А. Определение количества эритроцитов в крови человека
При определении количества эритроцитов кровь разводят в пробирке в 201 раз (≈200 раз) изотоническим (0,85%) или гипертоническим (3%) раствором хлорида натрия. В последнем эритроциты сморщиваются, становятся рельефными и лучше видны под микроскопом. Эритроциты считают в 5 больших квадратах (деленных на 16 маленьких), расположенных по диагонали сетки Горяева. Считают эритроциты, находящиеся внутри каждого маленького квадратика, а также на верхней и левой его границах. Найденное количество эритроцитов подставляют в формулу:
где х - количество эритроцитов в 1 л исследуемой крови; а - содержание эритроцитов в 5 больших (80 маленьких) квадратах; 1/4000 мм3 - объем одного маленького квадратика; 200 - степень разведения крови; 106 - коэффициент для пересчета по международной системе единиц СИ.
Для работы необходимы: микроскоп, счетная камера, стеклянные палочки, пипетки от гемометра Сали, резиновая трубка со стеклянным наконечником (мундштук), градуированные пипетки, пробирки длиной 1·10-1 м и диаметром 1·10-2 м (10×1 см), скарификатор, спирт, вата, спиртовой раствор йода, 3% (0,85%) раствор хлорида натрия.
Ход работы. 1. В предварительно высушенную, чистую пробирку отмерить 4·10-3 л (4 мл) разводящей жидкости и закрыть ее пробкой.
2. На тупой конец пипетки от гемометра Сали надеть мундштук. Скарификатором произвести укол в мякоть пальца. Взяв стеклянный наконечник в рот и погрузив кончик капиллярной пипетки в каплю крови, набрать точно 20 мм3 крови.
3. Осторожно выдуть кровь в пробирку с разводящей жидкостью, промыть ею пипетку и закрыть пробирку пробкой. Содержимое пробирки тщательно (но осторожно) перемешать, держа пробирку вертикально.
4. Концом круглой стеклянной палочки взять из пробирки, наклоняя ее, каплю крови и заполнить счетную камеру. После этого камеру надо накрыть покровным стеклом. При заполнении камеры необходимо обратить внимание на то, чтобы под покровным стеклом не было пузырьков воздуха и разведенная кровь не попадала в бороздки камеры. Лучше пользоваться шлифованным покровным стеклом, которое притирают к стеклу камеры до появления ньютоновых колец. Затем камеру заполняют разведенной кровью по принципу капиллярности.
5. Выждать 1 мин и поместить камеру на столик микроскопа. Под малым увеличением найти сетку счетной камеры и перевести тубус микроскопа на большое увеличение.
6. Произвести подсчет эритроцитов в 5 больших (80 маленьких) квадратах, расположенных по диагонали сетки, придерживаясь указанного выше правила.
7. Вычислить количество эритроцитов в 1 л неразведенной крови по формуле.
Дата добавления: 2015-10-20 | Просмотры: 689 | Нарушение авторских прав
|