|
АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология
|
РАЗДЕЛ: « ФИЗИОЛОГИЯ МИКРОБОВ »
Занятие 6. Дата ______. Тема: «Принципы культивирования бактерий. Выделение и идентификация чистых культур бактерий. Культивирование анаэробов Дезинфекция, антисептика, стерилизация и асептика. Микрофлора воды и воздуха»
Таблица 4. Методы стерилизации и аппаратура
| Стерилизуемый материал
| Метод стерилизации
| Режим стерилизации
| | ü Инфекционный материал
| Автоклавирование
| 1,5-2 атм., 131оС, 20-25 мин.
| | ü Среды, не содержащие веществ, разлагающихся при 120оС
ü Бактериальные фильтры
| Автоклавирование
| 1 атм., 120оС, 20 мин.
| | ü Среды, не выдерживающие нагревания до 120оС
ü Мембранные фильтры
| Автоклавирование
| 0,5 атм., 110оС, 15-30 мин.
| | ü Среды, не выдерживающие нагревания выше 100оС
| Дробная стерилизация
| Текучий пар, 60оС, 3 раза по 30-40 мин., через сутки
| | ü Свернутая сыворотка, яичные среды
| Аппарат Коха
| До 65оС 3 раза по 45 мин., через сутки
| | ü Питательные среды и вещества, разрушающиеся при нагревании
| Фильтрование через стерильные бактериальные фильтры: фильтры Зейтца, свечи Шамберлана или Беркефельда
| Фильтрование
| | ü Колбы, пробирки, чашки Петри, пипетки и прочая стеклянная посуда и инструменты
| Печь Пастера
| 165-170оС, 45 мин.
|
Таблица 5. Классификация питательных сред
| Группа питательных сред
| Жидкие
| Плотные
| | Основные (простые)
| | Простые среды
| Мясо-пептонный бульон (МПБ)
| Мясо-пептонный агар (МПА)
| | Специальные (сложные)
| | А. Сложные специальные
| ¨ Сахарный МПБ для стрептококков и др.
| ¨ Сахарный МПА
¨ 5% кровяной агар и др.
| | Б. Элективныеилиизбирательные
(преимущественно растет определенный вид микроорганизмов, другие не растут или растут плохо)
| ¨ 1% щелочная пептонная вода для холерного вибриона
¨ 10% желчный бульон для сальмонелл и др.
| ¨ Желточно-солевой агар (ЖСА) для стафилококков
¨ Свернутая сыворотка для дифтерийной палочки
¨ Кровяной агар с ванкомицином для бактероидов и др.
| | В. Среды обогащения (всегда жидкие; используются для накопления микробов определенного вида)
| ¨ Селенитовый бульон для дизентерийной палочки
¨ 10% желчный бульон для сальмонелл и др.
|
________
| | Г. Дифференциально-диагностические
(применяются для первичной дифференциации бактерий преимущественно по биохимическим свойствам, а также для идентификации бактерий)
|
¨ Среды Гисса (“пестрый ряд” для определения сахаролитической активности бактерий)
|
¨ Среда Эндо
¨ Среда Левина
¨ Среда Плоскирева
¨ Среда МакКонки
¨ Среды Гисса (полужидкие) и др.
| | Д. Хромогенные
(всегда плотные; применяются для дифференциации бактерий по культуральным свойствам)
|
________
|
¨ «УриселектТМ» и др.
| | Е. Транспортные
(для доставки исследуемого материала в лабораторию)
| ¨ Среда Стюарта и др.
| ¨ Среда Стюарта (полужидкая) и др.
| | Синтетические
| |
| --------
| ¨ Среда Сотона
|
Протокол “ВЫДЕЛЕНИЕ И ИДЕНТИФИКАЦИЯ ЧИСТЫХ КУЛЬТУР БАКТЕРИЙ”
(бактериологический метод исследования)
1 ЭТАП. Посев исследуемого материала на чашки Петри с плотной питательной средой (МПА) методом штриха.
Инкубация при 37оС в течение 24 часов.
Примечание 1: в том случае, если в исследуемом материале содержится незначительное количество возбудителя (например, в крови), то его предварительно накапливают путем посева материала в жидкую питательную среду (см. среды обогащения), а затем после инкубации (как правило, при 37оС в течение 18-24 часов) производят пересев на плотную среду.
Примечание 2: выделение и идентификация чистой культуры анаэробов производится в анаэробных условиях.
2 ЭТАП. Идентификация выделенной чистой культуры (чистых культур) по культуральным, морфологическим и тинкториальным свойствам. Для этого проводят:
а) макро- и микроскопическое исследование колоний, выросших на плотной питательной среде (культуральные свойства);
б) приготовление мазка из половины колонии каждого вида и окраску препарата по Граму (морфологические и тинкториальные свойства);
Примечание: микроскопия материала из колоний производится также с целью проверки чистоты культуры.
в) пересев оставшейся части колонии на скошенный агар для накопления выделенной чистой культуры. Инкубация при 37оС в течение 24 часов.
Таблица 6. Схема описания колоний
| №
| Размеры
| Форма
| Цвет
| Поверхность
| Края
| Консистенция
| Структура
| Морфология;
Окраска
по Граму
| Предполагаемый возбудитель
| |
| | | | | | | | | | |
| | | | | | | | | |
ЭТАП.
Дата добавления: 2015-12-15 | Просмотры: 411 | Нарушение авторских прав
|
