АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология

Определение группы крови по Цоликлону

I – этап Свойства цоликлональных сывороток
IV - этап Описание определения группы крови
II - этап Подготовка материала к исследованию
V - этап Описание результата исследования  
III этап Подготовка к проведению определению группы крови

 

 


I этап -Свойства цоликлональных сывороток

Описание этапа Техника проведения
1. Цоликлоны анти-А и анти-Вявляются продуктом гибридомных клеточных линий, полученных в результате слияния мышиных антителообразующих В-лимфоцитов с клетками мышиной миеломы. Индивидуальные гибридомные линии продуцируют гомогенные антитела только одного класса иммуноглобулинов, которые полностью идентичны по структуре и биологической активности. Антитела, продуцируемые клетками одного клона (потомство одной клетки), являются моноклональными.    
2. Культура клеток Культура клетокодной специфичности, происходящих из одного лимфоцита, образует клетки одного клона. Главное заключается в следующем: необходимо получить от одной клетки специфические антитела и наработать их в неограниченном количестве. Трудность заключается в преодолении двух задач: во-первых, нормальные клетки после нескольких делений погибают; во-вторых, только раковые клетки способны неограниченно размножаться. Для решения этих двух несовместимых проблем в 1975 году Г. Кёлер и К. Мильштейн создали клеточные гибриды, или гибридомы. Гибридомы — это слияние нормальных лимфоцитов в питательной среде с клетками миеломы. Лимфоциты в этой среде не погибают, а от миеломного партнера получают возможность бесконечно размножаться. Таким образом, гибридомный клан размножается, а в результате этого процесса образуются моноклональные антитела.
3. Выработка антител Лимфоциты, несущие агтлютиноген А, вырабатывают специфическое антитело анти-А; лимфоциты, несущие агтлютиноген В, вырабатывают специфическое антитело анти-В.
4. Состав Цоликлона     Моноклональные анти-А и анти-В антителапродуцируются двумя различными гибридомами. Цоликлоны анти-А и анти-В представляют собой разведенную асцитную жидкость мышей-носителей соответствующей гибридомы, в которой содержатся специфические иммуноглобулины класса М (IgM), направленные против группоспецифических антигенов А или В человека. Таким образом, цоликлоныне содержат антител иной специфичности и поэтому не вызывают неспецифической полиагглютинации эритроцитов.
5. Авидность Авидность, то есть время наступления реакции агглютинациии ее выраженность, у цоликлонов анти-А и анти-В выше, чем у изогемагглютинирующих АВО-сывороток, особенно в случае слабо выраженных антигенов эритроцитов.  

 

II этап -Подготовка материала к исследованию

 

Описание этапа Техника проведения
Забор крови у пациента проводиться двумя способами
1. Внутривенный забор крови
2. Забор крои из пальца  

 

III этап -Подготовка к проведению определению группы крови

 

Техника проведения
1. Материальное обеспечение: 1) цоликлон анти-А, В, Д СУПЕР; 2) исследуемая кровь; 3) маркированный планшет; 4) предметные стекла (стеклянные палочки); 5) пипетка для взятия крови; 6) перчатки; 7) часы; 8) регламентированный дезинфектант;
2. Врач одевает на руки стерильные перчатки, маску, очки
3. Убедиться в пригодности цоликлонов, донорской крови
4. Получить кровь реципиента и донора.

 

 

IV этап – Подготовка к проведению определению группы крови

 

Описание этапа Техника проведения
1. На поверхность керамической пластинки нанесите по одной капле (0,1 мл) цоликлона анти - А, анти - В и анти - АВ.  
2. Рядом с каждой каплей реагента нанесите маленькую (0,05-0,01 мл) каплю исследуемой крови.  
3. Смешайте каплю цоликлона с каплей крови индивидуальной чистой стеклянной палочкой.  
  Реакция агглютинации развивается в течение первых 3 - 5 секунд при мягком покачивании пластинки.
  Результаты реакции учитываются через 2,5 - 3 минуты после смешивания капель.  

 

V этап -Описание стадий геморроя прямой кишки

 

1. Положительный результат типирования выражается в появлении агглютинации (склеивания) эритроцитов, которую можно наблюдать невооруженным глазом, поскольку капля быстро просветляется, а эритроциты образуют крупные, хорошо различимые ярко-алые агрегаты.
2. При отрицательном результате гемагглютинация не развивается, капля продолжает оставаться равномерно окрашенной в красный цвет, агрегаты в ней не обнаруживаются.
3. В случае положительной реакции агглютинации эритроцитов с обоими цоликлонами, т.е. установления группы крови АВ (IV), для исключения неспецифической агглютинации (аутоагглютинации, панагглютинации), необходимо провести контрольное исследование данного образца крови с изотоническим раствором хлорида натрия.
4. Для этого смешивают одну большую каплю (0,1 мл) изотонического раствора, с маленькой (0,01 мл) каплей исследуемой крови. При отсутствии агглютинации в этой контрольной капле кровь принадлежит к группе AB (IV).

 

Учет результатов реакции агглютинации представлен в таблице:

Итоговая оценка формируется из суммы оценок 5 этапов, за каждый этап - 100 баллов, согласно таблицы1-2.

Таблица 1 – Оценка уровня знаний по ОСКЭ

План
Цели Всего вопросов % Когнитивные уровни +%
Запоминание Понимание Применение
Свойства цоликлональ-ных сывороток   25%      
Подготовка материала к исследованию   10%      
Подготовка к проведе-нию определению группы крови   20%      
Подготовка к проведе-нию определению группы крови   25%      
Описание результата исследования   24%      
Всего          

 

Таблица 2 – Буквенно – балльно – рейтинговая оценка по дисциплине

Оценка по буквенной системе Цифровой эквивалент баллов Процентное содержание % Оценка по традиционной системе
А 4,0 95-100   ОТЛИЧНО
А- 3,67 90-94
В+ 3,33 85-89   ХОРОШО
В 3,0 80-84
В- 2,67 75-79
С+ 2,33 70-74   УДОВЛЕТВОРИТЕЛЬНО
С 2,0 65-69
С- 1,67 60-64
D+ 1,33 55-59
D 1,0 50-54
F   0-49 НЕУДОВЛЕТВОРИТЕЛЬНО

 


Дата добавления: 2016-03-26 | Просмотры: 858 | Нарушение авторских прав







При использовании материала ссылка на сайт medlec.org обязательна! (0.004 сек.)