Метод Парка с соавт. в модификации
Ю. И. Бажоры И соавт. П р и н ц и п. Погло-
щение гранулоцитами нитросинего тетразолия
и восстановление его в формазан, выявляемый
в виде гранул синего цвета.
Р е а к т и в ы. 1. Гепарин (20—25 ЕД/мл).
2. 0,15 М фосфатный буфер рН 7,2. 3. 0,2 % рас-
твор нитросинего тетразолия. 4. Изотонический
раствор хлорида натрия. 5. Метанол. 6. 2 % рас-
твор метилового зеленого.
С п е ц и а л ь н о е о б о р у д о в а н и е. 1.
Термостат. 2. Полистироловые пластинки (при-
меняемые для РТГА).
Х о д о п р е д е л е н и я. В лунку пластинки
вносят 0,025 мл раствора гепарина и 0,1 мл кро-
ви, 0,05 мл фосфатного буфера и 0,05 мл рас-
твора тетразолия. Содержимое лунки перемеши-
вают с помощью пипетки. Пластинку накры-
вают фильтровальной бумагой, смоченной изо-
тоническим раствором хлорида натрия и стек-
лянной пластинкой соответствующих размеров.
Для создания влажной камеры стеклянную пла-
стинку прижимают с помощью пружинных за-
жимов. Инкубируют в термостате при 37 °С в те-
чение 15 мин, затем при комнатной температуре
в течение 15 мин. После каждого этапа инку-
бации смесь перемешивают пастеровской пипет-
кой (продувая воздух). Готовят мазки, высуши-
вают, фиксируют метанолом и докрашивают
метиловым зеленым.
В о с п р о и з в о д и м о с т ь м е т о д а. Ко-
эффициент вариации у здоровых 9,2 %, у боль-
ных — 6,6 % (не превышает допустимый).
Н о р м а л ь н ы е в е л и ч и н ы. У здоро-
вых гранулы формазана обнаруживают в 7,2 Ѓ}
+ 1,2% нейтрофилов.
Метод Стюарта и соавт. в модификации
Б. С. Нагоева. П р и н ц и п см. Метод Парка.
Р е а к т и в ы. 1. Гепарин — 10 ЕД в 1 мл
0,9 % раствора хлорида натрия. 2. 0,1 % вод-
ный раствор нитросинего тетразолия. 3. 50 %
раствор формалина в 0,9 % растворе хлорида
натрия. 4. 3,4 % раствор хлорида натрия. 5. 4 %
формалиново-спиртовой раствор. 6. 0,5 % раст-
вор сафранина в 0,9 % растворе хлорида на-
трия.
С п е ц и а л ь н о е о б о р у д о в а н и е. 1.
Центрифуга. 2. Термостат или водяная баня
на 37 °С.
Х о д о п р е д е л е н и я. Смешивают 0,1 мл
крови из пальца с 0,1 мл раствора гепарина.
Добавляют 0,1 мл раствора нитросинего тетра-
золия. Инкубируют смесь на водяной бане (или
в термостате) при 37 °С в течение 10 мин.
Фиксируют смесь в растворе формалина 3 мин.
Добавляют 3 мл дистиллированной воды на 20 с
(для лизиса эритроцитов). Добавляют 1 мл
3,4 % раствора хлорида натрия (для восста-
новления изотонии) и оставляют при комнатной
температуре на 10 мин. Центрифугируют 5 мин
при 1000 об/мин. Удаляют пастеровской пипет-
кой надосадочную жидкость, из осадка готовят
мазки. Фиксируют мазки в формалиново-спирто-
вом растворе 30 с и докрашивают сафранином.
Н о р м а л ь н ы е в е л и ч и н ы. У здоровых
людей положительный НСТ-тест выявлен в
9,34 Ѓ} 0,4 % нейтрофилов. У здоровых СЦК
составляет 13,3 Ѓ} 0,6.
К л и н и ч е с к о е з н а ч е н и е. НСТ-тест
повышен при инфекционных заболеваниях бак-
териальной этиологии, при гнойно-воспалитель-
ных процессах, злокачественных новообразова-
ниях.__
Дата добавления: 2015-09-03 | Просмотры: 529 | Нарушение авторских прав
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 |
|