ГИСТОЛОГИЧЕСКАЯ ТЕХНИКА
АЛЬБОМ
ПО ЦИТОЛОГИИ, ГИСТОЛОГИИ И ЭМБРИОЛОГИИ
СТУДЕНТА ____ КУРСА ВЕТЕРИНАРНОГО ФАКУЛЬТЕТА ГРУППА ________
___________________________________________________________________________
СПЕЦИАЛЬНОСТЬ ВЕТЕРИНАРИЯ/ВЕТЕРИНАРНО-САНИТАРНАЯ ЭКСПЕРТИЗА
УЧЕБНЫЙ ГОД 20___/20____
ГИСТОЛОГИЧЕСКАЯ ТЕХНИКА
Требования к гистологическому препарату:
- тонкий
- прозрачный
- оптически дифференцированный (цветной)
1. Взятие свежего материала (объем 1 см3)
2. Фиксация (сущность – зафиксировать прижизненную структуру белков)
Фиксаторы: 10% забуференный раствор нейтрального формалина; спирты и др.
3. Уплотнение срезов
- заморозка (уплотнение жидкой угольной кислотой)
- пропитывание разогретым парафином (t = 570С)
- пропитывание раствором целлоидина
Материал дегидратировать (обезводить) и обезжирить в спиртах восходящей концентрации, затем пропитать веществом, в котором растворяется парафин (ксилол, толуол, хлороформ и др.), пропустить через смесь органического растворителя (парафин + хлороформ 1: 1), уплотнить парафином.
4. Приготовление срезов на микротоме (толщина срезов 5-8 мкм).
5. Окраска срезов
Красители:
а) основные: окрашивают преимущественно ядра клеток (например, гематоксилин)
Структуры, окрашивающиеся основными красителями, называются базофильными.
б) кислые: окрашивают преимущественно цитоплазму (например, эозин)
Структуры, окрашивающиеся кислыми красителями, называются оксифильными или ацидофильными.
в) нейтральные или специальные (например, орсеин окрашивает эластические волокна, судан и осмиевая кислота – жиры, азотнокислое серебро – нервная ткань)
Депарафинировать срез органическим растворителем (ксилол), провести через спирты нисходящей концентрации (наводнить), окрасить красителями, провести через спирты восходящей концентрации (обезводить), просветлить срез в органическом растворителе (ксилол) и заключить в бальзам (смола пихты или канадского кедра), накрыть покровным стеклом.
Дата добавления: 2015-09-27 | Просмотры: 690 | Нарушение авторских прав
|