АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология

Непрямой тип

Является основной тестовой реакцией диагностики ВИЧ – инфекции.

Цель: Серологическая диагностика ВИЧ-инфекции – обнаружение антител к антигенам ВИЧ.

Компоненты:

1) Исследуемый материал – сыворотка крови (АТ к АГ-м ВИЧ?)

2) Синтетические пептиды имитирующие 2-х антигенов ВИЧ: gp 120 и gр 41, адсорбированные на поверхности полистироловой лунки

3) Антиглобулиновая сыворотка, меченная пероксидазой, полученная путём иммунизации кроликов глобулинами человека (АТ к АТ-м).

4) ОФД

5) Фосфатно-солевой буфер

6) Контрольные сыворотки:

- положительная

- отрицательная

Ход работы.

1) Внесение контрольных и исследуемых сывороток

2) Инкубация 30 минут при 37⁰ С

3) Отмывание

4) Внесение антиглобулиновой сыворотки меченых ферментом

5) Инкубация 30 минут при 37⁰ С

6) Отмывание

7) Внесение ОФД

Механизм.

Реакция протекает в 3 фазы:

1) Антитела к ВИЧ исследуемой сыворотки связываются с гомологичными антигенами (gр 120 и gр 41) и на поверхности сорбента образуется ИК АГ-АТ (АТ к ВИЧ – АГ ВИЧ)

2) Образование ИК АГ-АТ-АТ, меченые пероксидазой, т.к. АТ исследуемой сыворотки являются антигенами для антиглобулиновой сыворотки

3) ОФД взаимодействует с пероксидазой комплекса АГ-АТ-АТ и происходит жёлтое окрашивание раствора лунки. Степень ферментативной активности прямо пропорциональна концентрации исследуемых АТ.

Дата добавления: 2015-01-12 | Просмотры: 585 | Нарушение авторских прав