Окраска по методу Грама
метод окраски микроорганизмов для исследования, позволяющий дифференцировать бактерии по биохимическим свойствам их клеточной стенки. Предложен в 1884 году датским врачом Г. К. Грамом.
По Граму бактерии окрашивают анилиновыми красителями — генциановым или метиловым фиолетовым и др., затем краситель фиксируют раствором йода. При последующем промывании окрашенного препарата спиртом те виды бактерий, которые оказываются прочно окрашенными, называют грамположительными бактериями (обозначаются Грам (+)), — в отличие от грамотрицательных (Грам (−)), которые при промывке обесцвечиваются.
1. Фиксированный на огне мазок окрашивают генциан-, метил- или кристаллвиолетом 2 мин. (положив на мазок фильтровальную бумагу, пропитанную краской).
2. Наливают раствор Люголя на 2 мин. Мазок приобретает серо-бурую окраску.
3. Сливают раствор Люголя.
4. Для обесцвечивания вносят несколько капель 70° спирта на 2 мин.; следят, чтобы он равномерно распределился по поверхности всего мазка.
5. Препарат промывают водой.
6. Докрашивают фуксином Пфейффера 2 мин.
7. Бумажку снимают, препарат промывают водой.
8. Промывают водой, высушивают, микроскопируют.
Результат окраски: грамположительные бактерии окрашиваются основной краской в темно-фиолетовый цвет, грамотрицательные бактерии, воспринимая дополнительную окраску, приобретают ярко-малиновый цвет.
Дата добавления: 2015-09-27 | Просмотры: 419 | Нарушение авторских прав
|