АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология

Аннотация и методика проведения лабораторных работ. Работа № 1. Определение содержания гемоглобина в крови по методу Сали

Работа № 1. Определение содержания гемоглобина в крови по методу Сали.

Гемоглобин - сложный белок, хромопротеид. Он находится в эритроцитах и составляет 90% их сухого остатка. В крови человека гемоглобина содержится в среднем 140 г/л: у женщин - 120-140 г/л, у мужчин­-130-150 г/л, у новорожденных 180-235 г/л.

Определение содержания гемоглобина производят колориметрическим способом в приборе - гемоглобинометре Сали (гемометре). Гемометр Сали представляет собой черный штатив, заднюю стенку которого составляет матовое стекло. В штативе имеется 3 пробирки. Средняя пробирка градуирована и служит для исследования крови, две крайние запаяны и содержат стандартный раствор солянокислого гематина. К гемометру приложена капиллярная пипетка (с меткой 0,02мл.).

Стандартный раствор приготовлен следующим образом: к 0,2 мл 0,1 N раствора HCl добавляется 0,02мл крови,содержащей 166,7г/л. гемоглобина. Затем объем раствора добавлением дистиллированной воды доводится до 2 мл. Такое содержание гемоглобина считается высшим пределом нормы и принимается за 100% относительного содержания по Сали.

Проведение работы: В среднюю пробирку гемометра наливают 0,1 N раствор НCl до нижней кольцевой метки (соответствует 0,2 мл 0,1 N раствора HCl). Затем из пальца обычным способом набирают кровь в капилляр до метки (0,02 мл крови), и обтерев кончик пипетки протир. HCl ватой, выдувают кровь на дно пробирки так, чтобы верхний слой соляной кислоты оставался неокрашенным. Не вынимая пипетки, ополаскивают ее соляной кислотой из верхнего слоя. Содержимое пробирки перемешивают, ударяя пальцем по ее концу, и оставляют стоять 3-5 минут (за это время гемоглобин превратится в солянокислый гематин, и жидкость приобретает буро-коричневый цвет).

Затем к раствору прибавляют по каплям дистиллированную воду до тех пор, пока цвет полученного раствора не будет совершенно одинаковым с цветом стандарта (при добавлении воды раствор нужно перемешивать стеклянной палочкой).

Цифра, стоящая на уровне полученного раствора показывает содержание гемоглобина в исследуемой крови в грамм-процентах. Если уровень раствора соответствует, например, метке 14,0, то в крови человека содержится 140 г/л гемоглобина.

Дата добавления: 2015-09-18 | Просмотры: 898 | Нарушение авторских прав