АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология

Визначення груп крові за допомогою моноклональних антитіл

Моноклональні анти-А і анти-В антитіла продукуються дво­ма відмінними гібридомами. Цоліклони анти-А і анти-В - це розведена рідина мишей-носіїв відповідної гібридоми, в якій містяться специфічні імуноглобуліни класу М проти групоспецифічних антигенів А і В людини. Цоліклони не містять ан­титіл іншої специфічності й тому не викликають неспе­цифічної поліаглютинації еритроцитів.

Визначення групи крові проводиться у приміщенні з хоро­шим освітленням при температурі від +15°С до +25°С. Реагенти не повинні зберігатися відкритими з огляду на те, що при висиханні активність антитіл знижується. Не слід ко­ристуватися реагентами, якщо в них наявні помутніння або пластівці. Для кожного реагента використовують свою промар­ковану піпетку.

Враховуючи високу активність і авідність реагентів цолі­клон, а також повну їх стандартність, для кожного визначення групи крові достатньо застосовувати по одній серії реагентів анти-А і анти-В. На планшетку або пластинку наносять цолі­клони анти-А і анти-В по одній великій краплі (0,1 мл) під відповідними написами: анти-А і анти-В. Поряд з краплями наносять досліджувану кров по одній маленькій краплі, при­близно у 10 разів меншій (0,01 мл). Спостереження за ходом реакції з цоліклонами проводять при легкому похитуванні пластинки чи план­шетки не довше як 2,5 хв. Результат реакції у кожній краплі може бути позитивним (аглютинація) або від'ємним. Аглютинати видно неозброєним оком у вигляді дрібних червоних аг­регатів, що швидко зливаються і утворюють крупні пластівці аж до одного великого аглютината. При від'ємній реакції крап­ля залишається рівномірно зафарбованою в червоний колір, аглютинати в ній не визначаються. Якщо аглютинації нема ні з цоліклоном анти-А, ні з цоліклоном анти-В, то досліджувані еритроцити не містять антигенів А і В, а тому кров належить до групи 0(І). Аглютинація спостерігається тільки з цоліклоном ан­ти-А, отже досліджувані еритроцити містять тільки антиген А і кров належить до групи А(ІІ). Аглютинація спостерігається тільки з цоліклоном ан­ти-В, отже досліджувані еритроцити містять тільки антиген В і кров належить до групи В(Ш). Аглютинація спостерігається як з цоліклоном анти-А, так і з цоліклоном анти-В, отже досліджувані еритроцити містять обидва антигени А і В, тому кров належить до групи АВ(ІУ).

Форма випуску. Цоліклони анти-А і анти-В в рідкій формі випускаються у флаконах або в ампулах, в яких, крім реагента, містяться також консервант (0,1% розчин азиду натрію) і відповідний барвник. Цоліклони анти-А (рожевого кольору) і анти-В (синього кольору) випускаються у флаконах або ампулах по 20, 50, 100 або 200 доз.

Термін зберігання - 2 роки в холодильнику при темпера­турі від +2°С до +8°С. Можуть зберігатися впродовж одного місяця в темному приміщенні при температурі від 10°С до +25°С і відносній вологості 65+15 % (при температурі +25°С).

Дата добавления: 2015-08-06 | Просмотры: 606 | Нарушение авторских прав