РЕАКЦИЯ ИММУНОФЛЮОРИСЦЕНЦИИ (РИФ)
В качествен метки используются светящиеся флюорохромные красители (изотиоционат флюоресцеина и др.).
Существуют различные модификации РИФ. Для экспресс – диагностики инфекционных заболеваний – для выявления микробов или их антигенов в исследуемом материале применяется РИФ по Кунсу.
Выделяют два метода РИФ по Кунсу: прямой и непрямой.
Компоненты прямой РИФ:
1) Исследуемый материал (испражнение, отделяемое носоглотки и др.)
2) Меченая специфическая иммунная сыворотка, содержащая АТ-ла к искомому антигену
3) Изотонический раствор хлорида натрия.
Мазок из исследуемого материала обрабатывают меченой антисывороткой.
Происходит реакция АГ – АТ. При люминесценнтнгом микроскопическом исследовании в том участке, где локализуются комплексы АГ–АТ, обнаруживают флюрисценцию – свечение.
Компоненты не прямой РИФ:
1) Исследуемый материал.
2) Специфическая антисыворотка.
3) Антиглобулиновая сыворотка (АТ–ла против иммуноглобулина), меченная флюорихромом
4) Изотомический раствор хлорида натрия.
Мазок из исследуемого материала с начала обрабатывают иммунной сывороткой к искомому антигену, а затем – меченной антиглобулиновой сывороткой.
Светящиеся комплексы АГ-АТ – меченные АТ обнаруживаются при помощи люминесцентного микроскопа.
Преимущество не прямого метода состоит в том, что нет необходимости приготовления широкого набора флюоресцирующих специфических сывороток, а применяется лишь одна флорисцирующая антиглобулиновая сыворотка.
Также выделяют 4-х компонентную разновидность не прямой РИФ, когда дополнительно вводится комплимент (сыворотка морской свинки). При положительной реакции образуется комплекс АГ-АТ – меченные – АТ-комплемент.
Дата добавления: 2015-01-12 | Просмотры: 692 | Нарушение авторских прав
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | 13 | 14 | 15 | 16 | 17 | 18 | 19 | 20 | 21 | 22 | 23 | 24 |
|