АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология

РЕАКЦИЯ ИММУНОФЛЮОРЕСЦЕНЦИИ

Прочитайте:
  1. A) ответная реакция организма, возникающая под воздействием повреждающих факторов
  2. IV. Реакция эндокринной системы на гипогликемию
  3. А. Кожные пробы при аллергических реакциях немедленного типа
  4. Актинический хейлит - воспалительное заболевание кожи красной каймы губ, возникающее в результате инсоляции и относящееся к фотоаллергическим реакциям.
  5. Аффективно-шоковые реакции (острая реакция на стресс) являются
  6. Белки острой фазы. (СРБ,МСБ,сурфактанты),Катионные белки(дефенсины). Их роль в иммунных реакциях.
  7. Видимые повреждения Потеря Реакция на нашат.спирт Реакция зрачков на свет
  8. Воспаление как общая защитная реакция организма.
  9. Вторичная реакция воспаления /преобладание
  10. Вызывают спазм гладкой мускулатуры бронхов. 'Эта реакция, иногда рассматриваемая как ранняя

 

Имеются два варианта постановки (РИФ): прямая и непрямая (рис. 8). Прямая РИФ — простая реакция, но для ее постановки требуется большое количество меченых антимикробных сывороток. Непрямая РИФ — более сложная реакция, но поставить ее можно имея только одну меченую сыворотку. При этом антиген вначале обрабатывают обычной иммунной специфической сывороткой, а затем к иммунному комплексу антиген — антитело прибавляют меченную флюоресцеинизотиоцианатом (ФИТЦ) антисыворотку к антителу этого комплекса. Обычно индикация антигена (микроба) на первом этапе проводится иммунной кроличьей сывороткой, тогда на втором этапе используется меченная ФИТЦ антикроличья сыворотка, полученная путем иммунизации гамма-глобулинами кроликов, ослов или других животных.

 

Рис. 8. Реакция иммунофлюоресценции:

а — прямая; 6 — непрямая

Постановка прямой РИФ: на обезжиренном предметном стекле из исследуемого материала делают тонкие мазки, а из органов и тканей — мазки-отпечатки. Их подсушивают, фиксируют, наносят на мазки взятую в рабочем разведении люминесцирующую сыворотку и помещают во влажную камеру при температуре 37 °С на 20-30 мин. Затем, чтобы удалить избыток флюоресцирующих антител, их промывают (10—15 мин) в забуференном изотоническом растворе хлорида натрия с последующим ополаскиванием (10 мин) в дистиллированной или проточной воде. Сушат препараты при комнатной температуре. Исследуют в люминесцентном микроскопе с использованием иммерсионного объектива. Интенсивность флюоресценции в виде зеленого ободка вокруг бактерий оценивают по четырехбалльной шкале: «++++» — очень яркая; «+++» — яркая; «++» —выраженная о6одочная флюоресценция; «+» — слабое свечение клеток.

 

Дата добавления: 2015-02-06 | Просмотры: 575 | Нарушение авторских прав


1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 |

При использовании материала ссылка на сайт medlec.org обязательна! (0.003 сек.)