Направление на исследование проб из объектов окружающей среды и результат исследования на холеру
Организация, направившая материал ______________________________________________________
Дата забора материала__________________________________________________________________
Лаборатория ______________________________
| №№
пробы
| Наименование объекта
| Адрес объекта
(место взятия пробы)
| Время
взятия пробы
| t°C воды водоёма
| Заполняется в лаборатории
| | рН
воды
| время доставки
| время посева
на I п.в.
| № анализа
| Результат
|
Пробы доставил Пробы принял
Приложение 2
к методическим указаниям по лабораторной
диагностике холеры
Порядок забора и исследования материала
в зависимости от времени доставки его в лабораторию в 1% пептонной воде
(примерная схема)
| № варианта | Время взятия материала, | Время доставкив лабораторию | Среда для взятия проб | Назначение среды | 1-ая среда накопления | 2-ая среда накопления (высев с 1-ой п.в.*) | Высев со 2-ой среды накопления на щелочной агар | | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | |
| 6.00 –10.00 час | До 10.00 час | 1. 1% п.в. 50 мл - не более 3 ч. хранения2. 1% п.в. 5-10 мл | 1. Среда накопления2. Транспорт-ная среда | 1. Среда с доставлен-ным материалом 2. Посев1% п.в. в 50 мл | Через 6 ч инкубации пересев - 1% п.в. с Т.К.** и| высев на щелочной агар, Э.С.*** | В начале следующего рабочего дня | |
| 10.00 час до конца рабочего дня лаборатории | После 10.00 час в течение рабочего дня | 1% п.в.5-10 мл. | Транспортная среда | 5-10 мл среды с материалом в 50 мл 1% п.в. с Т.К. | 9.00 следующего дня пересев в 1% п.в. высев на щелочной агар, Э.С. | Через 6 ч инкубации | |
| По окончании рабочего дня лаборатории | До 10.00 час следующего дня | 1% п.в.5-10 мл | Транспортная среда | 5-10мл с материаломв 50 мл 1% п.в. | Через 6 ч инкубации пересев1% п.в. с Т.К. и высев на агар и/или Э.С. | В начале следующего рабочего дня | |
| Выходные дни лаборатории | До 10.00 час | 1% п.в. с Т.К. 50 мл | Транспортная среда | 5-10мл с материаломв 50 мл 1% п.в. | Через 6 ч инкубации пересев1% п.в. с Т.К. и высев на агар и/или Э.С. | В начале следующего рабочего дня | | | | | | | | | | | Обозначения: п.в. * пептонная вода;Т.К.** - теллурит калия;Э.С.*** - среда элективная для выделения холерного вибриона. Типовая форма графика работы с посевами*
| №
| Дата забора
| Обследуемый контингент
(объект)
| Время
| Подпись
| | Начало анализа
| Пересев
с I п.в.
| Пересев
с II п.в.
| |
|
|
|
|
|
|
| * - Заполняется лабораториями, выполняющими исследования в очаге холеры
Приложение 3
к методическим указаниям по лабораторной
диагностике холеры
Схема лабораторного исследования на холеру.
| Сокращенная схема идентификации
| - развернутая РА с сыворотками О1, Огава, Инаба, О139, RO;
| Полная схема идентификации
| | Биовар
| - проба с диагностическими фагами;
- группа по Хейбергу;
- гемагглютинация;
-чувствительность к полимиксину;
- гемолиз
|
Обозначения к « Схеме лабораторного исследования на холеру»:
МФА - метод флюоресцирующих антител;
D - материал из объектов окружающей среды засевают только в 1 п.в.;
ИФ - реакция иммобилизация вибрионов;
РПГА - реакция пассивной гемагглютинации;
I-II - среда накопления (1% п.в.);
ЩА - щелочной агар;
ОРА - ориентировочная реакция агглютинации;
ПУС - полиуглеводная среда;
ОП -оксидазная проба.
Приложение 4
к методическим указаниям по лабораторной
диагностике холеры
Метод отбора колоний вибрионов с помощью
стереоскопического микроскопа в косопроходящем свете (по Landy,1950).
К стереоскопическому МБС или МБС-1 приспосабливают устройство для получения узкого пучка света и зеркало для освещения чашки снизу под углом 45о. При этом колонии вибрионов по своей окраске заметно отличаются от других микроорганизмов. Чашки с посевами просматривают после 12-18 часов инкубации.
Цвет колоний, выросших на щелочном агаре при косо проходящем свете:
| Микроорганизмы
| Цвет колоний
| | Vibrio cholerae
| Преобладает светло-серый (с голубоватым и зеленым оттенком)
| | Salmonella
| Розовый
| | Shigella
| Розовый с фиолетовым оттенком
| | Escherichia coli
| Ярко-красный
| | Proteus vulgaris
| Красный с фиолетовым оттенком
| | Commomonas
| Голубой
|
Подозрительные колонии отсевают на лактозо-сахарозную среду.
Приложение 5
к методическим указаниям по лабораторной
диагностике холеры
Полное таксономическое определение вибрионов
| Таксономическая категория
| Таксоны О1
| Таксоны других представителей
| | Семейство
| Vibrionaceae
|
| | Роды
| Vibrio
| Aeromonas
Plesiomonas
Photobacterium
Lucibacterium
| | Виды
| Cholerae
| V. alginolyticus,
V. parahaemolyticus,
V. anguillarum,
V. cincinnatiensis,
V. carcharia, V. damsella, V. fluvialis, V. furnissii,
V. holisae, V. mimicus,
V. metschnicovii,
V. orientalis и др.
| | Серогруппа
| O1
| non O1;
(-О2-O139*
(по международной классификации – О2-О84)
|
| | Биовары серогруппы О1
| Cholerae
Eltor
| -
-
|
| | Серовары серогруппы О1
| Inaba
Ogawa
Hykoshima
| -
-
-
|
| *Типовые штаммы О2-О139, кроме О12, О23 и О26, соответствуют Sakazaki R., 1970, О40-О83 не изучены в сравнении с международной коллекцией; О84 соответствует О139 серогруппе.
Дифференциация Vibrio cholerae от родственных видов
| Тесты
| Vibrio
cholerae
| Aeromonas
| Plesio-monas
| Enterobacte-riaceae
| | Оксидаза
| +
| +
| +
| -
| | Декарбоксилаза лизина
| +
| -
| +
| +/-
| | Декарбоксилаза орнитина*
| +
| -
| +
| +/-
| | Дигидролаза аргинина
| -
| +/-
| +
| +/-
| | Образование индола
| +
| -
| -
| +/-
| | Протеолитическая активность
| +
| +
| -
| +/-
| | Расщепление глюкозы:
|
|
|
|
| | Окисление
| +
| +
| -
| +
| | Ферментация
| +
| +(газ +/-)
| -
| +/-(газ +/-)
| | Ферментация с образованием кислоты:
|
|
|
|
| | Маннит
| +
| +
| -
| +/-
| | Арабиноза
| -
| +/-
| -
| +/-
| | Инозит
| -
| -
| +
| -
| *при отсутствии орнитина можно ограничиться только тестами с лизином и аргинином.
Приложение 6
к методическим указаниям по лабораторной
диагностике холеры
Группы ферментативной активности холерных вибрионов
| Группы по Хейбергу
| Манноза
| Сахароза
| Арабиноза
| |
| +
| +
| -
| |
| -
| +
| -
| |
| +
| +
| +
| |
| -
| +
| +
| |
| +
| -
| -
| |
| -
| -
| -
| |
| +
| -
| +
| |
| -
| -
| +
|
Приложение 7
к методическим указаниям по лабораторной
диагностике холеры
Идентификация выделенных культур холерного вибриона
| Тесты
| Vibrio cholerae
| | classica
| Eltor
| O139
| non O1
| | 1. 1
| Подвижность
| Вибрион подвижный (1 жгутик)
| | 2. 2
| Окраска по Грамму
| Грамотрицательная
| | 3. 3
| Морфология
| Нежная, слегка изогнутая палочка
| | 4. 4
| Культуральные свойства
| Растет как на обычных, так и на щелочных средах, колонии гладкие, прозрачные
| | 5. 5
| Ферментация маннозы
| +
| +
| +
| +/-
| | 6. 6
| Ферментация сахарозы
| +
| +
| +
| +/-
| | 7. 7
| Ферментация арабинозы
| -
| -
| -
| +/-
| | 8. 8
| Группы по Хейбергу
| только 1
| 1-8
| | 9. 9
| Агглютинабельность
О-холерной сывороткой
| +
| +
| -
| -
| | 10. 10
| Агглютинабельность
Холерной сывороткой Огава
| +
| +
| -
| -
| | 11. 11
| Агглютинабельность
Холерной сывороткой Инаба
| +
| +
| -
| -
| | 12. 12
| Агглютинабельность
Холерной сывороткой О139
| -
| -
| +
| -
| | 13. 13
| Чувствительность к холерному бактериофагу С
| +
| -
| -
| -
| | 14. 14
| Чувствительность к холерному бактериофагу Эльтор
| -
| +
| -
| +/-
| | 15. 15
| Чувствительность к 50 ед./мл полимиксина
| +
| -
| -
| -
| | 16. 16
| Агглютинация эритроцитов курицы
| -
| +
| +
| +
| | 17. 17
| Реакция Фогес-Проскауэра
| -
| +
| +
| +/-
| | 18. 18
| Гемолиз эритроцитов барана
| -
| +/-
| -
| +/-
|
Приложение 8
к методическим указаниям по лабораторной
диагностике холеры
Таблица 6. Признаки, дифференцирующие биовары V. cholerae О1
| Признаки
| Биовары V. cholerae О1
| | cholerae
| eltor
| | Лизабельность монофагами: Классическим
| +
| -
| | Эльтор
| -
| +
| | Чувствительность к 50 ед./мл полимиксина В
| +
| -(+)
| | Агглютинация эритроцитов курицы (морской свинки)
| -
| +(-)
| | Образование ацетилметилкарбинола
| -
| +-
|
Приложение 9
к методическим указаниям по лабораторной
диагностике холеры
Схема фаготипирования холерных вибрионов О1 серогруппы
| Фаготип
| Чувствительность к типирующим фагам
| |
|
|
|
|
|
|
| |
| +
| +
| +
| -
| -
| -
| +
| |
| -
| +
| +
| -
| -
| -
| +
| |
| +
| -
| +
| -
| -
| -
| +
| |
| -
| -
| +
| -
| -
| -
| +
| |
| +
| +
| +
| -
| -
| -
| -
| |
| +
| +
| +
| -
| -
| +
| +
| |
| +
| -
| +
| -
| -
| +
| +(-)
| |
| -
| +
| +
| -
| -
| +
| +(-)
| |
| +
| -
| +
| +
| -
| +
| +(-)
| |
| +
| -
| -
| +
| -
| +
| +(-)
| |
| -
| -
| -
| +
| +
| -
| +(-)
| |
| -
| -
| +
| +
| -
| -
| +(-)
| |
| -
| -
| -
| +
| +
| +
| +(-)
| |
| -
| -
| -
| +
| -
| +
| +(-)
| |
| -
| -
| -
| +
| -
| -
| +(-)
| |
| -
| -
| -
| -
| -
| -
| +(-)
| |
| -
| -
| +
| -
| -
| -
| -
| |
| +
| -
| +
| +
| -
| -
| -
| |
| -
| -
| -
| -
| -
| -
| +
| | | | | | | | | | | |
Схема фаготипирования энтеропатогенных (non O1 серогруппы) вибрионов
| Фаготипы вибрионов
| Типирующие фаги
| | ТЭПВ-1
| ТЭПВ-2
| ТЭПВ-3
| ТЭПВ-4
| ТЭПВ-5
| ТЭПВ-6
| ТЭПВ-7
| |
| +
| -
| -
| -
| -
| -
| -
| |
| -
| +
| -
| -
| -
| -
| -
| |
| -
| -
| +
| -
| -
| -
| -
| |
| -
| -
| -
| +
| -
| -
| -
| |
| -
| -
| -
| -
| +
| -
| -
| |
| -
| -
| -
| -
| -
| +
| -
| |
| -
| -
| -
| -
| -
| -
| +
|
Приложение 10
к методическим указаниям по лабораторной
диагностике холеры
Сведения о работе лаборатории в очаге холеры
| № п/п
| Вид исследования
| За
| за время работы
в очаге
| | (дата)
| |
| Больные из холерного госпиталя (лиц/анализов) выделено: холерных вибрионов О1
О139
non О1
возбудителей ОКИ
|
|
| |
| Контактные (лиц/анализов) выделено:
холерных вибрионов О1
О139
non О1
возбудителей ОКИ
|
|
| |
| Провизорные больные (лиц/анализов) выделено:
холерных вибрионов О1
О139
non О1
возбудителей ОКИ
|
|
| |
| Группы риска (лиц/анализов) выделено:
холерных вибрионов О1
О139
non О1
возбудителей ОКИ
|
|
| | 5.
| Пробы воды открытых водоёмов выделено: холерных вибрионов О1
О139
non О1
|
|
| | 6.
| Проб сточных вод выделено: холерных вибрионов О1
О139
non О1
|
|
| | 7.
| Смывы с объектов окружающей среды (проб) выделено:
холерных вибрионов О1
О139
non О1
|
|
| |
| Проб пищевых продуктов выделено:
холерных вибрионов О1
non О1
|
|
| |
|
| | 9.
| Другие объекты (проб) выделено: холерных вибрионов О1
не О1
|
|
| |
| Всего выполнено анализов, выделено:
холерных вибрионов О1
О139
non О1
возбудителей ОКИ
|
|
| | | | | | |
Зав. лабораторией ___________“___ ” ___________ 20___ г.
Приложение 11
к методическим указаниям
по лабораторной
диагностике холеры
Журнал регистрации материала от людей при исследовании на холеру
| №
пп
| № анализа
| Ф.И.О.
| Возраст
| Место работы, должность
| Место жительства
| Организация, направляющая анализ
| Контингент или диагноз
| Анализ первичный или повторный
| Дата и часы
| Исследуемый материал
| Результат
| Дата направления ответа
| Ф.И 0.
врача и подпись
| | взятия пробы
| приём анализа
| |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
| |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Журнал регистрации материала из объектов внешней среды при исследовании на наличие возбудителя холеры
| №
пп
| № анализа
| Организация, направившая анализ
| Наименование объекта исследования
| Адрес объекта
| Дата и время
| t°C воды
| рН
воды
| Время (часы)
| Результат исследования на холеру
| Дата выдачи ответа
| Ф.И. 0.
врача и подпись
| | взятия пробы
| приёма пробы
| посева на 1-ю п.в.
| пересева на 2-ю п.в.
| высева со 2-ой п.в.
| |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
| |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Журнал учета автоклавирования
| Дата
| № автоклава
| Наименование материала
| Назначение (обеззараживание, стерилизация)
| Время включения
| Заданное давление
| Время установления заданного давления
| Время выключения
| Контроль обеззараживания
| Подпись автоклавера
| | дата
| метод
| результат
| |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
| |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Приложение 12
к методическим указаниям по лабораторной
диагностике холеры
Дата добавления: 2014-12-11 | Просмотры: 1527 | Нарушение авторских прав
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
|
