АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология

КИСЛАЯ а-НАФТИЛАЦЕТАТ-ЭСТЕРАЗА

Фермент _______локализуется главным образом в лизо-

сомах цитоплазмы клеток и участвует в гидро-

лизе алифатических эфиров.

Метод Кулленкампфа и соавт. П р и н ц и п.

Из соединения а-нафтилацетата при кислом рН

под влиянием фермента образуется свободный

нафтол, дающий цветное окрашивание с фук-

сином.

Р е а к т и в ы. 1. 2,5% раствор глутараль-

дегида (рН 7,2). 2. 4 % раствор солянокислого

фуксина. 3. 4 % раствор нитрата натрия. 4. 0,7 М

фосфатный буфер (рН 5,0). 5. сх-Нафтилацетат.

6. 2 % раствор метилового зеленого. 7. Инкуба-

ционная среда: 2 мл реактива № 2, 2 мл реакти-

ва № 3, 40 мл реактива № 4. 10 мг а-нафтила-

цетата, растворенного в 0,4 мл ацетона. Инку-

бационная среда должна иметь рН 5,8 и гото-

виться перед употреблением.

С п е ц и а л ь н о е о б о р у д о в а н и е. 1.

Холодильник. 2. Весы. 3. Эксикатор.

Ход о п р е д е л е н и я. Высушенные на

воздухе мазки фиксируют в глутаральдегиде

(реактив № 1) при температуре 4 °С в течение

10 мин (нефиксированные мазки можно хранить

в холодильнике 1—2 мес). Промывают дистил-

лированной водой. Инкубируют в инкубацион-

ной среде в течение 1'/2—6 ч. Промывают дис-

тиллированной водой. Докрашивают метиловым

зеленым.

Н о р м а л ь н ы е в е л и ч и н ы. В цито-

плазме лимфоцитов активность фермента выяв-

ляется в виде темно-красных гранул, в нейтро-

филах и моноцитах — в виде диффузной окрас-

ки. СЦК лимфоцитов равен 0,57 + 0,04. Актив-

ность фермента увеличивается при увеличении

времени инкубации. Так, при инкубации в тече-

ние 1'/2 ч активность фермента выявлена в

49,83・,75 % лимфоцитов, при удлинении сро-

ка инкубации до 6 ч эстеразоположительными

становятся 79,7Ѓ} 1,52% лимфоцитов. Исполь-

зование в качестве фиксатора формалина дает

более стабильные результаты.

К л и н и ч е с к о е з н а ч е н и е. Снижение

активности фермента в лимфоцитах характерно

для хронического лимфолейкоза (В-клеточного

варианта); при Т-клеточных пролиферациях ак-

тивность неспецифической кислой эстеразы в

лимфоцитах повышена.

Л и т е р а т у р а. Потапова С. Г., Шахба-

зян Г. П., Демидова Н. В., Козинец Г. И.

Лаб. дело, 1981, № 2, с/74—76; Kullenkam.pl 1.,

Janassi G., Greaves H. Brit. J. Haemal., 1977,

vol. 36. p. 231—240.

Дата добавления: 2015-09-03 | Просмотры: 473 | Нарушение авторских прав