АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология

Рекомендації для оформлення протоколу. Виділення чистих культур і їх ідентифікація (визначення видової належності) представляють собою суть основного методу діагностики інфекційних захворювань -

Виділення чистих культур і їх ідентифікація (визначення видової належності) представляють собою суть основного методу діагностики інфекційних захворювань - бактеріологічного.

Методи та принципи виділення чистих культур бактерій.

І. Методи, які ґрунтуються на принципі механічного роз’єднання мікроорганізмів:

1. Метод серійних розведень матеріалу в рідкому поживному середовищі (метод Л.Пастера).

1мл 1мл 1мл 1мл 1мл 1мл

10^-1 10^-2 10^-3 10^-4 10^-5 10^-6

Суміш

бактерій

по 9 мл МПБ

2. Метод пластинчатих розведень матеріалу (метод Р.Коха).

1мл 1мл 1мл 1мл 1мл 1мл

10^-1 10^-2 10^-3 10^-4 10^-5 10^-6

Суміш

бактерій

по 9 мл МПА (50^оС)

окремі колонії

Чашки Петрі

Метод розсіву матеріалу по поверхні твердого поживного середовища за допомогою шпателя (метод К. Дригальського). Окремі колонії

Суцільний ріст

4. Метод штрихових посівів.

Матеріал, який містить мікроорганізми, розсівають паралельними штрихами по поверхні твердого поживного середовища за допомогою бактеріологічної петлі.

I II

I

IV III

Чашка Петрі

5. Методи виділення чистої культури з однієї клітини за допомогою мікроскопу і мікроманіпулятора (одержання клону).

II. Методи, які ґрунтуються на принципі використання біологічних особливостей мікроорганізмів:

1. Метод виділення рухливих бактерій.

2. Метод виділення термостійких бактерій.

3. Метод виділення анаеробів.

4. Методи виділення кислото- і лугостійких мікроорганізмів.

5.Метод виділення мікроорганізмів, які стійкі до антибіотиків, анілінових барвників, тощо.

6. Методи виділення бактерій на елективних середовищах.

7. Метод виділення культур шляхом зараження чутливих лабораторних тварин.

Основні етапи виділення чистої культури бактерій.

Етапи	Завдання етапів
1 I Взяття досліджуваного матеріалу.	1.Взяти матеріал, який містить збудника. 2.Зберегти збудника в матеріалі. 3.Запобігти від інфікування себе і оточуючих осіб.
II Посів матеріалу на тверді поживні середовища.	Одержати ізольовані колонії.
III Дослідження ізольованих колоній: 1. Вивчення культуральних власти-востей (форма, розмір, колір, тощо). 2. Мікроскопія препарату, виготов-леного з мікроорганізмів колонії та пофарбованого за Грамом або іншим методом (визначення морфологічної однорідності та однотинкторіальності)	Відібрати колонію, яка схожа на колонії патогенних мікроорганіз-мів (на основі вивчення культуральних та морфологічних властивостей)
IV Пересів відібраної колонії мікроорганізмів на скошене поживне середовище.	Одержати чисту культуру.
V. Дослідження культури: 1. Вивчення культуральних ознак. 2. Мікроскопія препарату, виготов-леного з мікроорганізмів колонії та пофарбованого за Грамом або іншим методом (визначення морфологічної однорідності та однотинкторіальності)	Визначити чистоту культури (ознаки чистої культури – морфологічна однорідність та однотинкторіальність мікроорганізмів).

Чиста культура - це популяція мікроорганізмів одного виду, яка вирощена на стерильному поживному середовищі.

Після виділення чистої культури визначають вид мікроорганізму (ідентифікують).

Основні етапи ідентифікації (визначення видової належності)

чистої культури бактерій.

Вид – сукупність мікроорганізмів, які мають спільні морфофізіологічні властивості (морфологічні, тинкторіальні, культуральні, ферментативні, антигенні та ін.) і схожий генотип (високий ступінь гомології ДНК, близький сумарний вміст пар Г+Ц).

Вид мікроорганізмів визначають за їх морфологічними, тинкторіальними, культуральними, ферментативними, антигенними та іншими властивостями.

Завдання 1. Розпочати виділення чистої культури аеробних бактерий із суміші мікроорганізмів.

I II

Термостат

IV III

Суміш МПА

мікроорганізмів

Завдання 2. Розпочати виділення чистої культури анаеробних бактерий із грунту.

I II

Анаеростат Термостат

IV III

Суспензія Кров’яний МПА

грунту

Питання для самоконтролю.

· В чому полягає суть бактеріологічного методу діагностики інфекційних захворювань?

· Що таке чиста культура мікроорганізмів?

· Які ознаки чистої культури бактерій?

· З якою метою одержують і де застосовують чисту культуру мікроорганізмів?

· Які існують методи посіву мікроорганізмів з метою отримання ізольованих колоній?

· На яких принципах грунтуються методи виділення чистої культури?

· Які біологічні властивості мікроорганізмів покладені в основу методів виділення чистих культур бактерій?

· Які основні етапи виділення чистої культури, в чому їх суть?

· Які ви знаєте методи створення анаеробних умов для культивування мікроорганізмів?

Дата добавления: 2015-09-03 | Просмотры: 743 | Нарушение авторских прав