Определение группы крови по стандартным сывороткам.
Ход работы:
1. Убедиться в пригодности стандартных сывороток, (герметичности ампул, флаконов, наличие резиновых пробок, алюминиевых
колпачков, прозрачность сывороток, наличие правильно заполненных этикеток, их соответствие содержимому флаконов, срок годности, титр не менее 1:32,окраска сывороток: в штативе 0(1)- бесцветная, А(П) голубая, В(Ш) - красная, A(IV) -желтая).
2. Надеть фартук, маску, очки, перчатки, нарукавники, обработать перчатки 3%
раствором хлорамина или 70% раствором спирта, подогреть ампулы с сыворотками до 20º С.
3. Надписать на тарелочке Ф.И.О. реципиента.
4. Вскрыть ампулы со стандартными сыворотками, расставить в штативе по порядку, по сериям.
5. Обработать IV палец левой кисти реципиента шариком с 70% раствором спирта, кончик пальца проколоть скарификатором, первую каплю удалить шариком, в капилляр с помощью резиновой груши набрать 1 мл крови, которую затем выдавить на предметное стекло.
6. В лунки блюдца реципиента нанести под соответствующими маркировками по 1 капле (0,05 мл) стандартных сывороток 0(1), А(П), В(Ш), AB(IV) двух серий.
7. Отдельным концом стеклянной палочки или отдельной пипеткой для каждой лунки перенести каплю крови (0,005 мл) в 10 раз меньше капли сыворотки с предметного стекла в лунку и смешать с каплей сыворотки до гомогенного пятна.
8. Блюдце осторожно покачивать в течение 3 мин.
9. При появлении агглютинации в лунке туда добавить пипеткой 1 каплю (0,05 мл) изотонического раствора натрия хлорида и продолжать наблюдать еще 2 мин.
10. После 5 мин наблюдения оценить результат пробы.
11. Блюдце, палочки, пипетки, шприцы, иглы дезинфицируются в 3% растворе хлорамина в течение 1 ч.
Примечание:
1. Кровь у реципиента можно брать шприцем из вены (4-5мл) и помешать ее в пробирку со стабилизатором (0,5 мл 4% раствора цитрата или 0,005 мл гепарина).
Оценка результатов:
1.При отсутствии агглютинации во всех трёх каплях смеси группа крови 0(1)-первая.
2. При наличии агглютинации в первой и третьей каплях смеси и отсутствии во второй группа крови А (II) - вторая,
3.При наличии агглютинации в первой и второй каплях смеси и отсутствии в третьей группа крови В (III) -третья.
4. При наличии агглютинации во всех каплях смеси группа крови AB(IV) -четвертая.
5. Результаты реакций в одной и той же группе двух серий должны совпадать.
6. Если исследуемая группа крови оказалась AB(IV), надо провести контрольное исследование со стандартной сывороткой четвертой группы AB(IV). Лишь отсутствие агглютинации в этой капле позволит считать реакцию специфической (истинной) и отнести исследуемую кровь к четвертой группе - AB(IV).
7. Во всех сомнительных случаях необходимо повторное исследование с
гемагглютинирующими сыворотками другой серии.
Примечание: исследование надо проводить в оптимальных условиях - при температуре воздуха не ниже 15ºС и не выше 25º С и хорошей освещенности.
Дата добавления: 2016-03-26 | Просмотры: 568 | Нарушение авторских прав
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 |
|