Лабораторная диагностика. В связи со сходством клинических проявлений и симптоматики легионеллезной и пневмококковой пневмонии быстрая и эффективная лабораторная диагностика
В связи со сходством клинических проявлений и симптоматики легионеллезной и пневмококковой пневмонии быстрая и эффективная лабораторная диагностика приобретает решающее значение для выбора тактики этиотропной терапии больных. В 1999 и в 2002 годах экспертами ВОЗ и Европейской рабочей группой по легионеллезу соответственно в качестве диагностических критериев приняты стандарты, согласно которыми диагноз легионеллеза в случае острой инфекции нижних дыхательных путей (клинически и рентгенологически подтвержденной) считается установленным:
1. При выделении культуры легионелл из отделяемого респираторного тракта или легочной ткани.
2. При 4-кратном или более нарастании титра специфических антител к L. pneumophila серогруппа 1 в реакции непрямой иммунофлюоресценции.
3. При определении растворимого антигена L.pneumophila серогруппа 1 в моче иммуноферментным или иммунохроматографическим методом.
При отсутствии сыворотки крови, взятой в ранние сроки болезни, выявление достоверно высокого уровня антител к L.pneumophila серогруппа 1(≥1:128) в одиночной сыворотке методом непрямой иммунофлюоресценции позволяет считать диагноз легионеллеза предположительно установленным. Аналогичным образом интерпретируются результаты, полученные на основании выявления антигенов возбудителя или его ДНК в респираторном секрете или легочной ткани с помощью прямой иммунофлюоресценции или ПЦР.
Пп. 2 и 3 стандартов лабораторной диагностики в настоящее время распространяется только на L.pneumophila серогруппы 1. Для других серогрупп L.pneumophila результаты, получаемые по определению антител или выявлению антигена в моче, позволяют установить лишь предполагаемый диагноз. Выделении культуры возбудителя остается единственным методом, устанавливающим окончательный диагноз в случае инфекции, вызываемой другими серогруппами L.pneumophila или видами Legionella spp. В то же время следует отметить, что более 80% спорадических и групповых случаев легионеллеза вызваны штаммами L.pneumophila серогруппа 1, а при эпидемических вспышках внебольничных пневмоний этиологическое значение штаммов L.pneumophila серогруппа 1 подтверждено в 96% случаев. Основным методом, позволяющим осуществлять в настоящее время своевременную диагностику и мониторинг легионеллезной инфекции, является определение легионеллезного антигена в моче иммунохроматографическим или иммуноферементным методом. Метод позволяет окончательно подтвердить диагноз в течение 1-2 часов. Превосходство данного метода над другими, включенными в стандарт состоит, прежде всего, в сроках исследования и доступности клинического материала.
Бактериологический метод занимает не менее 4-5 суток, причем для получения клинического материала требуются инвазивные процедуры (бронхоскопия, биопсия), так как из мокроты, особенно после начала этиотропной терапии возбудитель удается выделить далеко не всегда. Выявление диагностического нарастания титра антител в реакции непрямой иммунофлюоресценции возможно лишь на 3-ей неделе заболевания, когда проведен курс антибиотикотерапии и исход заболевания обычно ясен. Необходимость исследования парных сывороток определяет ретроспективный характер диагностики легионеллеза данным методом.
Нозокомиальный (внутрибольничный) легионеллез может быть вызван не только возбудителем болезни легионеров - L.pneumophila, но и другими оппортунистическими видами легионелл, прежде всего, L.micdadei, L.bozemanii, L.dumoffii, L.longbeachae. В этой связи при данной форме заболевания основным методом диагностики становится бактериологический, поскольку метод определения антигена в моче стандартизован только для L.pneumophila серогруппы 1. Для нозокомиального легионеллеза помимо типичной клинической симптоматики характерны внелегочные проявления, в связи с чем возбудитель может быть выделен не только из отделяемого респираторного тракта, но и из крови.