Испытуемый материал (сыворотка крови или любая другая биологическая жидкость, содержащая антитела) предварительно инактивируют при 56°С в течение 30 мин. На изотоническом растворе хлорида натрия подготавливают двукратные разведения испытуемой сыворотки, начиная с 1:10 (1:20, 1:40 и т. д.), и свежую гемолитическую систему. Антиген разводят, чтобы одна его рабочая доза содержалась в 0,5 мл раствора. Затем в пробирки вносят по 0,5 мл разведенной сыворотки, добавляют по 0,5 мл антигена и по 0,5 мл комплемента. К каждому разведению сыворотки ставят контроль на антикомплементарность (0,5 мл сыворотки. + 0,5 мл изотонического раствора + 0,5 мл комплемента). Дополнительно ставят следующие контроли: контроль антигена 0,5 мл антигена+ 0,5 мл изотонического раствора хлорида натрия+0,5 мл комплемента), контроль комплемента (0,5 мл комплемента+1 мл изотонического раствора хлорида натрия) и контроль гемолитической системы (1,5 мл изотонического раствора хлорида натрия).
3. При посеве фибринозной пленки на поверхность питательной среды Клауберга выросли колонии, окрашенные в серо-черный цвет, с изрезанными краями.
Назовите возбудителя и вызванное им заболевание.
Среда Клауберга- плотная дифференциально-диагностическая питательная среда для дифтерийных палочек, содержащая теллурит калия, глицерин и дефибринированную кровь; позволяет дифференцировать биовары дифтерийных палочек по морфологическим особенностям колоний.
Выделен Corynebacterium diphtheriae биовар gravis. Колонии R- формы, растут в виде крупных колоний 2-3 мм, серовато- чёрного цвета, имеют изрезанные края.
Возбудители дифтерии слегка изогнутые палочки, на концах имеют утолщения. В этих утолщениях имеются зерна валютина. Бактерии дифтерии неподвижны, не имеют спор и капсул. Грамположительны. В мазках обычно располагаются попарно под острым или тупым углом, в виде растопыренных пальцев.