АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология

РЕГИСТРАЦИЯ ЭРИТРОГРАММЫ

Подготовительный этап.

1. Включить все приборы и дать им прогреться 15 - 30 минут. Лентопротяжный механизм самопишущего потенциометра - тумблер "диаграмма" не включать.

2. установить нужный светофильтр.

Далее возможны два основных варианта: а) исходный образец концентрированная суспензия эритроцитов или даже цельная кровь (с антикоагулянтом); б) исходный образец разбавленная до рабочей концентрации суспензия клеток. В зависимости от варианта меняется порядок действий.

а) Налить в кювету КФК физиологический раствор до риски на одной из граней кюветы и установить кювету в кюветное отделение КФК.

- Установить блок механической мешалки как крышку кюветного отделения и включить мешалку.

- Регулировками чувствительности установить стрелку прибора на 100% пропускания.

- Включить лентопротяжный механизм самописца. Прописать на диаграммной ленте 1 - 2 см базовой линии -I соответствующей 100% пропускания (точнее дождаться, когда само пропишется).

- Через специальное отверстие в крышке кюветного отделения (рис.5) ввести в кювету 10 мкл суспензии эритроцитов: концентрация суспензии должна соответствовать концентрации эритроцитов в крови разбавленной в 5 раз, вместо суспензии эритроцитов можно сразу вносить кровь разбавленную в 5 раз - присутствием других форменных элементов и компонентов плазмы крови можно пренебречь - конечное разбавление в кювете составит около пяти тысяч раз. Каплю разбавленной крови лучше всего вводить кювету с помощью конического полиэтиленового наконечника от автоматического микродозатора, хорошо бы вместе с самим микродоза. - 10 тором (рис5).

Рис.5. Устройство кюветного отделения (рисунок выполнен не пропорционально).

1 - стенка кюветного отделения КФК

2 - оптическое окошко

3 - ход лучей

4 - конический наконечник микродозатора

5 - штуцер с направляющим отверстием

6 - пипетка

7 - провода мешалки

8 - двигатель мешалки

9 - кювета с образцом

-в течение 2 - 3 минут " прописать" на диаграммной ленте - базовую линию- II соответствующую начальной концентрации клеток - уровень соответствующий начальному турбидиметрическому ослаблению суспензии. Заодно, необходимо убедиться, что спонтанный гемолиз отсутствует - в этом случае записывается СТРОГОВЕРТИКАЛЬНАЯ шумовая дорожка (рис.6).

- ДАЛЕЕ ПУНКТЫ а) И б) СОВПАДАЮТ.

б) - установить в кюветное отделение кювету с чистой средой и прописать базовую линию -I - уровень 100%

- заменить среду в кювете на суспензию эритроцитов и прописать на диаграммной ленте уровень начального Т. ослабления.

Измерение.

2. -Записать на диаграммной ленте начальные условия измерения (лучше всего фломастером): D o - начальную оптическую плотность, дату, гемолитик, скорость ленты и т.п.

3. - через отверстие в штуцере ввести в кювету гемолитик; если нет специального указания от преподавателя то 20 мкл 2н СН₃СООН.

4. - отметить на диаграммной ленте момент ввода гемолитика.

5. - дождаться конца гемолиза и записать на ленте значение остаточной оптической плотности.

6. - выключить лентопротяжный механизм, мотор мешалки и переставить крышку кюветного отделения на края стенок сосуда для мытья мешалки: мешалку мыть в физ. растворе, в качестве сосуда для мытья удобен кристаллизатор и т.п. Вынуть кювету и также промыть 2-3 раза физ. раствором.

ДЛЯ СЛЕДУЮЩЕГО ИЗМЕРЕНИЯ НАРУЖНЫЕ ПОВЕРХНОСТИ ГРАНЕЙ КЮВЕТЫ ДОЛЖНЫ БЫТЬ ЧИСТЫМИ И СУХИМИ. ПРОТИРАТЬ БАЙКОВОЙ САЛФЕТКОЙ!

Рис.6. Примерный вид эритрограммы на диаграммной ленте самопишущего потенциометра. (нормальная диаграмма)

1- базовая линия-I

2- базовая линия-II

3- место ввода гемолитика

4- запись начальных условий измерения

5- примерный вид базовой линии-II при спонтанном гемолизе

6- перфорационные отверстия диаграммной ленты.

Дата добавления: 2015-09-18 | Просмотры: 486 | Нарушение авторских прав