АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология
|
Сложные методы окраски
Они предусматривают последовательное нанесение на мазок не менее двух красителей, различающихся: по химическому составу и контрастных по цвету, по использованию протрав (кислот, щелочей) и дифференцирующих веществ. Это позволяет выявить определенные структуры клеток и дифференцировать один вид микроорганизмов от другого. Различают специальные методы окраски капсул (Бурри – Гинса), спор (Ожешко), кислотоустойчивых бактерий (Циля-Нильсена), клеточной стенки (Грама).
АЛГОРИТМ ОКРАСКИ ПО МЕТОДУ ГРАМА
Этапы окраски
| Механизм окраски клеточной стенки
|
| Гр +
| Гр -
| 1.На фиксированный мазок нанести бумажку по Синеву, смочить водой. Через 1- 2 мин. ее снять, краситель слить.
2.Нанести р – р Люголя на 1- 2 мин (до почернения).
| В результате образуется комплекс краситель генцианфиолетовый - йод – составная часть клетки. Клетка окрашивается в фиолетовый цвет.
| 3.Обесцветить этиловым спиртом (30- 40 сек.) до прекращения отхождения фиолетовых струек красителя.
Переобесцвечивание мазка спиртом приводит к ошибке при окраске по Граму.
| Способность удерживать образовавшийся комплекс различна у Гр + и Гр – бактерий. Это зависит от различий в химическом составе и проницаемости клеточной стенки
| У Гр + бактерий пептидогликан многослоен, с ним связаны тейхоевые кислоты, что создает условия для прочной окраски и резистентности к обесцвечиванию спиртом.
| У Гр – бактерий, имеется наружная мембрана (липиды, белки, полисахариды), которые пронизывают белки- порины, обесцвечивающие диффузию различных соединений.
| 4.Промыть водой.
| Гр + бактерии сохраняют фиолетовый цвет.
| Гр – бактерии обесцвечиваются, разрушенный краситель удаляется.
| 5.Докрасить водным фуксином в течение 2-3 мин. Промыть водой. Просушить.
| Гр + бактерии сохраняют фиолетовый цвет.
| Гр – бактерии окрашиваются фуксином в розовый цвет.
| | | | |
Дата добавления: 2015-09-03 | Просмотры: 661 | Нарушение авторских прав
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | 13 | 14 | 15 | 16 | 17 |
|