Методы идентификации нуклеиновых кислот
Методы выявления РНК и ДНК возбудителей нашли применение в основном при диагностике вирусных инфекций. Тем не менее, разработаны тест-системы для идентификации некоторых прихотливых бактерий (например, легионелл, хламидий), а также для идентификации колоний Neisseria gonorrhoeae, Haemophilus influenzae типа b, стрептококков группы В, энтерококков и микобактерий.
Гибридизация нуклеиновых кислот
Наиболее распространены методы гибридизации нуклеиновых кислот (рис. 11 – 17). Принцип методов обусловлен способностью ДНК (и РНК) специфически соединяться (гибридизироваться) с комплементарными фрагментами искусственно созданных нитей ДНК (и РНК), меченных изотопами или ферментами (пероксидазой или щелочной фосфатазой). В дальнейшем образцы исследуют различными методами (например, ИФА).
Ы ВЁРСТКА Рисунок 11–17.
Рис. 11 – 17. Схема гибридизации нуклеиновых кислот.
Метод гибридизации в растворах даёт наиболее быстрые результаты (рис. 11 – 18, А). Широкому внедрению метода препятствует проблема удаления несвязавшихся нитей нуклеиновых кислот.
Метод гибридизации на твёрдой основе (рис. 11 – 18, Б) и его сэндвич - модификация (рис. 11 – 18, В) распространён больше. В качестве твёрдой основы служат мембраны из нитроцеллюлозы или нейлона. Несвязавшиеся реагенты удаляют многократным отмыванием.
Ы ВЁРСТКА Рисунок 11–18. Здесь два графических файла: <11–18а> и <11–18бв>
Рис. 11 – 18. Гибридизация нуклеиновых кислот: в растворах (А), на твёрдой основе (Б), сэндвич – гибридизация (В).
Дата добавления: 2015-09-27 | Просмотры: 489 | Нарушение авторских прав
|