На тарелку в соответствующий сектор нанесите крупную каплю сыворотки двух серий I(0), II(А), III(В) групп. Затем последовательно внести в капли сыворотки подготовленную исследуемую кровь уголком предметного стекла или стеклянной палочкой и тщательно перемешать, капля вносимой крови должна быть в 5-10 раз меньше капли сыворотки. Затем путем покачивания тарелки тщательно перемешать кровь с сывороткой. Предварительные результаты оценивают через 3 мин., после чего добавляют каплю изотонического раствора хлорида натрия, вновь смешивают и через 5 мин. проводят окончательную оценку реакции агглютинации (смешивание крови больного и стандартных сывороток). Реакцию агглютинации определяет врач. Результат реакции вносится в бланк направления или отмечается на лицевой стороне истории болезни, где ставится дата определения группы крови и личная подпись врача и медсестры, определявших группу крови.
Далее исследуемая кровь отправляется в клиническую лабораторию для повторного определения группы крови (во избежание ошибки) и резус-фактора.
По этой же системе определяется группа донорской крови из флакона и сверяется с записью на этом флаконе.
Оценка реакции агглютинации:
- положительная – хлопья и зернышки из склеившихся эритроцитов не расходятся при добавлении изотонического раствора хлорида натрия и перемешивании;
- отрицательная – капли сыворотки на тарелке прозрачные, равномерно розового цвета, не содержат хлопьев и зерен.
Комбинации реакций агглютинации:
1)все три сыворотки в обеих сериях не дают агглютинации – исследуемая кровь 0 (I) группы;
2)реакция агглютинации отрицательная с сывороткой А (II) группы обеих серий и положительная с сывороткой 0 (I) и В (III) – исследуемая кровь А (II) группы;
3)реакция агглютинации отрицательная с сывороткой В (III) группы обеих серий и положительная с сывороткой 0 (I) и А (II) – исследуемая кровь В (III) группы;
4)сыворотка 0 (I), А (II), В (III) групп дают положительную реакцию в обеих сериях - кровь принадлежит АВ (IV) группе.
Прежде чем дать такое заключение, необходимо провести реакцию со стандартной сывороткой АВ(IV) группы по той же методике. Окончательная реакция агглютинации позволяет отнести исследуемую кровь к АВ (IV) группе.
Наиболее типичные ошибки при определении групповой принадлежности крови:
- слабая активность стандартной сыворотки;
- избыточное количество исследуемой крови, добавляемой к стандартной сыворотке при высокой температуре окружающей среды;
- ложная агглютинация при подсыхании капли сыворотки и образование «монетных» столбиков эритроцитов или проявление холодовой агглютинации (температура окружающей среды ниже 15о С).
Во всех сомнительных случаях проводят повторное исследование групповой принадлежности со стандартными сыворотками других серий.
Добавление капли изотонического раствора хлорида натрия к исследуемой крови при температуре выше 15о С позволяют избежать указанных ошибок.
Групповая принадлежность крови больного, независимо от ранее определенной принадлежности, определяется каждый раз при переливании крови и ее компонентов. Отмечать групповую принадлежность на основании отметки в паспорте, выписки из истории болезни или других справок не разрешается.