Ошибки при выполнении лабораторных процедур
12.1.1. Ложноположительные результаты
могут быть обусловлены следующими причинами:
— плохая обработка многоразовых флаконов для сбора материала, в которых могут оставаться микобактерии;
— повторное использование предметных стекол после положительного предыдущего мазка;
— использование для приготовления мазка загрязненных бациллярным материалом бактериологических петель, пипеток или деревянных палочек;
— применение предметных стекол с царапинами и другими дефектами, в результате чего появляются артефакты, которые ошибочно могут быть приняты за микобактерии; красная краска может иногда задерживаться на царапинах и создавать у начинающего исследователя ошибочное представление о том, что он видит кислотоустойчивую микобактерию. Такие царапины нередко образуют параллельные ряды. Обычно они более грубые и больше по размерам, чем микобактерии. Их несложно идентифицировать, так как они находятся на стекле в более глубокой плоскости (под мазком), и исчезают, если установить фокус на клетки (лейкоциты, эпителиальные клетки);
— использование плохо профильтрованного или длительно сохранявшегося раствора фуксина, содержащего кристаллы;
— наличие микобактерий в иммерсионном масле, если иммерсионные линзы не были очищены после положительных препаратов или иммерсионное масло загрязнено микобактериями, если пипетка, которой оно наносится на мазок, случайно соприкасалась с положительным мазком;
— недостаточное обесцвечивание мазка, что может привести к сохранению красной окраски на некоторых некислотоустойчивых бактериях;
— волокна шерсти, хлопка, фильтровальной бумаги; обычно они встречаются как единичные находки, чаще всего в одном поле зрения;
— пыльца некоторых видов сосны, которая может обнаруживаться в виде редко встречающихся в препарате коротких кокковидных палочек.
12.1.2. Ложноотрицательные результаты могут быть обусловлены следующими причинами:
— плохим качеством или недостаточным количеством исследуемого материала;
— исследованием слюны вместо мокроты;
— неудачным выбором частиц мокроты для приготовления мазка;
— нарушением условий хранения, транспортировки, консервации материала (высокая температура и низкая влажность, а также воздействие на материал прямого солнечного света или ультрафиолетового излучения; под влиянием которых содержащиеся в материале микобактерии могут утратить присущую им кислотоустойчивость);
— приготовлением слишком тонкого или толстого мазка, плохой его фиксацией над пламенем горелки или несоблюдением режимов окрашивания (неправильная экспозиция при окраске);
— нарушением методики просмотра мазка (малое число просмотренных полей зрения);
— плохим качеством красителей и реагентов;
— при повторном просмотре мазков (реанализ) ложноотрицательный результат может быть обусловлен тем, что после первичного просмотра с препарата не было удалено иммерсионное масло (при длительном воздействии оно обесцвечивает окраску) или препарат тщательно протирали при удалении иммерсионного масла, что вызвало повреждение мазка;
— хранение окрашенных мазков в месте, доступном прямым солнечным лучам или ультрафиолетовому свету, парам кислот.
Мазки, окрашенные флуорохромами, при длительном хранении могут утрачивать флуоресценцию.
12.1.3. Операторские ошибки (ложноположительные или ложноотрицательные):
— неправильная маркировка флаконов с диагностическим материалом;
— отсутствие маркировки на стекле или повреждение ее в процессе окраски или обесцвечивания;
— неправильная регистрация результатов.
Таблица 1
Возможные причины неисправностей при микроскопии и способы их устранения
Дата добавления: 2015-09-03 | Просмотры: 576 | Нарушение авторских прав
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | 13 | 14 | 15 | 16 | 17 | 18 | 19 | 20 | 21 | 22 | 23 | 24 | 25 | 26 | 27 |
|