Лабораторная работа. 1. Определение витамина C в растительном материале.
1. Определение витамина C в растительном материале.
Оборудование:
| 1.
| Колбы на 50 или 100 мл.
|
| 2.
| Пипетки на 1 мл и 2 мл.
|
| 3.
| Ступка.
|
| 4.
| Воронка.
|
| 5.
| Марлевый фильтр.
|
|
|
| Реактивы:
| 1.
| 1% раствор НСl.
|
| 2.
| 1% раствор щавелевой кислоты.
|
| 3.
| 0,001Н раствор дихлорфенолиндофенола.
|
| 4.
| Растительный материал.
|
| 5.
| Дистиллированная вода.
|
| 6.
| Стеклянный порошок.
|
Принцип метода. Метод основан на способности аскорбиновой кислоты восстанавливать краситель 2,6-дихлорфенолиндофенол. Окисленная форма красителя обладает окраской (в кислой среде – розовой), восстановленная форма – бесцветна. Количество витамина C определяют, титруя исследуемый подкисленный раствор дихлорфенолиндофенолом до появления розовой окраски. Пока в растворе есть аскорбиновая кислота, краситель обесцвечивается, когда вся аскорбиновая кислота будет окислена, титруемый раствор приобретает розовую окраску из-за появления окисленной формы красителя.
Ход работы. Навеску растительного материала измельчают и тщательно растирают в ступке с небольшим количеством толченого стекла и 5 мл 1% HCI. По мере растирания прибавляют еще 5 мл HCI и смесь переносят в колбу на 50 мл. Остаток в ступке смывают в ту же колбу 1% раствором щавелевой кислоты, доводя объем смеси до метки. Содержимое колбы перемешивают и фильтруют. Отбирают нужное количество мл фильтрата (см. таблицу) в чистую колбу и титруют 0,001H раствором дихлорфенолиндофенола до появления розовой окраски, не исчезающей 30 секунд.
Растительный материал
| Навеска (г)
| Фильтрат (мл)
| Коэффициент пересчета
| Картофель
|
|
|
| Капуста
|
|
|
| Шиповник
|
|
|
|
Расчет содержания аскорбиновой кислоты проводят по формуле:
A х 0,088 х K = мг витамина C в 100 г материала, где A – количество
мл раствора дихлорфенолиндофенола, пошедшего на титрование исследуемого раствора, 0,088 – количество мг аскорбиновой кислоты, соответствующее 1 мл 0,001 H раствора дихлорфенолиндофенола, K – коэффициент пересчета на 100 г растительного материала, учитывающий навеску материала и количество мл фильтрата, взятого для титрования.
2. Определение витамина C в моче
Оборудование:
| 1.
| Колба на 50 или 100 мл.
|
| 2.
| Пипетки на 1 мл и 5 мл.
|
|
|
| Реактивы:
| 1.
| 3% раствор уксусной кислоты..
|
| 2.
| 0,001Н раствор дихлорфенолиндофенола.
|
| 3.
| Моча.
|
| 4.
| Дистиллированная вода.
| Ход работы. В колбу наливают 1 мл мочи, 7 мл дистиллированной воды, 3 мл 3% раствора уксусной кислоты и титруют смесь 0,001 H раствором дихлорфенолиндофенола до появления розовой окраски, устойчивой 30 сек.
Для расчета содержания витамина C в суточной моче используют формулу: A х 0,088 х 1500 = мг витамина C в сутки, где 1500 – суточный диурез в мл, A и 0,088 – то же, что в предыдущей работе.
В норме с мочой за сутки выделяется от 20 до 40 мг витамина C.
Диагностическое значение
Определение содержания витамина C в моче дает представление о запасах этого витамина в организме. У детей его уровень понижается при цинге, а также острых и хронических инфекционных заболеваниях.
Дата добавления: 2015-11-25 | Просмотры: 762 | Нарушение авторских прав
|