Получение стандартных гемагглютинирующих сывороток для определения групп крови – процесс трудоемкий и дорогостоящий: титр природных антител к агглютиногенам А и В невысок, активность недостаточна для выявления агглютиногенов, особенно слабых их разновидностей, а качество их настолько низко, что приходится использовать две серии стандартов.
Одним из способов решения этого вопроса является использование гибридомной биотехнологии. Гибридома – это клеточный гибрид, образованный путем слияния клетки опухоли костного мозга (миеломы) с иммунным лимфоцитом. Эта гибридома приобретает свойства обоих «родителей», а именно: способность к неограниченному росту, характерную для опухолевой клетки, и возможность синтезировать антитела двух видов – антитела А и В. Вот их и используют для определения групп крови вместо традиционных гемагглютинирующих сывороток. Причем реагенты берут одной серии.
Цоликлоны выпускаются в жидкой форме во флаконах объемом 5 – 10 мл. (рис. 27).
Цоликлон анти – А – красного цвета
анти – В – синего
анти АВ – бесцветный
Метод определения групп крови МКА (моноклональными антителами) удобен и прост: на планшет наносят по одной капле цоликлонов анти-А и анти-В под соответствующими надписями. В них стеклянными палочками в соотношении 1:10 вносят исследуемую кровь. За ходом реакции наблюдают при легком покачивании в течение 2,5 – 3 мин.
· Отсутствие агглютинации в обеих каплях означает отсутствие агглютиногенов А и В, следовательно, кровь 0 (I) группы.
· Наличие агглютинации с цоликлоном анти-А означает содержание в крови агглютиногена А и кровь А(II) группы
· Агглютинация только в капле с цоликлоном анти-В означает содержание в крови агглютиногена В, следовательно, кровь В(III) группы
· При положительной реакции агглютинации в обеих каплях исследуемая
кровь принадлежит IV группе, так как содержит агглютиногены А и В.
Метод чрезвычайно демонстративен и по технике ничем не отличается от определения групп крови стандартными сыворотками, он доступен каждому медработнику.