АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология

Конкурентный тип

Назначение.

Предназначена для выявления поверхностного антигена вируса гепатита В (HBs Ag) в сыворотках и плазме крови при диагностики вирусного гепатита В и определение носительства HBs Ag.

Компоненты:

1) Исследуемый материал – сыворотка или плазма крови (HBs Ag?)

2) Антитела к HBs Ag, адсорбированные на поверхности лунки полистиролого микропланшета

3) Конъюгат – мышиные моноклониальные антитела к HBs Ag, меченые пероксидазой

4) Ортофенилендиамин (ОФД) – субстрат

5) Фосфатно – солевой буфер

6) Контрольные сыворотки:

- положительная (сыворотка с HBs Ag)

- отрицательная (сыворотка без HBs Ag).

Ход работы.

1) Внесение контрольных и исследуемых сывороток.

2) Инкубация 1 час при 37⁰ С

3) Отмывание лунок.

4) Внесение конъюгата

5) Инкубация 1 час при 37⁰ С

6) Отмывание лунок.

7) Внесение ОФД. При наличии HBs Ag раствор в лунках желтеет.

Учёт ИФА проводят по оптической плотности с помощью фотометра. Степень оптической плотности будет обратно пропорциональной концентрации исследуемых HBs Ag.

Механизм.

Реакция протекает в три фазы:

1) HBs Ag исследуемой сыворотки (плазмы) связывается с гомологичными АТ, адсорбированными на поверхности лунки. Образуется ИК АГ-АТ. (HBs Ag – anti HBs АТ).

2) Антитела HBs Ag, меченые пероксидазой связываются с оставшимися свободными детерминантоми HBs Ag комплекса АГ-АТ. Образуется комплекс АТ-АГ-меченые АТ (anti HBs АТ-HBs Ag-anti HBs АТ, меченые пероксидазой).

3) ОФД взаимодействуют (с пероксидазой) комплекса АТ-АГ-АТ и происходит жёлтое окрашивание.

Дата добавления: 2015-01-12 | Просмотры: 480 | Нарушение авторских прав