АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология

Направление и результат исследования материала на наличие возбудителя холеры

Прочитайте:
  1. A- Выбор материала и технику получения оттиска
  2. A- Из медицинского гипса с несъёмными культями из этого же материала
  3. F19 Психические и поведенческие расстройства в результате сочетанного употребления наркотиков и использования других психоактивных веществ
  4. I. Наличие асимметрии лица, губ, щек, углов рта, носа, области тела, челюстей.
  5. II) Методы исследования и симптомы поражения III, IV, VI пары ЧН
  6. II. Оформлення результатів дослідження
  7. III. Данные объективного исследования
  8. III. Данные объективного исследования.
  9. III. По изменению генетического материала мутации подразделяют на следующие: генные, хромосомные перестройки, геномные.
  10. IX.3. Профилактика и лечение, направление к специалистам и дальнейшее наблюдение

Для этого производится забор пищевых продуктов, рвотных масс, промывных вод. испражнений на бактериологические исследования.

общавшиеся в очаге в течение 2 суток после выявления больного подвергаются однократному бактериологическому обследованию на носительство (испражне­ния, моча).

при подозрении распространения инфекции из какого-либо пищевого объекта, данный объект временно закрывается, реализация его продукции запрещается, с оборудования, посуды и других предметов делают смывы на обнаружение сальмонелл, проводится тщательная уборка и мытьё оборудования с примене­нием дезсредств.

Для предупреждения заболеваний сальмонеллезами в мед.учреждениях и больни­цах предусматриваются основные положения:

при поступлении детей в возрасте до 3 лет, состоящих на диспансерном учете по кишечным инфекциям, в детские соматические стационары обеспечить их изоляцию в диагностические палаты;

в районных и участковых больницах, где не могут быть выделены диагностиче­ские палаты, предусмотреть возможность перепрофилирования других отделе­ний, с целью избежать перегрузки;

усилить наблюдение за людьми с повышенным риском заболевания (контроль санитарного режима, режим питания, санитарно-просветительная работа: расширить показания к бактериологическому обследованию детей и взрослых с повышенным риском заболевания;

расширить показания к бактериологическому обследованию беременных жен­щин и других взрослых, имеющих нарушение деятельности кишечника; у рожениц, перенесших острые кишечные заболевания в течение 3-х месяцев до родов, роды принимать в обсервационном отделении;

доноров грудного молока в родильных домах формировать из числа родильниц, не болевших сальмонеллезом в течение 3-х месяцев до родов и обследованных бактериологически;

предусмотреть в каждом родильном отделении специально оборудованный пункт сбора, разлива и пастеризации грудного молока, с закрепленным за ним медработником.

Мероприятия, направленные на предупреждение заноса инфекции в стационары и возникновение госпитальных сальмонеллезов:

раннее выявление и изоляция больных сальмонеллезом (контроль за состоянием стула ребенка);

своевременное бактериологическое обследование больных при появлении первых признаков заболевания желудка и кишечника;

полное использование методов диагностики, в том числе серологических ис­следований и метода гемокультуры;

рациональное, своевременное (курс применение антибиотиков (сальмонеллы могут приобретать устойчивость к антибиотику в течение одного курса лечения);

своевременно начатые и полно проведенные противоэпидемические мероприя­тия в связи со своевременной информацией о первых случаях заболевания и но другим причинам;

соблюдение санитарно-гигиенического и противоэпидемического режима в стационарах, правил уборки помещений, сбора, хранения, обеззараживания и стирки белья;

прекращение свободного общения больных между собой, переводы из палаты в палату или из отделения в другое отделение только строго обоснованные (по эпидемиологическим показаниям);

при наличии в лечебных учреждениях достаточного числа помещений, необходимых для изоляции выявленных больных (боксы, изоляторы и т.д.); санитарно-просветительская работа с госпитализированными и обслуживающим персоналом.

Приложение № 8

Классификация семейства Vibrionaceae

Род Aeromonas

Род Plesiomonas

Род Photobacterium

Род Vibrio

Род Vibrio

а) Вид V.cholerae 01 (2 биовара: классический и Эль-Тор)

б) Вид V.cholerae не 01 (от 02 до 0139, НАГ, RО)

в) Виды: V.metschnikovii V.vulnificus

V.harveyi V.marinus

V.parahaemolyticus V.minicus

V.alginolyticus и другие – всего 34 вида.

Возбудителями холеры являются вибрионы 01 и 0139 групп.

Остальные вибрионы вызывают острые кишечные инфекции типа гастроэнтеритов и раневые инфекции, отдельные виды – например, V.vulnificus, - септицемии, раневые инфекции, пневмонии, эндометриты, V.alginolyticus - ОКИ, отиты, раневые инфекции.

 

 

Основные дифференциальные признаки возбудителей холеры

№ п/п Признаки Азиатика Эль-Тор Серовар 0139
1. Р. Фогес-Проскауэра ± (чаще -) ± (чаще +) ± (чаще +)
2. Чувствительность к полимиксину В + - Ж -
3. Гемолиз эритроцитов барана - + -
4. Агглютинация куриных эритроцитов - ± (чаще +) ± (чаще +)
5. Чувствительность к классическому монофагу + - -
6. Чувствительность к монофагу Эль-Тор - + -
7. Гексаминовый тест - + -

 

Реакция Фогес-Проскауэра: В среду Кларка засеваем культуру, затем добавляем креатинин (альфа-нафтол с КОН) – в положительном случае бульон окрашивается в розовый цвет.

Среда Кларка: МПБ + 1 % глюкозы + К2НРО4. При ферментации глюкозофосфатного бульона Кларка (глюкозы) микробами образуется ацетилметилкарбинол (ацетоны), окрашивающий среду в красный цвет при взаимодействии с креатинином (альфа-нафтол с едким калием).

Тест на оксидазную активность: Оксидаза окисляет фенилендиамин,

что приводит к появлению синего окрашивания. 1 каплю 1% раствора параминодиметиланилина (гидрохлорида или оксалата) наносят на поверхность 18-часовой агаровой культуры в чашке Петри + 1 каплю 1% спиртового раствора альфа-нафтола. В положительных случаях через 1-3 минуты получаем синее окрашивание.

Гексаминовый тест: Берем глюкозо-гексаминовую среду 1% раствор гексамина (уротропина) в 100 мл МПБ + 1% глюкозы + индикатор бромтимоловый синий (исходный цвет среды зеленоватый) + засеваем культуру. Вибрион Эль-Тор через 6-8 часов окрашивает среду в желтый цвет, истинный холерный вибрион цвет среды не изменяет.

 

Развернутая дифференциальная характеристика

холерных 01 и основных видов холерных не 01 вибрионов

 

№ п/п Признаки Холерный вибрион Эль-Тор 0-139 не 01 вибр. НАГ не 01 вибр.
1. Рост на 1% п.в. Равномерное помутнение, пленка на поверхности серовато-голубоватые, гладкие, диаметр 1-1,5 мм и более. Серо-голубые, синевато-зеленые, могут быть в центре красноватые, розоватые. Встречаются колонии с ярко-красным центром и прозрачным синевато-голубоватым краем. Колонии не играют, не сверкают, цвет приглушен. Грам отрицательные палочки полиморфные, прямые и изогнутые.
2. Морфология колоний на щелочном агаре
3. Морфология колоний в косопроходящем свете
4. Морфология микроба в мазках по Граму
5. Подвижность + + + +
6. Среда Клиглера (двухсахарная) столбик/косяк к/- к/- к/- к/- (столбик желтый)
7. Глюкоза к к к К
8. Лактоза - - - -
9. Маннит к к к к
10. Сахароза к к к ±
11. Манноза к к к ±
12. Арабиноза - - - ±
13. Инозит - - - -
14. H2S - - - -
15. Индол + + + +
16. Диастаза + + + + на крахмал
17. Желатиноза + + + +
    Воронкообразное через 48-72 часа
18. Оксидаза + + + +
19. Лецитиназа ± ± ± ±
20. Гемотоксин - - ± + - (+) + ± проба ± Грейга
21. Агглютинация с Инаба, Огава АТ + + - -
  В зависимости от серовара - -
c RO - ± - -
22. Люминесцентное свечение ххх ххх - -
23. Чувствительность к бактериофагам-классическим + - - -
Эль-Тор - + - - (+)
ХДФ 3, 4, 5 - ± - - (+)
           
24. Тест Хью-Лейфсона (расщеплен. глюкозы в аэроб/анаэроб.усл.) к/к к/к к/к к/к
25. Аргинин-дегидролаза - - - -
26. Лизин-декарбоксилаза + + + +
27. Орнитин-декарбоксилаза + + (-) + + (-)
28. Чувствительность к полимиксину (30 ед.) + - - -
29. РА с холерной агглютинирующей сывороткой 0-139 - - + -
30. Р. Фогес-Проскауэра - + + +
31. Среда Олькеницкого к/к к/к к/к к/к
32. Среда Ресселя к/- к/- к/- к/-
33. Наличие полисахаридной капсулы - - + -

 

 

Чувствительность холерных вибрионов и 0139 к антибактериальным препаратам

Асплоксацин

Офлоксацин

Цефотаксин

Ципрофлоксацин

Гентамицин

Левомицитин

Рафампецитин

Доксициклин

Тетрациклин

Стрептомицин

Ампициллин

Фуразомидон %

0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100

 

 

Приложение №9

 

СХЕМА

бактериологического исследования (начальный этап)

Материал

 
 


1.Рвотные массы 4.Кровь 6.Отделяемое ран

2.Промывные воды желудка (дефибриниров.)

3.Испражнения 5.Спинномозговая жидкость

1-2г или мл

первая среда

обогащения 1 мл

50 мл 1% п.в. Э.С.

Щ.А.М. с 1,5% NaCl

1-й день через 6-8 часов через 6-8 часов

исследования инкубации при инкубации при

37оС 9 мл 37оС п.в.

МПБ с с 1,5%

1,5% NaCl NaCl

Э.С.

       
   
 
 


вторая среда

обогащения

10 мл 1% п.в. Щ.А.М.

Щ.А.М. Щ.А.М.

 
 


вторая среда

обогащения

1% п.в. с

1,5% NaCl

__________________________________________________________________

 

 
 


1-й день 1. Посев на щелочной агар (Щ.А.М.) и на одну элективную среду

(Э.С.)

2-й день 2. Отбор колоний, подозрительных на вибрионы с посевов

предыдущего дня:

а) подозрительные на холерные вибрионы колонии агглютинируют холерными 01, RО и 0139 сыворотками; при

положительных результатах проводят исследования, направленные на выделение и идентификацию возбудителя холеры.

б) подозрительные на холерные не 01 группы и др.виды вибрионов колонии на щелочном агаре и элективной среде отсеивают одной петлей на среду Ресселя и в 1% пептоновую воду без NaCl и с 5-10 % NaCl.

3-й день 1. Изучение посевов со 2-го пептона и выделение подозрительных

колоний (культур) проводят так же, как и с 1-го пептона.

2. Учет роста культур в 1% пептонной воде без NaСl и на среде

Ресселя.

3. Постановка пробы на индофенолоксидазу с культурой со среды Ресселя и реакция агглютинации с холерным 01 и 0139 сыворотками на стекле с культурами, выросшими в 1% п.в. без NaCl и давшие характерные изменения на среде Ресселя.

4. Изучение морфологии клеток в мазках, окрашенных по Граму.

5. Посев отобранных культур (галофильных вибрионов) в дифференциально-диагностические среды, содержащие 1,5% NaCl.

6. Определение чувствительности культур к вибриостатику 0/129.

4-й день 1. Учет результатов тестов идентификации. Определение вида выделенных культур вибрионов.

2. Идентификация культур, выделенных со второго пептона.

5-й день Учет результатов исследования. Выдача ответа (окончательного).

__________________________________________________________________

 

Примечание: в связи с высокой энергией роста холерных вибрионов учет результатов на каждом этапе проводят несколько раз, через 4-8 часов.

 

Приложение №10

 

Ускоренный метод диагностики холеры

Вид: Микроскопическое изучение Кал, рвотные массы, желчь,

(рисового отвара)

 

I этап:

 

           
     

 

 


Грам «-» вибрионы Раздавленная капля Иммунофлюоресценция

Подвижность РИФ, РНИФ

 

 

Посев на комплект сред:

                   
         


Б/фаг

Мукарджи IV

       
 
   
 

 


Пептон 1% пепт. 1% пепт. 5% кров. Щелочной МПА с

1% вода вода + вода + МПА с дисками антибиотиков

01 сывор. 0,5% эритроцитами (полимиксин) и б/фагом

крахмала барана

 

 

II этап: Учет по принципу I этапа каждые 4-6 часов в течение суток.

 
 

 


 

Пленчатый рост Агглютинат 01 При добавлении Гемолиз Индивид. рез-ты

Грам «-» вибрион вибриона йода: V.eltor Х.в. – чувств к

Подвижны Нет его – при Нет синевы при Нет его - полимиксину и

не 01 вибрионах х.в. 01 холерный б/фагу;

Синева – при вибрион Эль-Тор – нет

вибр. Эль-Тор.

 

За сутки этим методом можно получить окончательные результаты

 

 

Экспресс-методы диагностики вибрионов

 

1. Люминесцентно-серологический (РИФ, РНИФ).

2. Иммобилизация вибрионов типовыми сыворотками.

3. Иммобилизация вибрионов типовыми бактериофагами.

4. Развернутая реакция агглютинации в бульоне.

5. Метод микроагглютинации материала.

6. Выявление вибрионов в воде реакцией агглютинации.

7. Исследование воды путем подращивания на мембранных фильтрах с помощью люминесцентной микроскопии.

 

Особенности иммунолюминисцентной диагностики холеры –

РИФ и РНИФ

РИФ – реакция прямой иммуно-флюоресценции при холере ставится по классической методике путем микроскопического выявления возбудителя в зафиксированном и обработанном ФИТЦ – препаратом мазке. Эта особенность (обязательная фиксация) связана с эпидемической опасностью работы с ООИ.

РНИФ – непрямая реакция иммунофлюоресценции ставится в случае отсутствия меченой ФИТЦ противохолерной иммунной сыворотки, но при наличии специфической не меченой и меченой противоиммуноглобулиновой видовой к белкам того вида животного, который использован для получения иммунных противохолерных антител. Эта реакция разработана Кунсом. Она выявляет антитела к Ig в иммунной сыворотке, среагировавшие в мазке с возбудителем.

 

 

Приложение №11

Питательные среды

 

I. Жидкие среды обогащения:

1. 1% пептонная вода.

2. Пептонная вода с теллуритом калия.

 

II. Плотные среды:

1. Щелочной агар (рН = 8-8,2).

2. Щелочной агар с теллуритом калия.

3. Желточно-солевой агар (ЖАС).

4. Среда Дьедонне (щелочной МПА с дефибринированной кровью быка или барана).

5. Среда Монсура (таурохолат-теллуритовая).

6. Среда Аронсона (щелочной агар с сахарозой, сернокислым натрием, фуксином). Холерные вибрионы дают розовые колонии.

7. Среда Оттоленги (щелочной МПБ с бычьей желчью).

8. Теллурит-калиевая среда.

9. Висмут-сульфитная среда Рида.

10. Висмут-сульфитная среда с маннозой Вильсона и Рейли, рН-8,8.

 

III. Консервирующие среды:

1. Среда Венкатрамена и Рамакришнона (щелочной бульон с морской солью).

2. 2% раствор поваренной соли (морская соль).

3. 1% пептонная вода.

 

 

Приложение №12

 

Фаготипирование холерными диагностическими бактериофагами ХДФ холерных вибрионов Эль-Тор с одновременной дифференциацией их патогенности

 

Серотип Вирулентность Чувствительность к монофагам Гемолиз эритроцитов барана
ХДФ-3 ХДФ-4 ХДФ-5
Огава, Гикошима Высокая + + - + + + + - + - + + - - - -
Слабая + + + - + + - - + - + + + + +(-) +(-)
Авирулентные - + - - - + - - - +(-) +(-) +(-)
Инаба Высокая + + - - + + + + - - + - + + - - - - - -
Слабая + + - + - + + + + - - - + - + + + - + + + + + +
Авирулентные - - - + - - +(-) +(-)

Примечание: ХДФ – холерный диагностический фаг.

 

Фаготипирование энтеротоксигенных неагглютинирующих вибрионов (НАГ) не 01 группы типовыми бактериями ТЭПВ к энтеропатогенным вибрионам

 

Фаготипы вибрионов НАГ Типирующие фаги
ТЭПВ - 1 ТЭПВ - 2 ТЭПВ - 3 ТЭПВ - 4 ТЭПВ - 5 ТЭПВ - 6 ТЭПВ - 7
  +            
    +          
      +        
        +      
          +    
            +  
              +

 

Примечание: ТЭПВ – типовые фаги к энтеропатогенным вибрионам НАГ. Типируют методом агаровых слоев.

Методика: испытуемую культуру засевают в пробирку с 4 мл МПБ, инкубируют при + 37о С в течение 3 часов. Затем 0,3 мл бульонной культуры вносят в пробирку с 4 мл. 0,7% расплавленного и остуженного до + 45оС МПА, перемешивают и выливают вторым тонким слоем в стерильную чашку с первым застывшим слоем 2% МПА, после этого на поверхность МПА петлей или каплей из пипетки наносят типовые бактериофаги в цельном виде, а при необходимости – в разведении от 10-1 до 10-4. Каплям фага дают подсохнуть, впитаться, после чего пробы помещают в термостат при +37оС на 4-18 часов. Контроль – физ.раствор.

Учет результатов ведут при наличии стерильных пятен в связи с лизисом чувствительных к фагу культур. В контроле и при нечувствительности культуры лизиса нет.

Ускоренный метод. Из подготовленной бульонной культуры делают штриховой высев на 8 секторов МПА, а сверху наносят бактериофаг. Режим инкубации и учет результатов те же.

 

 

Приложение №13

 

Характеристика генетической основы патогенности

 

Кассета генов патогенности в хромосоме холерных вибрионов 01 Реализация кассеты в тестах
Vct+ ген патогенности - токсигенность Vct (in vitro, in vivo)
TOX’T ген-код синтеза токсического белка - гемотоксин “Haem-tox 01” к бараньим эритроцитам
CT+ синтез токсигена, реализует - патогенность для крольчат в
TCP+ токсиноиндуцирующие пили изолированной клетке
адгезии для CTXф - агглютинация куриных эритроцитов
CTXф - переносчик Vct+  
Кассета холерных свободно живущих вибрионов не 01  
TOX R – передавемый код  
tep A – кодирует и реализует TCP с помощью восприимчивого организма.  

 

Приложение №14

 

Галофильные вибрионы

К патогенным для человека вибрионам, кроме возбудителей холеры, относятся морские галофильные вибрионы, вызывающие пищевые отравления, связанные с употреблением в пищу продуктов моря, холеро- и дизентериеподобные заболевания, септицемии, раневые инфекции.

К ним относятся: V.parahaemolyticus, V.alginolyticus, V.vulnificus, V.minicus и др. Они инфицируют человека алиментарно-энтеральным и контактным (с морской водой) путями.

 

Основные свойства некоторых морских галофильных и не галофильных вибрионов, патогенных для человека

Признаки V.parahaemoly ticus V.alginaly ticus V.vulnifi cus V.mimi cus
Наличие индофенолоксидазы + + + + ± ± + +
Лизиндекарбоксилаза + + + +
Орнитиндекарбоксилаза - - - -
Аргининдегидролаза - - - +
Рост в 1% п.в. без NaCl с 3% NaCl + + + + + +т + +
Ферментация глюкозы без газа - - + -
Лактозы - + - -
Сахарозы + + + +
Маннозы +,- -,+ - т -
Арабинозы + + +,- +
Маннита + + + +
Мальтозы + + + +
Крахмала - - - -
Инозита        
Образование ацетил-метил - + - -
карбинола + + + +
индола - - - -
сероводорода + + + +
лецитиназы - - - -
уреазы + + + +
Редукция NO3 в NO2 + + + +
Подвижность        

 

Направление и результат исследования материала на наличие возбудителя холеры

 

Ф.И.О. ___________

Возраст __________

Адрес___________

Место работы ______

Диагноз __________

Дата и время взятия пробы _______

Первичный или повторный _______

Применение антибиотиков ________

Направляющая организация_______

Подпись направившего материал _______


Дата добавления: 2014-12-11 | Просмотры: 1600 | Нарушение авторских прав



1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |



При использовании материала ссылка на сайт medlec.org обязательна! (0.037 сек.)