АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология
|
Возбудитель сибирской язвы
Таксономия. Возбудитель сибирской язвы - Bacillus anthracis, описанный в 1849 г. А. Поллендером и К. Даве-ном, а в 1876 г. выделенный Р. Кохом, относится к сем.
Клиника и эпидемиология. Сибирская язва - особо опасное инфекционное заболевание из группы инфекций кожных покровов и слизистых оболочек, описанное в конце XV в. С.С. Андреевским в Сибири. В зависимости от входных ворот инфекции различают три формы сибирской язвы: кожную, висцеральную (легочную, кишечную) и септическую. У человека в 98 % случаев возникает кожная форма, при которой на месте внедрения возбудителя путем поэтапного превращения красного пятна в медно-красную папулу и везикулу формируется покрытый черной коркой карбункул (anthrax - углевик), характеризующийся безболезненностью и резкой отечностью окружающих его тканей. Висцеральная форма протекает в виде тяжелой интоксикации при явлениях геморрагической пневмонии или диареи с рвотой и выделением кровянистых испражнений. Сибиреязвенный сепсис, как правило, -явление вторичное, возникающее вслед за другими формами инфекции. Первичный сепсис возможен при массивном инфицировании человека высоковирулентными штаммами бацилл.
Сибирская язва - зоонозное заболевание, эпизодически встречаемое повсеместно. Источником инфекции являются травоядные, преимущественно парнокопытные домашние животные (мелкий и крупный рогатый скот, свиньи). Факторами передачи сибиреязвенной инфекции среди людей могут служить почва, сырье (кожа, волосы, щетина), шерстяные и меховые изделия, мясные продукты. Пути ее передачи разнообразны: контактный (основной), алиментарный, аспирационный. Заболеваемость сибирской язвой среди людей носит спорадический характер. Болеют, главным образом, чабаны, доярки, зоотехники, ветеринары, рабочие мясокомбинатов и предприятий, обрабатывающих сырье животных.
Биологические особенности сибиреязвенной бациллы. Морфология и культуралъные свойства. Возбудитель сибирской язвы - крупная неподвижная стрептобацилла с обрубленными или даже вогнутыми концами размером 4-10 х 1-2 мкм. Во внешней среде она образует не превышающую поперечник палочки центрально расположенную овальную спору, а в организме человека и животных, на сывороточных и кровяных средах - капсулу, которая нередко окружает две-три особи. Располагаются сибиреязвенные палочки в мазке цепями и при утолщении их концов могут напоминать бамбуковую трость, а после 3-6-часового подращивания на МПБ и питательном агаре с пенициллином в результате утраты пептидогликана и превращения в сферопласты-бусинки - «жемчужное ожерелье». По Граму они окрашиваются положительно.
Сибиреязвенная палочка - факультативный анаэроб, хорошо развивается на простых питательных средах в широком температурном диапазоне (от 12 до 42 °С). При оптимальной температуре 37 °С через 18-24 ч образуются серебристо-серые, грубозернистые R-колонии, окаймленные клубками переплетающихся нитей, что придает им вид расстрепанного парика, львиной гривы или головы горгоны Медузы (рис. 97).
На МПБ культура вырастает на дне пробирки в виде комочка ваты, а среда остается прозрачной. При засеве столбика желатина уколом сибиреязвенная бацилла разрастается в виде перевернутой елочки.
Биохимическая активность. Бацилла обладает большим набором ферментов, расщепляющих углеводы, белки и липиды.
Антигены и токсины. В культуре сибиреязвенных бацилл обнаруживаются три антигена: соматический, кап-сульный и протективный. Соматический антиген является термостойким оболочечным полисахаридом, который выявляется в реакции Асколи, капсульный, представленный полипептидами, связанными с Д-глютаминовой кислотой, ингибирует фагоциты, а протективный - особым иммуногенным белком, который секретируется бациллами на специальных средах. Возбудитель сибирской язвы продуцирует экзотоксин, состоящий из отечного и летального факторов, вызывающих у животных отек легких и некроз кожи со смертельным исходом. При этом гены, детерминирующие вирулентность (капсуло- и токсинообразование) и иммуногенность (протективный антиген) находятся в плазмидах.
Иммунитет. Характер иммунитета при сибирской язве сложный. В процессе заболевания вырабатываются про-тективные антитела, активируется фагоцитарная реакция и развивается гиперчувствительность замедленного типа, которая сохраняется в течение многих лет после перенесенного заболевания. Исчерпывающих эпидемиологических данных о длительности и напряженности постинфекционного иммунитета не получено.
Лабораторная диагностика. Предварительный диагноз сибирской язвы ставится на основании микроскопического исследования патологического материала, а окончательный - после определения видовой принадлежности культуры, выделенной из него. При этом на каждом этапе микробиологического исследования В. anthracis дифференцируют с широко обсеменяющими окружающую среду сибиреязвенноподобными почвенными бациллами -В. cereus, В. cereus var. mycoides, В. megaterium, В. subtilis, В. mesentericus, - которые, попадая в продукты, могут вызывать пищевые отравления, а у ослабленных лиц - даже эндокардиты, менингиты, бактериемию. Чаще всего при антракоид-инфекциях выделяют В. cereus, продуцирующую экзотоксин.
Микроскопия. Материалом исследования при сибирской язве являются экссудат карбункула, мокрота, испражнения, а при сепсисе - кровь и моча. Для обнаружения сибиреязвенной бациллы делают три мазка. Один из них окрашивают по Граму, а два остальных - по Пешкову и Книги. В положительных случаях выявляют грамположи-тельные цепи бацилл, имеющих капсулы. Основным отличительным признаком антракоидов является их подвижность, что определяют в висячей и раздавленной каплях.
Бактериологическое исследование. Материалы больного, исключая кровь, для уничтожения неспороносной микрофлоры прогревают 5-10 мин при температуре 80 °С и только затем засевают на различные среды: в чашки с МПА; в пробирки или колбы с МПБ (кровь), а еще лучше -в бульон Хоттингера или обогащенные жидкие среды, содержащие раствор Хенкса и бычью или лошадиную сыворотку, на которых сибиреязвенная бацилла закономерно образует капсулу; в кровяной МПБ; в лакмусовую сыворотку; в столбик желатина. Выращивается возбудитель сибирской язвы в термостате при 37 °С в течение 24 ч.
На всех жидких средах сибиреязвенная бацилла растет придонно в виде комка ваты, не вызывает гемолиза, а ант-ракоиды мутят их с образованием обычного осадка, морщинистой сухой пленки, вызывая лизис эритроцитов в бульоне с кровью. На лакмусовой сыворотке бациллы сибирской язвы вызывают покраснение среды, а антракои-ды - ее посинение. В столбике желатина сибиреязвенная бацилла вырастает, как мы уже указывали, в виде перевернутой елочки, а через 3-4 дня разжижает его в виде чулка; антракоиды - разжижают желатин вдоль линии их засева. На пластинчатом агаре сибиреязвенная бацилла формирует крупные шероховатые колонии, напоминающие «растрепанный парик», антракоиды - шероховатые колонии-снежинки с зазубренными, бахромчатыми, завихренными вправо и влево нитями.
Подозрительные колонии микроскопируют, взвешивают в раздавленных и висячих каплях и, обнаружив типичные капсулообразующие бациллы, которые не обладают подвижностью, пересевают на скошенный агар.
Получив чистую культуру сибиреязвенных бацилл, прежде всего определяют ее вирулентность, подкожно заражая нескольких белых мышей, морских свинок или кролика. При этом мыши погибают спустя 1 сут от сепсиса с явлениями полнокровия внутренних органов и с обильными кровоизлияниями. В мазках из крови и отпечатках из органов обнаруживаются типичные капсульные стрептобациллы. Одновременно на засеянную газоном культуру в чашках Петри наносят специфические фаги «ВА-9» и «Саратов», определяя их литическое действие. И, наконец, воспроизводят тест «жемчужного ожерелья»: 3-часовую бульонную культуру засевают в чашки Петри с МПА, содержащим 0,5-0,05 ЕД/мл пенициллина, и, получив микроколонии через 3 ч роста, обнаруживают в них наряду с обычными стрептобациллами стрептомакрококки.
Стрептобациллы-антракоиды не патогенны для живот ных, не лизируются сибиреязвенным фагом и не дают тес та «жемчужного ожерелья», но в отличие от сибиреязвен ных обладают лецитиназной и фосфатазной активностью-
Биологический эксперимент. Как самостоятельный метод биологический эксперимент используется для выделения чистой культуры сибиреязвенных бацилл и определения их вирулентности. Обычно заражают мышей, вводя материал подкожно или внутрибрюшинно. Инфицированные мыши, как уже было отмечено, погибают спустя 24-48 ч от сепсиса. Сибиреязвенную культуру проще всего получить путем засева капли крови из сердца трупа животного на чашку Петри с МПА.
В тех случаях, когда из подозрительного материала выделить возбудитель невозможно (например, из разложившегося трупа, кожи, шерсти), прибегают к постановке реакции кольцепреципитации Асколи. С этой целью материал измельчают, заливают 10-20-кратным объемом изотонического раствора натрия хлорида, кипятят или выдерживают 16-20 ч при температуре 6-14 °С. Полученный экстракт фильтруют, прозрачную вытяжку, содержащую антиген-полисахарид, наслаивают на преципитирующую сыворотку. Реакция проявляется в первые 5-10 мин образованием мутного кольца преципитации на границе двух жидкостей (см. рис. 74).
Экспресс-диагностика сибирской язвы. Самый простой и доступный метод ускоренной диагностики основан на обнаружении в мазках капсул. Для этого микроскопируют материал, двухчасовые микрокультуры сибиреязвенных бацилл или перитониальный экссудат в первые часы после внутрибрюшинного заражения белых мышей. Большие возможности открывает реакция иммунофлюоресценции, позволяющая по ободочному свечению выявить в материале даже единичные особи бацилл.
Кожно-аллергическая проба. Гиперчувствительность больных и реконвалесцентов выявляют с помощью ант-раксина (гидролизат сибиреязвенных бацилл). Препарат вводят в количестве 0,1 мл внутрикожно в ладонную поверхность предплечья. Результаты кожной пробы учитывают через 24 и 48 ч. При положительной реакции на месте введения аллергена возникает инфильтрат и гиперемия диаметром не менее 10 мм.
Специфическая профилактика и лечение. Противоси-биреязвенная вакцина впервые получена Л. Пастером, а затем Л.С. Ценковским. В настоящее время специфическая профилактика сибирской язвы у людей проводится
четырьмя типами вакцин: 1) вакциной СТИ из лиофилизированных спор бескапсульного мутанта В. anthracis для накожного (500 ± 100 млн спор) и подкожного (90 ± 10 млн спор) применения; 2) химической вакциной из сорбированного на носителе протективного антигена, который получают в процессе культивирования вакцинного штамма; 3) комбинированной, состоящей из спор ослабленных штаммов и протективного антигена, сорбированного на геле гидроксида алюминия; 4) рекомбинантной, полученной на основе В. subtilis и лактобацилл, в геном которых удалось ввести гены протективного антигена сибиреязвенных бацилл. Кроме того, создаются новые более иммуногенные антисибиреязвенные вакцины. В частности, испытывается полусинтетическая вакцина для пероральной профилактики у свиней, состоящая из протективного антигена с адъювантами - сапонином QS-21 и монофосфориллипидом А в эмульсии твина-80. Конструируются вакцинные штаммы возбудителя с пониженной цитотоксической активностью вследствие структурных изменений в генах летального и отечного факторов. Ведутся поиски штаммов бацилл без генов вирулентности, в плазмидах которых содержится лишь ген, детерминирующий протективный антиген. Проходят испытания сибиреязвенной ДНК-вакцины. Лицам, имевшим контакт с больными сибирской язвой животными или употреблявшими в пищу их мясо, целесообразно в течение 5-10 дней вводить внутримышечно по 20-25 мл противосибиреязвенного иммуноглобулина. Лечение сибирской язвы проводят тем же иммуноглобулином в комплексе с пенициллинами, хлортетрациклинами и аминогликозидами.
Дата добавления: 2015-09-03 | Просмотры: 1136 | Нарушение авторских прав
1 | 2 | 3 |
|