АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология

Возбудитель сибирской язвы

Таксономия. Возбудитель сибирской язвы - Bacillus anthracis, описанный в 1849 г. А. Поллендером и К. Даве-ном, а в 1876 г. выделенный Р. Кохом, относится к сем.

Клиника и эпидемиология. Сибирская язва - особо опасное инфекционное заболевание из группы инфекций кожных покровов и слизистых оболочек, описанное в кон­це XV в. С.С. Андреевским в Сибири. В зависимости от входных ворот инфекции различают три формы сибир­ской язвы: кожную, висцеральную (легочную, кишечную) и септическую. У человека в 98 % случаев возникает кож­ная форма, при которой на месте внедрения возбудителя путем поэтапного превращения красного пятна в медно-красную папулу и везикулу формируется покрытый чер­ной коркой карбункул (anthrax - углевик), характеризу­ющийся безболезненностью и резкой отечностью окружа­ющих его тканей. Висцеральная форма протекает в виде тяжелой интоксикации при явлениях геморрагической пневмонии или диареи с рвотой и выделением кровянис­тых испражнений. Сибиреязвенный сепсис, как правило, -явление вторичное, возникающее вслед за другими фор­мами инфекции. Первичный сепсис возможен при массив­ном инфицировании человека высоковирулентными штаммами бацилл.

Сибирская язва - зоонозное заболевание, эпизодически встречаемое повсеместно. Источником инфекции являют­ся травоядные, преимущественно парнокопытные домаш­ние животные (мелкий и крупный рогатый скот, свиньи). Факторами передачи сибиреязвенной инфекции среди лю­дей могут служить почва, сырье (кожа, волосы, щетина), шерстяные и меховые изделия, мясные продукты. Пути ее передачи разнообразны: контактный (основной), алимен­тарный, аспирационный. Заболеваемость сибирской яз­вой среди людей носит спорадический характер. Болеют, главным образом, чабаны, доярки, зоотехники, ветерина­ры, рабочие мясокомбинатов и предприятий, обрабатыва­ющих сырье животных.

Биологические особенности сибиреязвенной бациллы. Морфология и культуралъные свойства. Возбудитель си­бирской язвы - крупная неподвижная стрептобацилла с обрубленными или даже вогнутыми концами размером 4-10 х 1-2 мкм. Во внешней среде она образует не превы­шающую поперечник палочки центрально расположен­ную овальную спору, а в организме человека и животных, на сывороточных и кровяных средах - капсулу, которая нередко окружает две-три особи. Располагаются сибире­язвенные палочки в мазке цепями и при утолщении их концов могут напоминать бамбуковую трость, а после 3-6-часового подращивания на МПБ и питательном агаре с пенициллином в результате утраты пептидогликана и превращения в сферопласты-бусинки - «жемчужное оже­релье». По Граму они окрашиваются положительно.

Сибиреязвенная палочка - факультативный анаэроб, хорошо развивается на простых питательных средах в ши­роком температурном диапазоне (от 12 до 42 °С). При оп­тимальной температуре 37 °С через 18-24 ч образуются се­ребристо-серые, грубозернистые R-колонии, окаймлен­ные клубками переплетающихся нитей, что придает им вид расстрепанного парика, львиной гривы или головы горгоны Медузы (рис. 97).

На МПБ культура вырастает на дне пробирки в виде ко­мочка ваты, а среда остается прозрачной. При засеве стол­бика желатина уколом сибиреязвенная бацилла разрастается в виде перевернутой елочки.

Биохимическая активность. Бацилла обладает боль­шим набором ферментов, расщепляющих углеводы, белки и липиды.

Антигены и токсины. В культуре сибиреязвенных ба­цилл обнаруживаются три антигена: соматический, кап-сульный и протективный. Соматический антиген является термостойким оболочечным полисахаридом, который вы­является в реакции Асколи, капсульный, представленный полипеп­тидами, связанными с Д-глютаминовой кислотой, ингибирует фаго­циты, а протективный - особым иммуногенным белком, который секретируется бациллами на спе­циальных средах. Возбудитель сибирской язвы продуцирует экзотоксин, состоящий из отечного и летального факторов, вызывающих у животных отек легких и некроз кожи со смертель­ным исходом. При этом гены, детерминирующие вирулент­ность (капсуло- и токсинообразование) и иммуногенность (протективный антиген) находятся в плазмидах.

Иммунитет. Характер иммунитета при сибирской язве сложный. В процессе заболевания вырабатываются про-тективные антитела, активируется фагоцитарная реак­ция и развивается гиперчувствительность замедленного типа, которая сохраняется в течение многих лет после пе­ренесенного заболевания. Исчерпывающих эпидемиологических данных о длительности и напряженности пост­инфекционного иммунитета не получено.

Лабораторная диагностика. Предварительный диагноз сибирской язвы ставится на основании микроскопическо­го исследования патологического материала, а окончательный - после определения видовой принадлежности культуры, выделенной из него. При этом на каждом этапе микробиологического исследования В. anthracis дифференцируют с широко обсеменяющими окружающую среду сибиреязвенноподобными почвенными бациллами -В. cereus, В. cereus var. mycoides, В. megaterium, В. subtilis, В. mesentericus, - которые, попадая в продукты, могут вы­зывать пищевые отравления, а у ослабленных лиц - даже эндокардиты, менингиты, бактериемию. Чаще всего при антракоид-инфекциях выделяют В. cereus, продуцирующую экзотоксин.

Микроскопия. Материалом исследования при сибир­ской язве являются экссудат карбункула, мокрота, исп­ражнения, а при сепсисе - кровь и моча. Для обнаружения сибиреязвенной бациллы делают три мазка. Один из них окрашивают по Граму, а два остальных - по Пешкову и Книги. В положительных случаях выявляют грамположи-тельные цепи бацилл, имеющих капсулы. Основным отли­чительным признаком антракоидов является их подвиж­ность, что определяют в висячей и раздавленной каплях.

Бактериологическое исследование. Материалы больно­го, исключая кровь, для уничтожения неспороносной микрофлоры прогревают 5-10 мин при температуре 80 °С и только затем засевают на различные среды: в чашки с МПА; в пробирки или колбы с МПБ (кровь), а еще лучше -^в бульон Хоттингера или обогащенные жидкие среды, со­держащие раствор Хенкса и бычью или лошадиную сыворотку, на которых сибиреязвенная бацилла закономерно образует капсулу; в кровяной МПБ; в лакмусовую сыво­ротку; в столбик желатина. Выращивается возбудитель сибирской язвы в термостате при 37 °С в течение 24 ч.

На всех жидких средах сибиреязвенная бацилла растет придонно в виде комка ваты, не вызывает гемолиза, а ант-ракоиды мутят их с образованием обычного осадка, мор­щинистой сухой пленки, вызывая лизис эритроцитов в бульоне с кровью. На лакмусовой сыворотке бациллы си­бирской язвы вызывают покраснение среды, а антракои-ды - ее посинение. В столбике желатина сибиреязвенная бацилла вырастает, как мы уже указывали, в виде пере­вернутой елочки, а через 3-4 дня разжижает его в виде чулка; антракоиды - разжижают желатин вдоль линии их засева. На пластинчатом агаре сибиреязвенная бацилла формирует крупные шероховатые колонии, напоминаю­щие «растрепанный парик», антракоиды - шероховатые колонии-снежинки с зазубренными, бахромчатыми, за­вихренными вправо и влево нитями.

Подозрительные колонии микроскопируют, взвешива­ют в раздавленных и висячих каплях и, обнаружив типич­ные капсулообразующие бациллы, которые не обладают подвижностью, пересевают на скошенный агар.

Получив чистую культуру сибиреязвенных бацилл, прежде всего определяют ее вирулентность, подкожно за­ражая нескольких белых мышей, морских свинок или кролика. При этом мыши погибают спустя 1 сут от сепсиса с явлениями полнокровия внутренних органов и с обиль­ными кровоизлияниями. В мазках из крови и отпечатках из органов обнаруживаются типичные капсульные стрептобациллы. Одновременно на засеянную газоном культуру в чашках Петри наносят специфические фаги «ВА-9» и «Саратов», определяя их литическое действие. И, нако­нец, воспроизводят тест «жемчужного ожерелья»: 3-часо­вую бульонную культуру засевают в чашки Петри с МПА, содержащим 0,5-0,05 ЕД/мл пенициллина, и, получив микроколонии через 3 ч роста, обнаруживают в них наря­ду с обычными стрептобациллами стрептомакрококки.

Стрептобациллы-антракоиды не патогенны для живот ных, не лизируются сибиреязвенным фагом и не дают тес та «жемчужного ожерелья», но в отличие от сибиреязвен ных обладают лецитиназной и фосфатазной активностью-

Биологический эксперимент. Как самостоятельный метод биологический эксперимент используется для вы­деления чистой культуры сибиреязвенных бацилл и опре­деления их вирулентности. Обычно заражают мышей, вводя материал подкожно или внутрибрюшинно. Инфи­цированные мыши, как уже было отмечено, погибают спустя 24-48 ч от сепсиса. Сибиреязвенную культуру про­ще всего получить путем засева капли крови из сердца трупа животного на чашку Петри с МПА.

В тех случаях, когда из подозрительного материала вы­делить возбудитель невозможно (например, из разложив­шегося трупа, кожи, шерсти), прибегают к постановке ре­акции кольцепреципитации Асколи. С этой целью матери­ал измельчают, заливают 10-20-кратным объемом изото­нического раствора натрия хлорида, кипятят или выдер­живают 16-20 ч при температуре 6-14 °С. Полученный экстракт фильтруют, прозрачную вытяжку, содержащую антиген-полисахарид, наслаивают на преципитирующую сыворотку. Реакция проявляется в первые 5-10 мин обра­зованием мутного кольца преципитации на границе двух жидкостей (см. рис. 74).

Экспресс-диагностика сибирской язвы. Самый прос­той и доступный метод ускоренной диагностики основан на обнаружении в мазках капсул. Для этого микроскопи­руют материал, двухчасовые микрокультуры сибиреяз­венных бацилл или перитониальный экссудат в первые часы после внутрибрюшинного заражения белых мышей. Большие возможности открывает реакция иммунофлюоресценции, позволяющая по ободочному свечению вы­явить в материале даже единичные особи бацилл.

Кожно-аллергическая проба. Гиперчувствительность больных и реконвалесцентов выявляют с помощью ант-раксина (гидролизат сибиреязвенных бацилл). Препарат вводят в количестве 0,1 мл внутрикожно в ладонную поверх­ность предплечья. Результаты кожной пробы учитывают через 24 и 48 ч. При положительной реакции на месте вве­дения аллергена возникает инфильтрат и гиперемия диа­метром не менее 10 мм.

Специфическая профилактика и лечение. Противоси-биреязвенная вакцина впервые получена Л. Пастером, а затем Л.С. Ценковским. В настоящее время специфичес­кая профилактика сибирской язвы у людей проводится

четырьмя типами вакцин: 1) вакциной СТИ из лиофилизированных спор бескапсульного мутанта В. anthracis для накож­ного (500 ± 100 млн спор) и подкожного (90 ± 10 млн спор) применения; 2) химической вакциной из сорбированного на носителе протективного антигена, который получают в процессе культивирования вакцинного штамма; 3) комби­нированной, состоящей из спор ослабленных штаммов и протективного антигена, сорбированного на геле гидроксида алюминия; 4) рекомбинантной, полученной на осно­ве В. subtilis и лактобацилл, в геном которых удалось ввес­ти гены протективного антигена сибиреязвенных бацилл. Кроме того, создаются новые более иммуногенные антиси­биреязвенные вакцины. В частности, испытывается полу­синтетическая вакцина для пероральной профилактики у свиней, состоящая из протективного антигена с адъювантами - сапонином QS-21 и монофосфориллипидом А в эмульсии твина-80. Конструируются вакцинные штаммы возбудителя с пониженной цитотоксической активностью вследствие структурных изменений в генах летального и отечного факторов. Ведутся поиски штаммов бацилл без генов вирулентности, в плазмидах которых содержится лишь ген, детерминирующий протективный антиген. Проходят испытания сибиреязвенной ДНК-вакцины. Ли­цам, имевшим контакт с больными сибирской язвой жи­вотными или употреблявшими в пищу их мясо, целесооб­разно в течение 5-10 дней вводить внутримышечно по 20-25 мл противосибиреязвенного иммуноглобулина. Ле­чение сибирской язвы проводят тем же иммуноглобули­ном в комплексе с пенициллинами, хлортетрациклинами и аминогликозидами.

Дата добавления: 2015-09-03 | Просмотры: 1074 | Нарушение авторских прав