БИЛЕТ 29
1. Проведите методику титрования фага по Аппельману. Оцените результ.
Объясните явление бактериофагия.
Аппельмана метод -метод определения литической активности фага на жидких питательных средах путем установления его максимального разведения, вызывающего полный лизис бульонной культуры чувствительных бактерий
Титрование бактериофага в жидкой питательной среде по методу Аппельмана. Метод Аппельмана основан на внесении различных количеств титруемого бактериофага в бульон, засеянный одной и той же дозой культуры гомологичных микробов, с целью получения феномена бактериофагии.
Двенадцать пробирок, содержащих по 4,5 мл мясо-пеп-тонного бульона, ставят в штатив в один ряд. В 1-ю пробирку стерильной пипеткой вносят 0,5 мл исследуемого фага. Содержимое пробирки перемешивают и 0,5 мл жидкости из 1-й пробирки переносят во 2-ю, из 2-й — в 3-ю и т. д. до 10-й включительно. Из 10-й пробирки лишние 0,5 мл выливают1; 11-я и 12-я пробирки контрольные. Переносят жидкость из одной пробирки в другую каждый раз отдельной стерильной пипеткой емкостью 1 мл. Таким образом, в 10 пробирках получают разведения бактериофага от 1: 10 до 1: Ю-10.
Во все 10 пробирок приготовленного ряда разведений вносят по 0,2 мл 18—24-часовой бульонной культуры бактерий, одноименных титруемому фагу. Прибавляемая культура не должна 'содержать устойчивых к фагу клеток.
Густота микробной взвеси, прибавляемой в пробирки с титруемым бактериофагом, существенного значения не имеет, так как опытным путем (Л. Д. Переметина) было установлено, что изменение микробной концентрации в пределах 100000—4 500 000 в 1 мл не оказывает заметного влияния па исход титрования бактериофага. Пробирка 11-я — контроль культуры, содержит 5 мл бульона и 0,2 мл бульонной культуры микробов. Пробирка 12-я — контроль на стерильность, содержит 5 мл бульона без добавления культуры и фага. Штатив с пробирками помещают в термостатчпри 37 °С на 18—20 ч.
Учет результатов производят через 18—20 ч после инкубации в термостате при 37°С. Титром считают то максимальное разведение бактериофага, при котором наблюдается полный лизис чувствительной к нему культуры. Практически это соответствует той последней пробирке в ряду, в которой бульон еще остается совершенно прозрачным
2. Перечислить дифференциально-диагностические среды необходимые для идентификации стафилококка. Назвать отличительные признаки патогенного стафилококка.
Дифференциально – диагностический признак: при росте стафилококки образуют пигмент: золотистый лимонно-желтый или белый, который не растворяется в воде и растворяется в ацетоне, эфире, спирте.
На МПА колонии стафилококка выпуклые, круглые, непрозрачные, блестящие, размером 2-4 мм с ровными краями. На агаре с кровью вокруг колонии образуется зона гемолиза. На бульоне – равномерное помутнение и осадок на дне.
На ЖСА вокруг колоний выявляется продукция лецитиназы - мутная зона и «радужные» венчики.
3. В микробиологическую лабораторию поступил исследуемый материал – мокрота кровянисто – тягучая. Возможно ли по макроскопической картине в данном случае предположить характер возбудителя, обоснуйте ответ.Расскажите о способе сбора материала у больного с патологией дыхательной системы при скудном выделении мокроты.
При макроскопической картине невозможно определить характер возбудителя т.к. патологии дыхательной системы с выделением кровянистой тягучей мокротой вызывают разные возбудители. В данном случае чтобы выявить возбудителя следует провести микроскопическое, микробиологическое и биологическое исследования.
Мокроту собирают утром до приема пищи, предварительно почистив зубы и тщательно прополоскав рот кипяченой водой. Больным следует разъяснить, что для исследования требуется мокрота, отделяющаяся при кашле, а не при отхаркивании. Свежевыделенную мокроту собирают в чистую сухую широкогорлую склянку. Лицам, ответственным за сбор мокроты, следует объяснить пациенту причины исследования и необходимость откашливать не слюну или носоглоточную слизь, а содержимое глубоких отделов дыхательных путей, что достигается в результате продуктивного кашля, возникающего после нескольких глубоких вдохов. Если пациент не выделяет мокроту или выделяет ее только эпизодически и в скудном количестве, то ему дают отхаркивающее средство или применяют раздражающие ингаляции, провоцирующие отделение мокроты. При отсутствии мокроты, невозможности проведения аэрозольной ингаляции или ее безуспешности для исследования берут промывные воды бронхов или желудка (преимущественно у детей младшего возраста). Более информативным является материал, получаемый при бронхологических исследованиях: аспират из трахеи и бронхов, бронхоальвеолярная лаважная жидкость (БАЛ), а также материалы биопсии. По завершении сбора мокроты медицинский работник закрывает флакон крышкой, маркирует его и помещает в специальный бикс для транспортировки в лабораторию.
Дата добавления: 2015-09-03 | Просмотры: 955 | Нарушение авторских прав
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | 13 | 14 | 15 | 16 | 17 | 18 | 19 | 20 | 21 | 22 | 23 | 24 | 25 | 26 | 27 | 28 | 29 |
|