Молекулярная гибридизация. Полимеразная цепная реакция.
Метод основам на выявлении в биоматериале от больного из внешней среды или препарат из чистых культур после донательноетъю нуклеиновых кислот (МЮ. определение их рода, вила и типа специфичности Применяют два метола:
I. Молекулярная гибридизация (MB) процесс, в котором одноцепочечная ПК исследуемою микроорганизма (мишень) при взаимодействии с комплементарным фрагментом ПК. включающей метку (зонд) образует двухцепочечный комплекс Назначение метода:
выявление степени сходства различных ДНК Применяется для идентификации микроорганизмов, особенно тех, которые трудно и медленно растут (микоплазмы. хламидии. вирусы)
Материал для исследования:
гной; кровь; отделяемое из уретры: моча, испражнении, биопунктаты тканей и органов: объекты окружающей среды (вода, почта). Методы гибридизации:
- в растворе,
- на фильтре,
- на стекле.
Зонд - это двухцепочечные или одноцепочечные фрагменты ДНК меченые затонной, флюорисцентной или ферментной.
II ПЦР (полимеразная цепная реакция) - что способ быстрого получения множественных копий специфической последовательности ДНК бактерий, грибов, вирусов до количество, достаточного для идентификации другими молекулярно-биологическими методами Назначение:
• индикация микроорганизмов в объектах внешней среды, пищевых продуктов, материале от больных,
• идентификация микроорганизмов.
• генетическое типирование,
• выявление генов вирулентности. Материал для исследования тог же Основные компоненты:
• исследуемая проба ДНК;
• смесь ДНТФ (дезоксинуклеотилтрифосфат),
• достраивание с помощью ДНК - полимеразы:
• праймеры - синтетические фрагменты ДНК;
• специфический буфер;
• минеральное масло;
• мембрана.
Дата добавления: 2015-09-27 | Просмотры: 495 | Нарушение авторских прав
|