АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология

Скринінговий метод оцінки гепарин-кофакторної активності ПАТ

Принцип. При додаванні стандартної дози гепарину до плазми крові тромбі-новий час подовжується в залежності від вмісту в неї ПАТ та факторів, які блокують дію гепарину (білки «гострої фази», фосфоліпідні мембрани та інші). За ступенем подовження тромбінового часу оцінюють індивідуальну достатність антикоагулянтного ефекту гепарину. Наводимо метод на прикладі використування діагностикуму «Гепарин-тест» фірми «Технологія-Стандарт».

Матеріал та методи дослідження: цитратна бідна на тромбоцити плазма крові

Далі приводиться опис методу на прикладі використання діагностикуму “ Гепаринтест" фірми Технологія-Стандарт.

Реактиви. 1. Тромбін людини. Розводиться за допомогою добавки 10 мл фізіологічного (0,15 М) розчину хлориду натрію. 2. Робочий розчин тромбіну отримують розведенням маткового розчину тромбіну розчинником для тромбину в співвідношенні 1:17 з тим, щоб його активність при додаванні до контрольної нормальної плазми (при змішуванні рівних за об’ємом реагентів) дорівнювала 15-16 с. 3. Буфер для розведення гепарину (трис-НСІ, 0,15 М, рН 7,3-7,4). 4. Гепарин (сухий). Розводиться фізіологічним (0,15 М) розчином хлориду натрію до концентрації, яка подовжує тромбіновий час згортання в контрольній нормальній плазмі с 15-16 до -80 с.

Хід визначення. В пробірку (або кювету коагулометра) вно­сять 0,1 мл контрольної нормальної плазми та інкубірують 1 хв при +37°С. Потім вносять 0,1 мл робочого рзчину тромбіну, який до дослідження зберігають при кімнатній температурі (+18...+25°С), включають секундомір або таймер коагулометра та реєструють час згортання,який повинен бути в межах 65-80 с.Аналогічно визначають час згортання в контрольній нор­мальній плазмі.

Читання результатів. За отриманими даними розраховують індекс антитромбінового резерву плазми (АРП)за формулою:

АРП = Б/Кх 100%,

де К - тромбін-гепариновий час згортання в контрольній нормальній плазмі; Б - той же показник в плазмі хворого.

В нормі АРП складає 80-120%. Діагностичне значення має зниження АРП, яке може залежати:

• від зниження рівня ПАТ або зменьшення спорідненості його до гепари­ну;

• від надлишкового нагромадження в плазмі хворого нейтралізуючих
антикоагулянтну дію гепарину білків "гострої фази" (фіб­риногену, С-реактивного білка, а₂-кислого гликопротеїну та ін.

Визначення гепарин-кофакторної активності ПАТ використовують, в основному, для діагностики ДВЗ-синдрому і диференціальної діагностики тромбофілій, які пов’язані чи не пов’язані з дефіцитом ПАТ), а також для контролю за лікуванням їх, визначенням достатності замісної терапії.

Дата добавления: 2015-09-27 | Просмотры: 593 | Нарушение авторских прав