АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология

Работа №2. Влияние активаторов и ингибиторов на активность ферментов

Принцип метода: Вещества, увеличивающие каталитическое действие фермента, называются активаторами. Активаторы обычно не входят в состав самого фермента, но образуют с ним комплексные соединения в процессе катализа и способствуют протеканию реакции. Вещества, тормозящие активность фермента, называются ингибиторами. Среди активаторов и ингибиторов часто встречаются ионы металлов, входящие в состав различных солей. Для амилазы слюны активаторами являются ионы Ca²⁺, Zn²⁺, Nacl, а ингибитором - Cu²⁺.

Порядок выполнения работы: В три пробирки наливают по 1 мл (20 капель) разведенной слюны. В пробирку №1 добавляют 2 капли H₂O _дист., в пробирку №2 – 2 капли 1% раствора Nacl, в пробирку №3 - 2 капли 1% раствора CuSO_4. После этого в каждую пробирку добавляют по 5 капель 1% раствора крахмала. Все пробирки оставляют при комнатной температуре на 5 минут, затем в каждую добавляют по 1 капле 0,1% раствора J₂ в KJ и перемешивают. Для более наглядной картины изменения окраски целесообразно в каждую пробирку добавить по 2 мл H₂O _дист.

На основании сопоставления окраски растворов во всех трех пробирках сделать вывод об активирующем или ингибирующем действии взятых для исследования веществ.

Клинико-диагностическое значение: Некоторые природные или синтетические вещества оказывают избирательное ингибирующее действие на ферменты и используются в качестве лекарственных препаратов. Данное направление является перспективным, к настоящему времени получены новые лекарственные препараты для лечения гипертонической болезни – ингибиторы АПФ (ангиотензинпревращающего фермента), лечения атеросклероза – ингибиторы ГМГ-КоА-редуктазы (статины), снижающие синтез холестерина. В больших дозах ингибиторы могут оказаться ядами.

Работа №3. Специфичность ферментов

Принцип метода: Основным свойством ферментов является специфичность их действия. Она проявляется в том, что фермент действует лишь на определенный субстрат и катализирует определенное превращение. Специфичность обусловлена соответствием между строением субстрата и активного центра фермента. Амилаза слюны ускоряет гидролиз полисахаридов (крахмал, гликоген), но не оказывает никакого действия на дисахариды (сахароза).

Порядок выполнения работы: В 2 пенициллиновых флакона наливают по 5 капель разведенной слюны. В первый флакон добавляют 10 капель 1% раствора крахмала, во второй добавляют 10 капель 1% раствора сахарозы. Обе пробы помещают в термостат (38⁰ С) на 10 минут, после чего с содержимым проделывают реакцию Троммера (см. Работа №1). В случае положительной реакции на глюкозу наблюдается красное окрашивание.

В выводе указать, в чем проявляется специфичность фермента и чем она обусловлена.

Клинико-диагностическое значение: Изучение специфичности ферментов позволяет разрабатывать лекарственные препараты, действующие по принципу ингибирования, активирования или парализации ферментов. Эти препараты могут быть структурными аналогами субстратов (конкурентное ингибирование) или аналогами активного центра (антидотная терапия)

Задания для самоконтроля:

Тестовый контроль знаний по теме:

1. Выберите один правильный ответ. Ферменты, катализирующие внутримолекулярный перенос групп, называются:

а) гидроксилазы б) киназы в) изомеразы г) лигазы д) оксигеназы

2. Выберите один неправильный ответ. Фермент:

а) ускоряет реакцию

б) соединяется с субстратом необратимо

в) после завершения реакции обнаруживается в неизменном виде и количестве

г) не изменяет состояния равновесия

д) узнает субстрат среди множества других соединений

4. Выберите один правильный ответ. Дж. Самнер в 1926 г. впервые получил в кристаллическом состоянии фермент:

а) аспарагиназу б) аргиназу в) пепсин. г) уреазу д) гексокиназу

Дата добавления: 2015-08-06 | Просмотры: 949 | Нарушение авторских прав