АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология

Дополнительно: расчет эффективности трансформации

Вашей следующей задачей будет выяснить количественно насколько успешно вы трансформировали E. coli. Такая количественная оценка называется эффективностью трансформации.

Во многих экспериментах необходимо трансформировать как можно больше клеток. Например, при некоторых видах генной терапии у пациента забирают его клетки, трансформируют здоровыми генами в лаборатории,и имплантируют обратно. Чем больше клеток было трансформировано и стало способно вырабатывать нужный белок, тем лучше. Для того, чтобы определить насколько хорошо идет трансформация, рассчитывают эффективность трансформации.

Эффективность трансформации оценивается как общее число трансформированных клеток, деленное на количество ДНК,использованное для трансформации (число транформированных клеток на микрограмм ДНК)

Эффективность трансформации=

Как следствие, для того, чтобы посчитать эффективность, вам надо знать две вещи: количество колоний на чашке (например на чашке LB/amp/ara) и количество ДНК, приходящееся на одну чашку (в микрограммах)

1. Определите общее число трансформированных клеток

Предполагается,что каждая колония на чашке произошла из отдельной клетки. По мере того, как клетки делятся, их становится все больше и больше, и она образуют колонию. Самый прямой способ подсчитать общее количество клеток, которые получили плазмиду и выжили - это подсчитать число колоний на чашке.

Введите число здесь

1. Определите количество плазмидной ДНК, добавленной в клетки, нанесенные на чашку LB/amp/ara

Чтобы определить количество ДНК в расчете на одну чашку, нам надо знать две вещи: какое количество ДНК исходно было взято в эксперимент, и какая доля всей ДНК попала на одну чашку.

Когда вы определите эти числа, вы умножите общее количество ДНК на долю ДНК, приходящуюся на одну чашку и получите количество ДНК в расчете на одну чашку LB/amp/ara

Дата добавления: 2015-10-11 | Просмотры: 1413 | Нарушение авторских прав