Стандартные сыворотки системы АВО двух различных серий каждой группы наносят по 2 капли на пластинку под соответствующими обозначениями таким образом, чтобы получились два ряда по три большие капли (0,1 мл) в следующем порядке слева направо: Оαβ(I), Аβ(II), Вα(III). Исследуемую кровь наносят по одной маленькой капле (0,01 мл) рядом с каждой каплей сыворотки и перемешивают кровь с сывороткой. Используют эритроциты реципиента не более 2-х дневного срока хранения, при температуре +2+8 ºС.
Оценка результата. Реакция в каждой капле может быть положительной (наличие агглютинации эритроцитов) и отрицательной (отсутствие агглютинации). Различные сочетаний положительных и отрицательных результатов дают возможность судить о групповой принадлежности исследуемой крови (таблица):
Результат реакции с изогемагглютинирующими сыворотками группы:
Оαβ(I)
Аβ(II)
Вα(III)
АВО(IV)
Это указывает, что эритроциты содержат:
-
-
-
-
О(I)
+
-
+
-
A(II)
+
+
-
-
B(III)
+
+
+
-
AB(IV)
Оценка результатов определения групп крови при помощи стандартных изогемагглютинирующих сывороток. Знаком (+) обозначено наличие агглютинации, знаком (-) – ее отсутствие.
Как видно из таблицы, результат оценивается в зависимости от реакции со стандартными сыворотками группы Оαβ(I), Аβ(II), Вα(III). В тех случаях, когда положительный результат получен с сывороткой всех трех групп, для исключения неспецифической агглютинации производится контрольное исследование со стандартной сывороткой группы АВО(IV), не содержащей групповых агглютининов.
II. Перекрестный метод определения группы крови – одновременное распознавание агглютиногенов в эритроцитах исследуемой крови с помощью стандартных сывороток и выявление агглютининов, содержащихся в сыворотке этой крови с помощью стандартных эритроцитов:
1. В исследуемых эритроцитах не обнаружены агглютиногены А и В, исследуемая сыворотка агглютинирует стандартные эритроциты группы А(II) и В(III), что указывает на наличие в ней агглютининов α и β – это Оαβ(I) группа крови.
2. В исследуемых эритроцитах выявлен агглютиноген А, исследуемая сыворотка содержит агглютинирующие эритроциты группы В(III), в сыворотке обследуемого обнаружен агглютинин β – это Аβ(II) группа.
3. В исследуемых эритроцитах выявлен агглютиноген В, исследуемая сыворотка содержит агглютинирующие эритроциты группы А(II), что указывает на присутствие в ней агглютинина α – это В(III) группа.
4. Реакция со стандартными сыворотками находит в эритроцитах исследуемой крови агглютиногены А и В, в сыворотке исследуемой крови агглютинации со стандартными эритроцитами нет – это АВ(IV) группа крови.
Оценка результатов:
Наличие агглютинации при реакции со стандартными сыворотками
Наличие агглютинации при реакции со стандартными эритроцитами