АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология

Определение активности амилазы мочи по методу Смита-Ро в модификации Уголева

Прочитайте:
  1. C. повышение цитотоксической активности Т-лимфоцитов
  2. E. повышение ферментативной активности лизосом
  3. E. снижения активности фермента глутатионпероксидазы
  4. I. Определение верхушечного толчка.
  5. I.1. Определение понятия
  6. II) Энзимологическое определение количества метаболитов.
  7. III. Виды реактивности
  8. IV. Роль реактивности организма в возникновении и развитии опухолевого процесса.
  9. IV.1. Дыхательная недостаточность. Определение понятия
  10. А) амилазы

Принцип метода

Метод основан на определении количества крахмала, расщепляемого амилазой, которое определяется по изменению интенсивности синего окрашивания крахмала в присутствии йода..

Ход определения

Отмеривают 1 мл фосфатного буфера (рН=7,2) и 1 мл 0,15% раствора крахмала, перемешивают встряхиванием и добавляют 0,5 мл мочи, разведенной в «R» раз. Параллельно исследуют контрольную пробу, содержащую 0,5 мл воды вместо мочи (остальные реактивы те же).

Опытные и контрольные пробы инкубируют в термостате при температуре 380 в течение 20 минут. После извлечения из термостата быстро для прекращения реакции добавляют в опытную и контрольную пробы 1 мл 1н соляной кислоты, по 1 мл дистиллированной воды и по 0,2 мл 0,25% раствора йода. Пробирки встряхивают, образовавшуюся синюю окраску фотометрируют против воды при красном светофильтре (640 нм).

Расчет

Оптическую плотность контрольной пробы, содержащей нерасщепленный крахмал, принимают за 100%.

1. Рассчитывают процент нерасщепленного крахмала в опытной пробе по формуле

Х= Д2 * 100

Д1

Где Д1 – оптическая плотность контрольной пробы,

Д 2 – оптическая плотность опытной пробы.

2. Находят процент расщепленного крахмала

У=100% - Х

3. Рассчитывается амилазная активность, которая выражается в условных единицах по формуле:

А (усл.ед.) = У*Р

t

где У – количествао расщепленного крахмала в %

Р – степень разведения мочи (например, 40, т.е. разведение 1:40)

t - время – продолжительность инкубации в минутах (20 мин).

Примечание: при высокой амилазной активности производится разведение мочи в 100, 200 и более раз. Норма 15-50 условных единиц.

Вывод

 

Дата добавления: 2015-09-03 | Просмотры: 713 | Нарушение авторских прав


1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | 13 | 14 | 15 | 16 | 17 | 18 | 19 | 20 | 21 | 22 | 23 | 24 | 25 | 26 | 27 | 28 | 29 | 30 | 31 | 32 | 33 |

При использовании материала ссылка на сайт medlec.org обязательна! (0.003 сек.)