводимость (повторяемость в чувствительности и специфичности);
· достоверность (надежность, испытанность);
· ценность, стоимость;
· репрезентативность выборки.
Семиотика (см. лекцию 7), патогномонические макро- и микроскопические признаки (на вскрытии и при патогистологическом исследовании):
· клиническое проявление инфекционных болезней;
· возбудитель и антигены в мазках-отпечатках, тельца-включения;
· дифференциальные таблицы (по клинической картине, макро- и микроизменениям).
Микробиологическая диагностика:
· прямое обнаружение возбудителя - светооптическая и электронная микроскопия, иммуноэлектронная микроскопия, экспресс-методы, общие свойства - бактериальный рост, фильтруемость, патогенность для лабораторных моделей;
· метод флюоресцирующих антител, другие хромогенные субстраты и метки (ферритин, коллоидное золото);
· выделение возбудителя на биообъектах - биопроба, экспериментальная инфекция, моделирование, признаки (куриные эмбрионы, культура клеток, лабораторные и естественно-восприимчивые животные);
· количественные аспекты и разрешающая способность методов, количественные тесты, титрование, выражение;
· идентификация - культуральные, биохимические, генетические свойства и признаки, таксономия возбудителя.
Серологическая диагностика:
· серологические реакции, методы серодиагностики, номенклатура, чувствительность и специфичность;
· качественные тесты с одним разведением сыворотки (РДП, РИД, РСК);
· тесты с серийными разведениями сыворотки (РН, РСК);
· тесты с прецизионными возможностями - иммуноферментный анализ и РНГА (количество), иммуноблотинг (качество, антигенный спектр антител);
· количественные измерения, выражение, тесты, разведения, логарифмическая трансформация (log2), средние геометрические титры (СГТ);
· серотипизация и тесты.
Организационно-правовые основы:
· нормативно-техническая документация;
· силы и средства, уровни решения проблем (ветлаборатории, НИУ, прецизионные центры), ответственность;
· материально-техническое обеспечение (приборы, реактивы, биопрепараты, их разработчики и производители), стандартизация и сертификация.
Интерпретация результатов:
· статистическая обработка, количественное выражение и достоверность результатов;
· истинно положительный и отрицательный результаты, принципиальные различия их получения и реализации;
· ложно-положительные результаты и их причины - перекрестные реакции, неспецифические ингибиторы, неспецифическая агглютинация;
· ложно-отрицательные результаты и их причины - естественная или индуцированная толерантность и супрессия (например, вирусная диарея+лейкоз КРС в РИД), неверно выбранные время тестирования или сами тесты, неспецифические ингибиторы (антикомплементарность сыворотки, токсичность для субстратов, неполные или блокирующие антитела, недостаточная чувствительность тестов).
Целевые возможности диагностических направлений и отдельных методов в решении общих и частных эпизоотологических задач (см. выше). Место и уровни.
Дифференциальная диагностика и ее эпизоотологическое значение при инфекциях различных категорий.
Прецизионный анализ в диагностике инфекций. Цели, задачи, методы и уровни решений.
Проблема дифференциации постинфекционного и поствакцинального иммунитета.
Определение и принципы серологической эпизоотологии:
· серопозитивность, серонегативность, сероконверсия;
· аналитическая специфичность и титры - предельные возможности, обеспечение чистоты, или точности диагноза, выявление минимальных «следов» инфекции, как правило скрытой;
· диагностическая специфичность и титры - оптимальные расчетные (эмпирически) значения, коррелирующие с показателями других тестов (как правило клиническо-морфологических), подтверждение достоверности и достаточности диагноза.
Индикация возбудителей инфекций как система:
· цели и задачи;
· микробиологические объекты ветнадзора;
· методологические принципы исследования внешней среды.
Лабораторные инфекции и способы их предупреждения.
Дата добавления: 2015-02-05 | Просмотры: 1668 | Нарушение авторских прав
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | 13 | 14 | 15 | 16 | 17 | 18 | 19 | 20 | 21 | 22 | 23 | 24 | 25 | 26 | 27 | 28 | 29 |
|