Среды для идентификации вибрионов
Лактозо-сахарозная среда:
Готовят по следующей прописи:
1) пептон - 5 г (0,5%)
2) хлористый натрий - 5 г (0,5%)
3) лактоза - 10 г (1%)
4) сахароза - 1 г (0,1%)
5) агар-агар* - 10 г (1%)
6) индикатор Андреде - 40 мл (4%)
7) дистиллированная вода - 1 л
8) рН7,2-7,4
В холодную воду вносят пептон, хлористый натрий, агар - агар. Смесь подогревают до полного расплавления агар – агара, затем вносят лактозу и сахарозу, продолжают кипятить еще 5 мин. Смесь подщелачивают 20% раствором едкого натра до рН 7,4 – 7,6, добавляют индикатор Андреде. После этого, среду фильтруют через ватно – марлевый фильтр и разливают по 5-7 мл в стерильные пробирки и стерилизуют при давлении 0,5 атм. (1100) 20 минут. Готовую среду скашивают так, чтобы получить столбик и косячок (по типу Ресселя). Среда светлая.
Среда Ресселя: готовится как и лактозо-сахарозная среда, но вместо сахарозы берут глюкозу в том же количестве.
Среды Гисса:
Готовят по следующей прописи:
1) пептон - 10 г (1%)
2) хлористый натрий - 5 г (0,5%)
3) углевод - 5-10 г (0,5 – 1%)
4) дистиллированная вода - 1 л
5) индикатор Андраде - 10мл (1%)
6) или 1,6% спиртовый раствор бром-тимолового синего - 1 мл (0,1%)
7) или 0,4% раствор бром-тимолового синего - 1 мл (0,1%)
8) рН7,2-7,4
К 1% пептонной воде (рН 7,2-7,4) без нитрата калия (селитры) с 0,5% хлорида натрия добавляют 1% индикатора Андреде (или 1 мл 1,6%спиртового раствора бромтимолового синего, или 1 мл 0,4% раствора бром-тимолового синего. Среду разливают в пробирки с поплавком и стерилизуют при 0,5 атм. (1100) 20 минут или 3 дня подряд через равное время текучим паром по 30 мин.
Среда Хью-Лейфсона:
Готовят по следующей прописи:
1) агар – агар * - 3 г (0,3%)
2) пептон - 2 г (0,2%)
3) хлористый натрий - 5 г (0,5%)
4) двузамещенный фосфат калия - 0,3 г (0,03%)
5) глюкоза - 10 г (1%)
6) бромтимоловый синий - 0,03 г (0,003%)
7) дистиллированная вода - 1 л
8) рН 7,0-7,2
В холодную воду вносят пептон, хлористый натрий, агар - агар. Смесь подогревают до полного расплавления агар – агара, затем вносят фосфат калия и глюкозу, продолжают кипятить еще 5 минут. Смесь подщелачивают 20% раствором едкого натра до рН 7,4 – 7,6, добавляют индикатор бромтимоловый синий. После этого, среду фильтруют через ватно – марлевый фильтр и разливают по 4 - 5 мл в стерильные пробирки и стерилизуют при 0,5 атм. (1100) 20 минут.
*- количество агар – агара зависит от его сорта и качества. Поэтому, перед началом работы с новой партией агар – агара необходимо провести пробные варки для уточнения его количества, добавляемого в среду.
Дата добавления: 2014-12-11 | Просмотры: 1546 | Нарушение авторских прав
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
|