 |
|
АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология |
Серологические методы исследования (серологические реакции)В основе всех серологических реакций лежит взаимодействие антигена и антитела (Ag и At). Эти реакции называют серологическими (от лат.Serum-сыворотка) или гуморальными (от лат.Humor-жидкость), потому что участвующие в них антитела (иммуноглобулины) всегда находятся в сыворотке крови. Серологические реакции применяют в двух направлениях: 1. Обнаружение с диагностической целью антител в сыворотке крови обследуемого. В этом случае из двух компонентов реакции (антитело, антиген) неизвестным остается является сыворотка крови (антитела)э поэтому такое исследование требует постановки реакции с заведомо известными антигенами. В качестве антигенов могут быть: взвесь живых или убитых микробов, экстракты или их отдельные фракции, при диагностике бактериальных инфекций. При вирусных инфекциях - это аллантоисная, амниотическая жидкости, суспензии ХАО, клетках тканевых культур. Положительный результат реакции свидетельствует о наличии в крови антител, гомологичных примененному антигену, отрицательный указывает на отсутствие таковых. Достоверные результаты серологической диагностики получают при изучении «парных» сывороток крови больных, взятой в первые дни болезни и через разные промежутки времени от начала заболевания. В этом случае удается наблюдать динамику нарастания антител. 2. Установление родовой, видовой и типовой принадлежности микроба (вируса). Серологическая идентификация. В этом случае неизвестным компонентом реакции является антиген. Такое исследование требует постановки реакции с заведомо известными иммунными сыворотками. Иммунные сыворотки получают путем длительной иммунизации животных с соответствующими антигенами. Иммунные сыворотки должны обладать высоким уровнем антител и специфичностью. Уровень антител характеризуется их титром, который определяется в серологической реакции. Титр сыворотки (антител) – это наибольшее разведение сыворотки, дающее положительный результат. Для серологической идентификации диагностические сыворотки выпускают нативные (неадсорбированные), они обладают высоким титром (1: 12800 - 1: 25000). Недостатком этих сывороток является то, что они не свободны от антител к микробам, имеющим общие антигены в пределах группы, рода, семейства, в результате чего они способны давать групповые реакции. Адсорбированные сыворотки отличаются строгой специфичностью, но обладают низким титром (1: 40 – 1: 320). Адсорбированные сыворотки применяют в основном в реакции агглютинации на стекле. Эти сыворотки не подлежат разведению. Получение сыворотки. Кровь берут натощак (во избежание хилезности, т.е мутности сыворотки) из локтевой вены или из пальца. Кровь в количестве 5-6 мл берут в стерильную пробирку и ставят ее на 0,5-1 час в термостат при 37°С. Образовавшийся кровяной сгусток отделяют от стенок стерильной палочкой или пастеровской пипеткой, после чего оставляют на 18-20 часов в прохладном месте. Отстоявшуюся сыворотку сливают в стерильную пробирку и в таком виде сыворотку можно хранить при 4-10°С до месяца. Посуда для серологической реакции должна быть чистой сухой, стерилизация для нее не обязательна. Она не должна содержать остатков щелочей, кислот, дезинфицирующих веществ.
Приложение 2 Дата добавления: 2015-09-03 | Просмотры: 748 | Нарушение авторских прав |