Тема: СЕРОЛОГІЧНИЙ МЕТОД ДОСЛІДЖЕННЯ
Практичне заняття № 5
Мета: ознайомитись з серологічним методом діагностики інфекційних хвороб; засвоїти методику постановки реакції аглютинації.
Обладнання: агарова культура, діагностична сироватка предметні скельця, бактеріологічні петлі, пастерівські піпетки, демонстраційна реакція аглютинації об'ємним методом.
Хід роботи:
1. Розібрати принцип та механізм реакції аглютинації (за допомогою таблиці);
2. Провести орієнтовну реакцію аглютинації;
3. Облік та оцінка результатів орієнтовної реакції аглютинації;
4. Ознайомитись з допомогою таблиці з методикою постановки розгорнутої реакції аглютинації;
5. Провести облік та оцінку результатів розгорнутої реакції аглютинації.
Серологічний метод – це виявлення невідомих антигенів збудника і специфічних антитіл в сироватці крові хворих за допомогою серологічних реакцій.
Серологічні реакції - це реакції взаємодії між антигеном і антитілом, які протікають у дві фази:
1-а - специфічна - утворення комплексу антиген-антитіло, яка є невидимою;
2-а - неспецифічна - специфічний комплекс антиген-антитіло, який взаємодіє з неспецифічними факторами середовища в якому проходить реакція.
Результат їх взаємодії, можна оцінити візуально - (гемоліз, склеювання, випадання в осад, розчинення,).
Серологічні реакції використовують з метою:
1 - серодіагностики інфекційних хвороб; тобто для виявлення невідомих антитіл в сироватці крові за допомогою відомого антигену (діагностикуму);
2 - сероідентифікації - визначення виду мікроорганізмів за допомогою стандартних діагностичних сироваток.
Завдання 1
Реакція аглютинації – це склеювання і випадання в осад мікробів або інших клітин під дією антитіл в присутності електроліту (ізотонічного розчину натрію хлору). Існує два методи постановки даної реакції: на склі – орієнтовна, в пробірках – розгорнута.
Феномен аглютинації полягає в здатності антитіл зв'язуватись із корпускулярними антигенами, що веде до утворення агрегатів, які випадають в осад. Антитіла (АТ) називаються аглютиніни; антигени (АГ) – аглютиногени; а осад – комплекс (АГ+АТ) - аглютинат.
Реакція аглютинації характеризується строгою специфічністю. В залежності від характеру аглютинату розрізняють дрібнозернисту і великопластівцеву аглютинацію.
Завдання 2
Алгоритм " Проведення реакції аглютинації на склі "
- Обезжирити предметне скло;
- Обвести за допомогою олівця 3 кружечки на предметному склі;
- Позначити 1-й ― Контроль антитіла (КАТ);
2-й ― досліджувана крапля (Д);
3-й ― Контроль антигену (КАГ).
- Внести за допомогою пастерівської піпетки в кружечки:
1-й ― сироватку;
2-й ― сироватку;
3-й ― і зотонгічний розчин.
- Внести в 2-у і 3-ю краплі досліджувану чисту культуру мікроорганізмів (або частинку ізольованої колонії), кожен раз прожарюючи бактеріологічну петлю;
- Проемульгувати;
- Залишити на 1 - 3 хвилини;
Дата добавления: 2015-02-02 | Просмотры: 4249 | Нарушение авторских прав
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
|