АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология

Замораживание спермы в соломинках

Замораживание спермы быка в полипропиленовых соломинках (пайетах). Технология была разработана в 1975 году во Франции ученым Л. Кассу. Соломинки объемом 0,5 мл, диаметр 3мм. Для разбавления спермы быка в настоящее время используют среду ЛГЦЖ (лактозо-глицерино-цитратно-желточная среда). В зависимости от активности и концентрации полученной спермы её разбавляют от 20 до 50 раз, с таким расчетом, чтобы в 1 дозе было не менее 15 млн. половых клеток. После предварительной оценки сперму переливают в смеситель с емкостью 100-200мл и измеряют объем, разбавитель при температуре +25-30ёС небольшими порциями приливают по стеночке, перемешивают. В последующем, прежде чем приступить к фасовке, заполнению соломинок. Прежде чем в специальной машине под действием вакуума происходит заполнение соломинок, концентрация половых клеток должна быть равномерной (магнитные мешалки). Машина маркирует соломинки: название предприятия, кличка быка, инвентарный номер, дата получения спермы, номер серии. Чтобы сперма не вытекла: 1) укупоривание концов с помощью стеклянных шариков; 2) укупоривание с одной стороны пробкой из нетоксического для спермиев волокна, с другой стороны склеивают. После наполнения соломинок между спермой и одним из шариков или пробкой остается воздушный пузырек. Чтобы воспрепятствовать попаданию жидкого азота внутрь соломинок, пузырек перемещают в середину соломинки путем энергичного встряхивания. После чего пайету помещают в штатив и ставят в холодильник при температуре 2-4 ̊С на 3-4 часа. Прием называется «эквилибрация». Замораживают сперму по этой технологии на специальном железном щите в стационарном хранилище в газообразном азоте при температуре -150 ̊С, время – 7 минут. Пайеты выпускаются объемом 0,33 мл и 0,25 мл. Одновременно замораживают до 750 соломинок. После замораживания пайеты со спермой перемещают в пластмассовые стаканы, предварительно наполненные жидким азотом. Для сбора соломинок используют специальный собиратель с деревянной ручкой. Хранят замороженную сперму в стационарных хранилищах в пластмассовых стаканах, полностью погруженных в жидкий азот.

Дата добавления: 2015-09-03 | Просмотры: 1530 | Нарушение авторских прав