АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология

Методы лабораторной диагностики. Лабораторная диагностикаэнтеральных эшерихиозов (кишечной коли-инфекции) проводится бактериологическим методом

Лабораторная диагностикаэнтеральных эшерихиозов (кишечной коли-инфекции) проводится бактериологическим методом. Поиск патоген­ных вариантов E.coli в исследуемом материале (испражнения) чаще всего проводят на фоне обильного роста банальных E.coli, что весьма затрудняет выделение и идентификацию диарсегенных E.coli. Основным подходом является выделение чистой культуры на дифференциально - диагностических средах и ее идентификация по антигенным свойствам. Ставят РА с набором поливалентных ОК (к О- и К- антигенам) сывороток, затем - адсорбированных О- сывороток и прогретыми при 100 градусах Цельсия (для разрушения К- антигенов) культурами.

Биохимическая дифференциация имеет дополнительное значение. Идентификация диареегенных типов возможна при выявлении специфических маркеров (энтерогеморрагические кишечные палочки не ферментируют сорбит, а серовар О157: Н7 не проявляет бета - глюкуронидазной активности).

Этапы бактериологи­ческого исследование кишечной коли-инфекции - см. таблицу 8.

 

Таблица 8. Бактериологическое исследование кишечной коли-инфекции

Этап исследования Ход исследования Результат
1-й Посев исследуемого материала на чашку Петри со средой Эндо На среде Эндо рост 1ас+ колоний
2-й Постановка ориентировочной реакции агглютинации на стекле lac+ колоний с поливалентным препаратом ОКА-сыворотки. Оставшуюся часть колонии, давшей положительную реакцию агглютинации засевают на скошенный агар для получения чистой культуры и в API 20 Е тест-систему или др. тест- системы При положительной реакции агглютинации отобранной колонии с ОКА-сывороточным препаратом делают предварительное заключение о принадлежности колонии к ЭПЭ
3-й Идентификации чистой культуры: а) изучение морфологических свойств в мазке окрашенном по Граму;: б) учет биохимического тестирования в) серологическая идентификация; 1. постановка ориентировочной реакции агглютинации на стекле с поливалентными ОКВ-, ОКС-. OKD- и ОКЕ-сыворотками; 2.постановка реакции агглютинации на стекле с каждой адсорбированной ОК- сывороткой, входящей в состав поливалентной сыворотки, давшей реакцию агглютинации; 3. постановка реакции агглютинации на стекле с адсорбированными групповыми и факторными О-сыворотками. В случае О-инагглютинабельности выделенную культуру прогревают при 100 С в течение 30 мин для разрушения К-антигена а) в поле зрения видны грамотрицательные короткие палочки с закругленными концами, расположенные беспорядочно; б) биохимические свойства, характерные для E.coli: в) 1. культура агглютинируется одной из поливалентных ОК- сывороточных препаратов, например ОКВ-сывороткой; 2. культура агглютинируется ОК-коли-сывороткой, при этом определяется К-антиген; 3. культура дает положительную реакцию агглютинации с групповой, адсорбированной коли-сывороткой
4-й Учет результатов идентификации и заключение по проведенному исследованию Заключение: из испражнении больного выделена Е.coli. серо- группы О, типичная по свойствам.

Исследуемый материал засевают на среду Эндо, предварительно разведя его физ. раствором. Через сутки изучают колонии, выросшие на среде. Кишечные палочки вырастают на среде Эндо в виде малиново-красных колоний с металлическим блеском или без него. При росте на этой среде кишечная палочка разлагает лактозу, образуются кислые продукты, они восстанавливают фуксин из бесцветного соединения в красный и поэтому вырастают колонии, окрашенные в малиново-красный цвет. Отбор ко­лоний патогенных кишечных палочек проводят с помощью ориентировоч­ной реакции агглютинации с диагностической сывороткой.

При отсутствии реакции агглютинации дают отрицательный ответ. При положительной реакции агглютинации необходимо подтвердить при­надлежность выделенной культуры к роду кишечных палочек. Для этого культуру засевают на жидкие среды Гисса с лактозой, глюкозой, маннитом, сахарозой, в пробирку с МПБ для обнаружения индола и серово­дорода, определяют подвижность.

 

Дата добавления: 2016-06-06 | Просмотры: 1177 | Нарушение авторских прав


1 | 2 | 3 | 4 |

При использовании материала ссылка на сайт medlec.org обязательна! (0.003 сек.)