|
АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология
|
Для консультации преподавателям
Занятие 11. Дата ______. Тема: «Учение об инфекции. Факторы врожденного иммунитета. Фагоцитоз»
Streptococcus pneumoniaeФагоцитоз Neisseria gonorrhoeae в гное
   (в органах) S.aureus _ (незавершенный фагоцитоз)
Окраска водным фуксином Окраска по Граму Окраска метиленовым синим
Рисунок 6. Факторы вирулентности стафилококков
Плазмокоагулаза Рост на 5% кровяном агаре (β-гемолиз) Рост на ЖСА (лецитовителлаза)
 
Таблица 14. Механизмы и пути передачи инфекционных заболеваний
| Механизмы заражения
| Пути передачи инфекции
| Факторы передачи инфекции
| "Входные ворота" инфекции
| Группа инфекционных заболеваний
| | Фекально-оральный
| Пищевой (алиментарный)
| Контаминированные пищевые продукты
|
Рот, желудочно-кишечный тракт
|
Кишечные инфекции
| | Водный
| Инфицированная вода
| | Контактно-бытовой
| Грязные руки, контаминированная посуда, насекомые-переносчики (мухи, тараканы)
| | Аэрогенный
| Воздушно-капельный
| Капли слизи из зева при кашле, чихании, разговоре, шепоте и дыхании
| Слизистые оболочки дыхательных путей
| Респираторные инфекции
(инфекции дыхательных путей)
| | Воздушно-пылевой
| Частицы пыли, несущие на себе микробы
| | Аэрозольный
| Пылевой или водный аэрозоль
| | Кровяной
| Прямой
| Трансфузионный
| Переливание зараженной крови
|
Кровь
|
Кровяные инфекции
| | Трансплацентарный
| Через плаценту от матери к плоду
| | Половой
| Если были повреждения с выделением крови
| | Непрямой
| Трансмиссивный
| Через кровососущих насекомых
| | Манипуляционный
| Через нестерильные инструменты (иглы, шприцы, "опасная" бритва) с остатками крови на них
| | Контактный
| Контактный (прямой)
| Контаминированные руки (при рукопожатии, дотрагивании и т.п.), поцелуй, укус животного, травма, прохождение плода через инфицированные родовые пути матери
|
Кожа, слизистые оболочки мочевыделительной и половой систем, конъюнктива глаз, волосы, ногти
|
Контактные инфекции
| | Половой (прямой)
| Половой контакт
| Сексуально-трансмиссивные инфекции
| | Контактно-бытовой (непрямой)
| Контаминированные предметы (контакт или ранение), все виды оружия, медицинская аппаратура перевязочный материал
|
Контактные инфекции
|
Занятие 12. Дата _______. Тема: «Реакции иммунитета (реакция агглютинации, РПГА, реакция Кумбса, реакция преципитации)»
Таблица 15. Развернутая реакция агглютинации с сывороткой больного
|
Ингредиенты
| пробирки
| |
|
|
|
|
| Контроль сыворотки
| Контроль антигена
| | Изотонический раствор, мл
| 1,0
| 1,0
| 1,0
| 1,0
| 1,0
| --
| 1,0
| | Сыворотка больного в исходном разведении 1:25, мл
| 1,0
| →
| →
| →
| →
вылить
| 1,0
| --
| | Разведение сыворотки
| 1:50
| 1:100
| 1:200
| 1:400
| 1:800
| 1:25
| --
| | Первый ряд пробирок:
О-диагностикум (в каплях)
|
|
|
|
|
|
|
| | Второй ряд пробирок:
Н-диагностикум (в каплях)
|
|
|
|
|
|
|
| | Термостат при 37оС в течение 2 ч., затем при комнатной температуре 24 ч.
| | Результат: О-агглютинация
|
|
|
|
|
|
|
| | Результат: Н-агглютинация
|
|
|
|
|
|
|
| | ВЫВОДЫ: реакция агглютинации положительная.
Титр антител к О-антигену - ________; к Н-антигену - ________.
|
Рисунок 7а. Реакция агглютинации на стекле с неадсорбированными сыворотками
| ч.к. +
брюшноти-фозная сыв.
| ч.к. +
паратифозная сыворотка
| Контроль
(ч.к.+физ.р-р)
| ВЫВОД:
Рисунок 7б. Реакция агглютинации на стекле с адсорбированными сыворотками
   Рисунок 7а.
| ч.к. +
брюшноти-фозная сыв.
| ч.к. +
паратифозная сыворотка
| Контроль
(ч.к.+физ.р-р)
| ВЫВОД:
Рисунок 8. Схема реакции пассивной гемагглютинации (РПГА)
Таблица 16. Реакция пассивной (непрямой) гемагглютинации (РПГА)
|
Ингредиенты
| пробирки
| |
|
|
|
|
| Контроль антигена
| | Изотонический раствор, мл
| 0,25
| 0,25
| 0,25
| 0,25
| 0,25
| 0,25
| | Сыворотка больного в исходном разведении 1:25, мл
| 0,25
| →
| →
| →
| →
вылить
| --
| | Разведение сыворотки
| 1:10
| 1:20
| 1:40
| 1:80
| 1:160
| --
| | Эритроцитарный диагностикум, мл
| 0,25
| 0,25
| 0,25
| 0,25
| 0,25
| 0,25
| | При комнатной температуре в течение 30-60 минут
| | Результат:
|
|
|
|
|
|
| | ВЫВОД: реакция пассивной гемагглютинации положительная до титра __________.
|
Таблица 17. Реакция кольцепреципитации с бактериальным гаптеном
| Ингредиенты
| Неизвестный гаптен
| | Преципитирующая сыворотка против B.cereus
|
| | Преципитирующая сыворотка против E.coli
|
| | ВЫВОД: Неизвестный гаптен выделен из ________________.
|
Таблица 18. Реакция кольцепреципитации для определения неизвестного белка
| Ингредиенты
| Неизвестный белок
| | Преципитирующая сыворотка против белка человека
|
| | Преципитирующая сыворотка против белка курицы
|
| | ВЫВОД: Неизвестный белок принадлежит ________________.
|
Занятие 13. Дата _______. Тема: «Реакции иммунитета (реакции лизиса, РСК, ИФА, РИФ, РИА, иммуноблоттинг)»
Таблица 19. Реакция иммунного гемолиза
| Ингредиенты
| Опыт
| Контроль
| Контроль
| Контроль
| Контроль
| | Гемолитическая сыворотка кролика, мл
| 0,5
| 0,5
| --
| 0,5
| --
| | Эритроциты барана, мл
| 0,5
| 0,5
| 0,5
| --
| 0,5
| | Комплемент в разведении 1:10, мл
| 0,5
| --
| 0,5
| 0,5
| --
| | Эритроциты собаки, мл
| --
| --
| --
| 0,5
| --
| | Физиологический раствор, мл
| --
| 0,5
| 0,5
| --
| 1,0
| | Общий объем, мл
| 1,5
| 1,5
| 1,5
| 1,5
| 1,5
| | Инкубация при 37oC в течение 45-60 минут
| | Результат:
(гемолиз/отсутствие гемолиза):
|
|
|
|
|
| | ВЫВОД: Реакция иммунного гемолиза положительная (отрицательная), т.к. _______________________________________________________________________
|
Таблица 20. Реакция титрования комплемента
|
Ингредиенты
| пробирки
| | 1
| 2
| 3
| 4
| 5
| 6
| 7
| Контроль комплем.
8
| Контроль гем. сист
| | Комплемент в разведении 1:10, мл
| 0,2
| 0,25
| 0,3
| 0,35
| 0,4
| 0,45
| 0,5
| 0,5
| --
| | Изотонический раствор, мл
| 1,3
| 1,25
| 1,2
| 1,15
| 1,1
| 1,05
| 1,0
| 1,5
| 1,5
| | Гемолитическая система, мл
| 1,0
| 1,0
| 1,0
| 1,0
| 1,0
| 1,0
| 1,0
| 0,5
| 1,0
| | Инкубация при 37oC в течение 30 минут
| | Результаты:
(гемолиз/отсутствие гемолиза):
|
|
|
|
|
|
|
|
|
| | ВЫВОД: титр комплемента ______ мл; рабочая доза комплемента ________ мл.
|
Рисунок 9. Схема реакции связывания комплемента (РСК)
Таблица 21. Реакция связывания комплемента с исследуемой сывороткой
| Ингредиенты
| Опыт
| Контроль сыворотки
| Контроль антигена
| | Исследуемая сыворотка
в разведении 1:25, мл
| 0,5
| 0,5
| --
| | Антиген (диагностикум), мл
| 0,5
| --
| 0,5
| | Комплемент в рабочей дозе, мл
| 0,5
| 0,5
| 0,5
| | Изотонический раствор, мл
| --
| 0,5
| 0,5
| | Инкубация при 37oC в течение 45-60 минут
| | Гемолитическая система, мл
| 1,0
| 1,0
| 1,0
| | Инкубация при 37oC в течение 45-60 минут
| | Результаты:
(гемолиз/отсутствие гемолиза):
| Сыворотка больного
|
|
|
| | Сыворотка здорового
|
|
|
| | ВЫВОДЫ: РСК положительная/отрицательная с сывороткой здорового, т.к. ________________________________________________________________.
РСК положительная/отрицательная с сывороткой больного, т.к. ________________________________________________________________.
| Условные обозначения: «+» - наличие гемолиза (РСК «-«),
«-» - отсутствие гемолиза (РСК «+«).
Рисунок 10. Схема проведения иммуноферментного анализа (ИФА, «метод сэндвича»)
 
Таблица 22. Схема постановки ИФА
| Ингредиенты
| Опыт
| «Положительный контроль»
| «Отриц. контроль»
| |
| A1 A2
| B1 B2
| C1 C2
| D1 D2
| E1 E2
| F1 F2
| G1 G2
| H1 H2
| | 1. Буфер A (мл)
| 0,1
| 0,1
| 0,1
| 0,1
| 0,1
| 0,1
| 0,1
| 0,1
| | Инкубация при комнатной температуре 10 мин.
| | 2. Сыворотка больного (мл)
| 0,1
| --
| --
| --
| --
| --
| --
| --
| | 3. Стандартный антиген 100 мкг/мл (мл)
| --
| 0,1
| 0,1
| 0,1
| 0,1
| 0,1
| 0,1
вылить
| --
| | 4. Отрицательный контроль (мл)
| --
| --
| --
| --
| --
| --
| --
| 0,1
| | Инкубация при 37oC в течение 20 мин.
| | 5. Конъюгат (мл)
| 0,1
| 0,1
| 0,1
| 0,1
| 0,1
| 0,1
| 0,1
| 0,1
| | Инкубация при 37oC в течение 20 мин.
| | 6. Субстрат (мл)
| 0,1
| 0,1
| 0,1
| 0,1
| 0,1
| 0,1
| 0,1
| 0,1
| | Инкубация при комнатной температуре 20 мин.
| | 7. 50%H2SO4 (мл)
| 0,05
| 0,05
| 0,05
| 0,05
| 0,05
| 0,05
| 0,05
| 0,05
| | Результаты:
|
|
|
|
|
|
|
|
| | ВЫВОДЫ: ИФА ________________(положительная/отрицательная).
Концентрация HBs антигена _______ мкг/мл
|
Занятие 14. Дата ______. Тема: «Медицинские иммунобиологические препараты для лечения, профилактики и диагностики заболеваний»
Таблица 23. Схема реакции флоккуляции для титрования анатоксина
| Ингредиенты
|
|
|
|
|
| | Дифтерийный анатоксин, мл
| 2,0
| 2,0
| 2,0
| 2,0
| 2,0
| | Противодифтерийная антитоксическая сыворотка, мл (400 МЕ/мл)
| 0,16
| 0,18
| 0,2
| 0,22
| 0,24
| | Водяная баня 40-45˚C в течение 45 минут
| | Результаты:
(инициальная флоккуляция):
| | | | | | | Расчет:
| | ВЫВОДЫ: Реакция флоккуляции ________________(положительна/отрицательна).
Титр дифтерийного анатоксина __________ Lf/мл.
|
Таблица 24. Схемаконтроля дифтерийного анатоксина
| Название анатоксина
| Тип вакцины
| Внешний вид
(цвет, прозрачность)
| Стерильность
| Титр
(см. табл.9)
| | | | | | | | ВЫВОД: Дифтерийный анатоксин________________ (соответствует/не соответствует стандарту) по показателям _________________________________________.
|
Схема 4. Препараты для создания искусственно-приобретенного активного иммунитета
Схема 5. Препараты для создания искусственно-приобретенного пассивного иммунитета
Для консультации преподавателям
Дата добавления: 2014-12-12 | Просмотры: 892 | Нарушение авторских прав
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | 13 | 14 | 15 | 16 | 17 |
|
