Рекомендації для оформлення протоколу
Записати класифікації поживних середовищ.
Класифікація поживних середовищ
1. ЗА КОНСИСТЕНЦІЄЮ
Тверді Напіврідкі Рідкі
2. ЗА ПОХОДЖЕННЯМ
Природні Штучні Синтетичні
Асцитична рідина,
Сироватка крові,
Жовч, Яйця
Молоко, картопля,
морква та інші
3. ЗА ПРИЗНАЧЕННЯМ І СКЛАДОМ
Основні диференціально-діагностичні спеціальні
МПБ жовчний бульйон
МПА цукровий бульйон
асцит. бульйон
асцит. агар
| | | | | | | | | | Для виявлення ферментації вуглеводів:
Середовище Гіса
Середовище Ендо
та інші
| | | Селективні середовища:
Середовище Плоскірева
Середовище Левіна
Вісмут-сульфіт-агар
Жовточно-сольовий агар
| | | Середовища, які містять індиферентні речовини:
Цитратний агар Сімонса
| | | Для виявлення окисно-відновної здатності:
Середовища з нітратами
Середовища з барвниками
Середовища Ротберга
| | | | | | Для виявлення протеолітичних та гемолітичних властивостей:
Згорнута сироватка
М’ясо-пептонний желатин,
Кров’яний МПА
| | | | |
ВИМОГИ ДО ПОЖИВНИХ СЕРЕДОВИЩ
1. Повноцінність за хімічним складом.
2. Наявність стимуляторів росту
3. Певна реакція (рН)
4. Буферність
5. Відповідний окисно-відновний потенціал
6. Ізотонічність
7. В’язкість
8. Вологість
9. Прозорість
10. Стерильність
Завдання 1. Замалювати в протоколі зразки різних поживних середовищ та їх компоненти.
Зразки компонентів поживних середовищ
Пептон Агар-агар Желатин
Основні поживні середовища
М’ясо-пептонний М’ясо-пептонний
бульйон (МПБ) агар (МПА)
Спеціальні середовища
Кров’яний МПА Жовточно-сольовий МПА
Диференційно-діагностичні середовища
Ендо Левіна Плоскірева
Глюкоза Лактоза Маніт Сахароза Молоко МПБ
МПА (МПБ)+1% вуглевода + індикатор рН
Склад середовища Ендо:
М’ясо-пептонний агар, 1% лактози,
індикатор рН – основний фуксин (знебарвлений розчином сульфіту натрія)
Завдання 2. Визначити ферментативну активність досліджуваної культури бактерій на строкатому ряді Гіса.
Малюнок змін в середовищах Гіса до і після посіву
Кольоровий ряд Гіса до посіву чистої культури бактерій
Кольоровий ряд Гіса через добу після посіву чистої культури бактерій (відбулась ферментація глюкози).
Для визначення ферментативних властивостей бактерій здійснюють посів культури E.coli на ряд Гіса (виявлення цукролітичних властивостей); культуру Proteus vulgaris засівають уколом на середовище із желатином (виявлення протеолітичних властивостей). Студенти повинні ознайомитись зі змінами, які відбуваються в названих середовищах при наявності у бактерій відповідних ферментів та токсинів. Так, на середовищах Гіса змінюється колір, середовище із желатином розріджується, а на кров’яному агарі навколо колоній, які виділяють гемотоксин, з’являється зона просвітлення (демонстрація).
Завдання 3. Вивчити принципи та методи стерилізації.
Принципи стерилізації
ФІЗИЧНИЙ
| ФІЗИКО-ХІМІЧНИЙ
| ХІМІЧНИЙ
| БІОЛОГІЧНИЙ
| · Теплова
· Ультразвукова
· Променева
· Електрострумом і струмом ультрависокої частоти
| Адсорбційно-фільтраційна, фільтри свічки, фільтри пластинки (азбестові, нітроцелюлозні)
| Обробка: галоїдами, кислотами, альдегідами, лугами, ефірами, спиртами та ін.
| Обробка антибіотиками
|
Теплова стерилізація
Методи стерилізації
| Апарати
| Умови стерилізації
| Об’єкти, що стерилізують
| Температура
| Час
| Прожарювання та обпалювання
| ______
|
> 200 ºС
|
2-3-с.
| Петлі, шпателі, пінцети, предметне скло
| Кип’ятіння
| Стерилізатор
| 100ºС
| 30-60 хв.
| Голки, шприци, хірургічні інструменти
| Текучою парою
| Текуче-парові стерилізатори (аппарат Коха), автоклави, водяні бані
| 100ºС
| 3 дні підряд по 30 хв. (дрібна стерилізація)
| Желатина, молоко, живильні середовища з вуглеводами
| Тиндалізація (багаторазова дія парою)
| --- // ---
| 60-65ºС
| По 1 годині 5 днів
| Сироватка, антибіотики, лікарські речовини
| Пастеризація
| --- // ---
| 70ºС
| 30 хв.
| Молоко, вино
| Пара під тиском
| Автоклави
| 120°С;
2А –
| 45 хв.
| Посуд, середовища (МПА, МПБ), перев’язувальний матеріал, білизна, хірургічні інструменти, гумові рукавички, інфекційний матеріал
| Сухе підігріте повітря
| Сухі повітряні стерилізатори
| 160º
165º
| 1 година
45 хв.
| Посуд та ін.
|
Контроль ефективності стерилізації в автоклаві.
· Хімічний контроль – використовують речовини з певною температурою плавлення (сірка – 119ºС, бензойна кислота – 120-122ºС, бензонафтол – 110ºС, маноза і сечовина – 132-133ºС, індикаторні папірці температурного режиму).
Сірка
До Після
стерилізації стерилізації
· Біологічний контроль (біотести – це паперові диски або смужки, клаптики марлі, на яких знаходяться спорові бактерії з відомою термостійкістю).
Паперові диски
зі споровою культурою бактерій
Питання для самоконтролю.
· Що вивчає фізіологія мікроорганізмів?
· Які особливості метаболічних процесів у бактерій?
· Які є ферменти у бактерій, їх класифікація?
· Який механізм живлення у бактерій і як поділяються мікроорганізми за типом живлення?
· Як поділяються мікроорганізми за типом дихання?
· Класифікація поживних середовищ для культивування мікроорганізмів. Як поділяються поживні середовища за призначенням?
· Які принципи приготування різних груп поживних середовищ, вимоги до них?
· Як визначають ферментативну активність бактерій?
· Яка чутливість мікроорганізмів до дії фізичних, хімічних та біологічних агентів?
· Які існують принципи і методи стерилізації?
· Які стерилізаційні прилади та режими стерилізації застосовують в мікробіологічній практиці?
· Які існують методи контролю ефективності стерилізації в автоклаві і повітряно-жаровому стерилізаторі?
· Що таке дезинфекція, асептика, антисептика?
Дата добавления: 2015-09-03 | Просмотры: 676 | Нарушение авторских прав
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | 13 | 14 | 15 | 16 | 17 | 18 | 19 | 20 | 21 | 22 | 23 |
|